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ε-聚赖氨酸抑制致病菌分子机理及对肠道菌群多样性影响的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
目录第8-14页
第1章 食品防腐剂的概况及ε-多聚赖氨酸的研究进展第14-27页
 摘要第14页
   ·食品防腐剂第14页
   ·化学合成防腐剂第14-16页
   ·天然防腐剂第16-18页
     ·动物源天然防腐剂的种类第16-17页
     ·植物源天然防腐剂的种类第17-18页
     ·微生物源天然防腐剂的种类第18页
     ·天然食品防腐剂存在的问题第18页
   ·ε-聚赖氨酸的抗菌活性及应用第18-26页
     ·ε-聚赖氨酸概述第19-20页
     ·ε-聚赖氨酸的理化性质及其特点第20页
     ·ε-聚赖氨酸的合成、生产和纯化第20-21页
     ·ε-PL的抗菌活性第21-22页
     ·ε-PL在食品中的应用第22-24页
     ·ε-PL在医学上的应用第24-25页
     ·其他生物学应用第25-26页
   ·ε-PL研究的发展趋势第26页
   ·展望第26-27页
第2章 ε-聚赖氨酸拮抗大肠杆菌的活性及抗菌机理研究第27-43页
 摘要第27页
   ·前言第27-28页
   ·材料与方法第28-29页
     ·试验材料第28页
     ·实验仪器设备第28页
     ·培养基配制第28页
     ·试剂配制第28-29页
   ·实验方法第29-34页
     ·ε-PL抗菌活性测定方法的建立第29页
     ·ε-PL抗菌活性的影响因素第29-30页
     ·ε-PL抗菌机理的研究第30-34页
   ·实验结果第34-40页
     ·不同浓度、温度、pH和处理时间对ε-PL抗菌活性的影响第34-36页
     ·ε-PL对E.coli O157:H7形态和结构的影响第36-38页
     ·ε-PL对E.coli O157:H7的氧胁迫作用第38-40页
     ·ε-PL对E.coli O157:H7基因表达的影响第40页
   ·小结与讨论第40-43页
第3章 ε-聚赖氨酸抑制白色念珠菌的基因差异表达分析第43-66页
 摘要第43页
   ·前言第43-44页
   ·材料与方法第44-45页
     ·试验材料第44页
     ·仪器设备及试剂第44页
     ·培养基配制第44页
     ·试剂配制第44-45页
   ·实验方法第45-57页
     ·测定ε-Pl对C.albicans抑菌活性第45页
     ·ε-PL胁迫下C.albicans抑制消减文库的构建第45-52页
     ·RT-qPCR检测ε-PL对C.albicans相关基因转录水平表达的影响第52-53页
     ·斑点杂交第53-54页
     ·RT-qPCR验证SSH文库筛选基因的差异表达第54-56页
     ·Northern印迹杂交第56-57页
   ·实验结果第57-63页
     ·ε-PL抑制C.albicans的敏感浓度第57-58页
     ·C.albicans总RNA的提取第58-59页
     ·消减抑制杂交PCR产物分析第59页
     ·插入片段检测第59-60页
     ·斑点杂交检测第60-61页
     ·阳性克隆的生物信息学分析第61页
     ·RT-qPCR实验结果分析第61-62页
     ·Northern印迹杂交第62-63页
   ·小结与讨论第63-66页
第4章 ε-聚赖氨酸抑制肠炎沙门氏菌的分子机制研究第66-79页
 摘要第66页
   ·前言第66-67页
   ·材料与方法第67页
     ·试验材料第67页
     ·仪器设备及试剂第67页
     ·培养基配制第67页
     ·试剂配制第67页
   ·实验方法第67-72页
     ·S.enteritidis的phoP和rcsF基因缺失株的构建第67-71页
     ·ε-PL对S.enteritidis及其phoP和rcsF基因缺失株生长的影响第71页
     ·ε-PL对S.enteritidis phoP和rcsF基因缺失株基因表达的影响第71-72页
   ·实验结果第72-77页
     ·S.enteritidis phoP和rcsF基因缺失株的构建第73-75页
     ·ε-PL对S.enteritidis phoP和rcsF基因缺失株生长的影响第75-76页
     ·RT-qPCR检测结果第76-77页
   ·小结与讨论第77-79页
第5章 ε-聚赖氨酸对小鼠肠道菌群构成影响研究第79-92页
 摘要第79页
   ·前言第79-80页
   ·材料与方法第80-81页
     ·试验材料第80页
     ·实验仪器设备第80页
     ·主要试剂的配制第80-81页
   ·实验方法第81-85页
     ·动物实验第81页
     ·小鼠粪便样品中总基因组DNA的提取第81页
     ·小鼠粪便中总基因组DNA的PCR扩增第81-82页
     ·DGGE分析第82-83页
     ·DGGE凝胶配制第83页
     ·DGGE胶染色第83页
     ·DGGE条带回收第83页
     ·PCR产物的纯化第83-84页
     ·目的基因与载体pMD18-T的连接第84页
     ·转化第84页
     ·菌落PCR验证阳性克隆子第84页
     ·测序第84-85页
     ·16S rDNA序列分析第85页
     ·RT-qPCR检测第85页
   ·实验结果第85-91页
     ·DGGE分析第85-88页
     ·16S rDNA测序分析第88-89页
     ·RT-qPCR检测第89-91页
   ·讨论第91-92页
第6章 结论与展望第92-95页
   ·结论第92-94页
     ·环境因素对ε-PL抗菌活性的影响第92页
     ·ε-PL对细菌细胞形态和结构的影响第92页
     ·ε-PL的抗菌机理与活性氧有关第92-93页
     ·ε-PL对E.coli O157:H7基因表达水平的影响第93页
     ·ε-PL激发C.albicans基因的差异表达第93页
     ·ε-PL激发S enteritidis中PhoP-PhoQ凋控系统的应答第93-94页
     ·ε-PL对小鼠粪便菌群结构和数量的影响第94页
   ·建议与展望第94-95页
致谢第95-96页
参考文献第96-107页
附录A1 试剂第107-109页
附录A2 仪器设备第109-110页
个人介绍第110页

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