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重组蛋白A亲和介质的制备及性能和应用研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-17页
   ·亲和层析概述第8-11页
     ·亲和层析原理第8-9页
     ·亲和层析介质的组成第9页
     ·亲和层析的类型第9-10页
     ·亲和色谱的应用第10-11页
   ·蛋白A研究进展第11-14页
     ·结构特征第11-12页
     ·免疫特性第12页
     ·应用研究第12-13页
     ·在免疫亲和色谱中的发展第13-14页
   ·免疫球蛋白IgG第14-16页
     ·IgG结构特征第14-15页
     ·抗体IgG的应用第15-16页
   ·本论文立题意义及研究内容第16-17页
     ·立题意义第16页
     ·研究内容第16-17页
第二章 材料与方法第17-28页
   ·材料与仪器第17-18页
     ·试剂第17页
     ·酶和菌株第17页
     ·实验仪器第17-18页
   ·重组菌的构建第18-21页
     ·重组菌E.coli BL21(DE3)/pET-28a-spa-his的构建第18-20页
     ·重组菌E.coli BL21(DE3)/pET-28a-z5-his的构建第20-21页
   ·重组蛋白A的表达和纯化第21-23页
     ·重组蛋白A的诱导表达第21页
     ·重组蛋白A表达条件的优化第21-22页
     ·重组蛋白A的纯化第22-23页
   ·层析介质性能研究第23-25页
     ·亲和层析介质的制备第23-24页
     ·静态吸附第24-25页
     ·吸附动力学第25页
   ·自制z5配基亲和层析在猪血IgG纯化中的应用第25-28页
     ·样品准备第25-26页
     ·硫酸铵沉淀法处理样品第26页
     ·亲和色谱纯化猪血IgG第26-28页
第三章 结果与讨论第28-56页
   ·重组菌的构建第28-30页
     ·表达载体pET28a-z5-his的构建第28-29页
     ·载体pMD18T-spa的构建第29-30页
     ·表达载体pET-28a-spa-his的构建第30页
     ·小结第30页
   ·工程菌的诱导表达与金属螯合亲和层析法纯化第30-37页
     ·不同的菌体OD600值对重组蛋白A表达的影响第30-32页
     ·不同的温度对重组蛋白A表达的影响第32-33页
     ·不同的IPTG浓度对重组蛋白A表达的影响第33-34页
     ·不同的诱导时间对重组蛋白A表达的影响第34-35页
     ·重组蛋白A的诱导表达第35-36页
     ·金属Ni螯合亲和层析法纯化蛋白A第36-37页
     ·小结第37页
   ·层析介质性能研究第37-47页
     ·亲和层析介质的制备第37-38页
     ·pH对静态吸附的影响第38-40页
     ·盐离子对静态吸附的影响第40-41页
     ·碱处理对静态吸附的影响第41-43页
     ·吸附动力学第43-45页
     ·pH对吸附动力学的影响第45-46页
     ·盐离子对吸附动力学的影响第46-47页
     ·小结第47页
   ·亲和色谱纯化猪血IgG第47-56页
     ·硫酸铵沉淀法处理样品第47-49页
     ·上样量的优化第49-51页
     ·上样流速的优化第51-54页
     ·稳定性的评价第54页
     ·小结第54-56页
结论与展望第56-58页
 结论第56-57页
 展望第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-63页
附录: 作者在攻读硕士学位期间主要研究成果第63页

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