| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一章 绪论 | 第15-26页 |
| 1.1 食品致病因子的检测现状 | 第15页 |
| 1.2 大肠埃希氏菌O157:H7、氯霉素简介 | 第15-16页 |
| 1.2.1 大肠埃希氏菌O157:H7 | 第15页 |
| 1.2.2 氯霉素 | 第15-16页 |
| 1.3 食品致病菌和抗生素残留的检测方法 | 第16-21页 |
| 1.3.1 常规检测方法 | 第16-17页 |
| 1.3.2 免疫学检测方法 | 第17-18页 |
| 1.3.2.1 酶联免疫吸附测定技术 | 第17页 |
| 1.3.2.2 免疫荧光标记技术 | 第17页 |
| 1.3.2.3 胶体金免疫层析 | 第17-18页 |
| 1.3.3 核酸分子检测技术 | 第18-19页 |
| 1.3.3.1 聚合酶链式反应技术 | 第18页 |
| 1.3.3.2 环介导等温扩增技术 | 第18页 |
| 1.3.3.3 基因芯片技术 | 第18-19页 |
| 1.3.3.4 反向斑点杂交 | 第19页 |
| 1.3.4 检测方法的应用现状 | 第19-21页 |
| 1.4 纳米标记探针在快速检测领域的应用 | 第21-23页 |
| 1.4.1 纳米磁珠 | 第21-22页 |
| 1.4.2 石墨烯 | 第22-23页 |
| 1.4.3 双金属纳米粒子 | 第23页 |
| 1.5 便携式葡萄糖传感器对非葡萄糖目标物的检测研究 | 第23-24页 |
| 1.6 课题的研究意义、目的和创新性 | 第24-26页 |
| 1.6.1 研究意义和目的 | 第24-25页 |
| 1.6.2 创新性 | 第25-26页 |
| 第二章 基于葡萄糖传感器和双功能化纳米探针的定量免疫层析法快速检测大肠埃希氏菌O157:H7 | 第26-38页 |
| 2.1 材料与方法 | 第27-30页 |
| 2.1.1 菌种 | 第27页 |
| 2.1.2 试剂和仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.3 功能化磁珠的制备 | 第28页 |
| 2.1.3.1 双功能化磁珠的制备 | 第28页 |
| 2.1.3.2 单功能化磁珠的制备 | 第28页 |
| 2.1.4 免疫层析试纸条的准备 | 第28-29页 |
| 2.1.5 菌株和培养条件 | 第29页 |
| 2.1.6 单功能化磁珠捕获和富集J.coli O157:H7 | 第29页 |
| 2.1.7 双功能化纳米探针定量免疫层析方法的建立 | 第29-30页 |
| 2.1.8 实际样品预培养时间的确定 | 第30页 |
| 2.2 结果和讨论 | 第30-37页 |
| 2.2.1 磁珠的表征 | 第30-32页 |
| 2.2.2 实验条件的优化 | 第32-33页 |
| 2.2.2.1 优化pH和孵育时间 | 第32-33页 |
| 2.2.2.2 优化富集分离过程中单功能化磁珠的使用量 | 第33页 |
| 2.2.3 定量免疫层析方法检测E.coli O157:H7的性能评价 | 第33-35页 |
| 2.2.4 特异性和抗干扰评价 | 第35-36页 |
| 2.2.5 加标食品样品检测评价 | 第36-37页 |
| 2.2.6 实际样品的双盲检测 | 第37页 |
| 2.3 结论 | 第37-38页 |
| 第三章 基于拟酶纳米探针和信号双重放大系统的免疫比色法快速检测大肠埃希氏菌O157:H7 | 第38-53页 |
| 3.1 材料与方法 | 第39-42页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.1.2 捕获探针的制备 | 第39-40页 |
| 3.1.3 rGO-NR-Au@Pt纳米复合材料的制备 | 第40页 |
| 3.1.4 rGO-NR-Au@Pt标记抗体和HRP | 第40-41页 |
| 3.1.5 大肠埃希氏菌O157:H7的免疫比色分析流程 | 第41-42页 |
| 3.1.6 大肠埃希氏菌O157:H7灭活菌液的制备 | 第42页 |
| 3.1.7 预培养时间的确定 | 第42页 |
| 3.1.8 材料的表征 | 第42页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第42-51页 |
| 3.2.1 磁珠和rGO-NR-Au@Pt的表征 | 第42-43页 |
| 3.2.2 捕获探针的制备条件优化 | 第43-45页 |
| 3.2.3 优化Au@Pt的制备和封闭蛋白的选择 | 第45-46页 |
| 3.2.4 免疫比色分析法的分析性能 | 第46-48页 |
| 3.2.5 免疫比色分析的特异性 | 第48-49页 |
| 3.2.6 定性分析的预培养时间 | 第49页 |
| 3.2.7 实际样品的双盲试验 | 第49-51页 |
| 3.3 结论 | 第51-53页 |
| 第四章 基于背景荧光猝灭探针免疫层析技术定量检测牛奶中的氯霉素 | 第53-65页 |
| 4.1 材料与方法 | 第54-58页 |
| 4.1.1 试剂和仪器 | 第54页 |
| 4.1.2 溶液配制 | 第54页 |
| 4.1.3 胶体金的制备 | 第54-55页 |
| 4.1.4 胶体金标记抗体最佳pH值和最佳蛋白浓度的确定 | 第55页 |
| 4.1.5 猝灭探针的制备流程 | 第55页 |
| 4.1.6 试纸条的前处理、组装及结构优化 | 第55-56页 |
| 4.1.7 T线抗原包被量的确定 | 第56页 |
| 4.1.8 本方法检测标准流程的确定 | 第56-57页 |
| 4.1.9 标准曲线的建立 | 第57页 |
| 4.1.10 特异性的测定 | 第57页 |
| 4.1.11 验证加标回收 | 第57-58页 |
| 4.1.12 烤评试验确定稳定性 | 第58页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第58-64页 |
| 4.2.1 胶体金标记抗体的最佳pH值和最佳蛋白浓度 | 第58-59页 |
| 4.2.2 试纸条结构 | 第59-60页 |
| 4.2.3 T线抗原包被量 | 第60-61页 |
| 4.2.4 标准曲线及灵敏度 | 第61-62页 |
| 4.2.5 特异性验证 | 第62页 |
| 4.2.6 加标回收率的测定 | 第62-63页 |
| 4.2.7 稳定性的测定 | 第63-64页 |
| 4.3 结论 | 第64-65页 |
| 第五章 总结与展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-77页 |
| 附录 | 第77-81页 |
| 附件1 英文缩略表 | 第77-80页 |
| 附件2 其他研究 | 第80-81页 |
| 感谢基金支持 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 攻读硕士学位期间主要研究成果 | 第84-85页 |
