摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-17页 |
·亲和层析概述 | 第8-11页 |
·亲和层析原理 | 第8-9页 |
·亲和层析介质的组成 | 第9页 |
·亲和层析的类型 | 第9-10页 |
·亲和色谱的应用 | 第10-11页 |
·蛋白A研究进展 | 第11-14页 |
·结构特征 | 第11-12页 |
·免疫特性 | 第12页 |
·应用研究 | 第12-13页 |
·在免疫亲和色谱中的发展 | 第13-14页 |
·免疫球蛋白IgG | 第14-16页 |
·IgG结构特征 | 第14-15页 |
·抗体IgG的应用 | 第15-16页 |
·本论文立题意义及研究内容 | 第16-17页 |
·立题意义 | 第16页 |
·研究内容 | 第16-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-28页 |
·材料与仪器 | 第17-18页 |
·试剂 | 第17页 |
·酶和菌株 | 第17页 |
·实验仪器 | 第17-18页 |
·重组菌的构建 | 第18-21页 |
·重组菌E.coli BL21(DE3)/pET-28a-spa-his的构建 | 第18-20页 |
·重组菌E.coli BL21(DE3)/pET-28a-z5-his的构建 | 第20-21页 |
·重组蛋白A的表达和纯化 | 第21-23页 |
·重组蛋白A的诱导表达 | 第21页 |
·重组蛋白A表达条件的优化 | 第21-22页 |
·重组蛋白A的纯化 | 第22-23页 |
·层析介质性能研究 | 第23-25页 |
·亲和层析介质的制备 | 第23-24页 |
·静态吸附 | 第24-25页 |
·吸附动力学 | 第25页 |
·自制z5配基亲和层析在猪血IgG纯化中的应用 | 第25-28页 |
·样品准备 | 第25-26页 |
·硫酸铵沉淀法处理样品 | 第26页 |
·亲和色谱纯化猪血IgG | 第26-28页 |
第三章 结果与讨论 | 第28-56页 |
·重组菌的构建 | 第28-30页 |
·表达载体pET28a-z5-his的构建 | 第28-29页 |
·载体pMD18T-spa的构建 | 第29-30页 |
·表达载体pET-28a-spa-his的构建 | 第30页 |
·小结 | 第30页 |
·工程菌的诱导表达与金属螯合亲和层析法纯化 | 第30-37页 |
·不同的菌体OD600值对重组蛋白A表达的影响 | 第30-32页 |
·不同的温度对重组蛋白A表达的影响 | 第32-33页 |
·不同的IPTG浓度对重组蛋白A表达的影响 | 第33-34页 |
·不同的诱导时间对重组蛋白A表达的影响 | 第34-35页 |
·重组蛋白A的诱导表达 | 第35-36页 |
·金属Ni螯合亲和层析法纯化蛋白A | 第36-37页 |
·小结 | 第37页 |
·层析介质性能研究 | 第37-47页 |
·亲和层析介质的制备 | 第37-38页 |
·pH对静态吸附的影响 | 第38-40页 |
·盐离子对静态吸附的影响 | 第40-41页 |
·碱处理对静态吸附的影响 | 第41-43页 |
·吸附动力学 | 第43-45页 |
·pH对吸附动力学的影响 | 第45-46页 |
·盐离子对吸附动力学的影响 | 第46-47页 |
·小结 | 第47页 |
·亲和色谱纯化猪血IgG | 第47-56页 |
·硫酸铵沉淀法处理样品 | 第47-49页 |
·上样量的优化 | 第49-51页 |
·上样流速的优化 | 第51-54页 |
·稳定性的评价 | 第54页 |
·小结 | 第54-56页 |
结论与展望 | 第56-58页 |
结论 | 第56-57页 |
展望 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
附录: 作者在攻读硕士学位期间主要研究成果 | 第63页 |