| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-25页 |
| 1.1 食源性致病菌与肉品安全 | 第12-18页 |
| 1.1.1 STEC生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.1.2 STEC流行情况简介 | 第14-16页 |
| 1.1.3 肉牛屠宰过程中STEC的主要污染环节 | 第16-18页 |
| 1.2 STEC检测方法简介 | 第18-20页 |
| 1.2.1 传统分离培养 | 第19页 |
| 1.2.2 PCR分离技术 | 第19-20页 |
| 1.3 STEC志贺氏毒素 | 第20-21页 |
| 1.4 STEC血清型分型 | 第21-23页 |
| 1.5 STEC的耐药性 | 第23-24页 |
| 1.6 本课题目的及意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-32页 |
| 2.1 材料 | 第25页 |
| 2.1.1 被检样品 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株 | 第25页 |
| 2.1.3 试验试剂 | 第25页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.3 试验方法 | 第26-32页 |
| 2.3.1 样品的采集 | 第26-27页 |
| 2.3.2 菌株的预富集 | 第27页 |
| 2.3.3 细菌基因组DNA提取及PCR初步筛选 | 第27-29页 |
| 2.3.3.1 细菌基因组DNA提取 | 第27-28页 |
| 2.3.3.1.1 样品预处理 | 第27页 |
| 2.3.3.1.2 细菌DNA提取 | 第27-28页 |
| 2.3.3.2 PCR及琼脂糖凝胶电泳 | 第28-29页 |
| 2.3.3.2.1 PCR反应条件及体系的优化 | 第28-29页 |
| 2.3.3.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| 2.3.3.2.3 样品阳性检测 | 第29页 |
| 2.3.4 STEC显色培养基二次筛选及菌株保存 | 第29-30页 |
| 2.3.4.1 STEC显色培养基二次筛选 | 第29-30页 |
| 2.3.4.2 STEC菌株保存 | 第30页 |
| 2.3.5 STEC血清型鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.6 STEC耐药性检测 | 第31-32页 |
| 2.3.7 数据分析 | 第32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-48页 |
| 3.1 样品预处理条件优化 | 第32-33页 |
| 3.2 PCR条件优化 | 第33-34页 |
| 3.3 PCR初筛结果 | 第34-35页 |
| 3.4 STEC显色培养基二次筛选 | 第35-36页 |
| 3.5 肉牛屠宰过程中STEC的检测 | 第36-42页 |
| 3.5.1 AB两屠宰厂STEC的检出情况 | 第36-38页 |
| 3.5.2 不同屠宰厂不同环节间STEC检出率的比较 | 第38-39页 |
| 3.5.3 不同季节STEC流行率 | 第39-41页 |
| 3.5.4 PCR阳性率与检出率的比较 | 第41-42页 |
| 3.6 STEC血清型鉴定及STX毒力基因 | 第42-44页 |
| 3.6.1 各环节检出STEC的血清型分布 | 第42-43页 |
| 3.6.2 STX毒力基因的分布 | 第43-44页 |
| 3.7 STEC耐药性检测 | 第44-48页 |
| 3.7.1 牛源STEC分离菌株对抗生素的耐药性结果 | 第44-45页 |
| 3.7.2 各血清型的耐药情况 | 第45-47页 |
| 3.7.3 STEC多重耐药性 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-54页 |
| 4.1 肉牛屠宰过程中STEC流行特点 | 第48-49页 |
| 4.2 STEC分离菌株血清型及STX基因分布 | 第49-51页 |
| 4.3 STEC耐药性分析 | 第51-54页 |
| 5 结论 | 第54页 |
| 6 进一步研究内容 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-65页 |
| 致谢 | 第65页 |