摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-26页 |
1.1 葡萄果实中的香气物质概述 | 第11-13页 |
1.2 葡萄果实中的糖苷结合态香气物质 | 第13-18页 |
1.2.1 葡萄中糖苷结合态香气糖基 | 第13-15页 |
1.2.2 葡萄中糖苷结合态香气糖苷配体 | 第15页 |
1.2.3 糖苷类香气物质的生物学作用 | 第15-16页 |
1.2.4 糖苷键合态香气物质的分析方法 | 第16-18页 |
1.3 葡萄果实萜烯物质生物合成 | 第18-20页 |
1.3.1 萜烯合成骨架路径 | 第18-19页 |
1.3.2 萜烯合成酶家族(TPS) | 第19-20页 |
1.4 葡萄果实萜烯糖基转移酶的研究进展 | 第20-22页 |
1.5 影响萜烯类香气物质积累的因素 | 第22-24页 |
1.5.1 基因型 | 第23页 |
1.5.2 成熟度 | 第23-24页 |
1.5.3 环境因素 | 第24页 |
1.5.4 栽培措施 | 第24页 |
1.6 本研究目的和意义 | 第24-26页 |
第二章 不同芳香类型葡萄果实萜烯物质积累差异及关键基因的筛选 | 第26-57页 |
2.1 实验材料 | 第26-27页 |
2.1.1 植物材料 | 第26-27页 |
2.1.2 试剂与标准品 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-31页 |
2.2.1 葡萄果实理化指标测定 | 第27页 |
2.2.2 游离态香气物质分离提取 | 第27页 |
2.2.3 糖苷结合态香气物质提取 | 第27-28页 |
2.2.4 SPME-GC-MS香气分析条件 | 第28页 |
2.2.5 香气物质定性定量分析 | 第28-29页 |
2.2.6 果实RNA提取及反转录合成cDNA第一条链合成 | 第29-30页 |
2.2.7 实时荧光定量PCR方法 | 第30-31页 |
2.2.8 气象数据来源 | 第31页 |
2.2.9 数据分析 | 第31页 |
2.3 结果与讨论 | 第31-55页 |
2.3.1 '琼瑶浆'、'小白玫瑰'和'小红玫瑰'果实游离态和结合态挥发性物质分析 | 第31-34页 |
2.3.2 决定葡萄芳香类型组分的筛选 | 第34-37页 |
2.3.3 不同品种游离和结合态萜烯物质积累规律 | 第37-48页 |
2.3.4 不同品种游离态和糖苷结合态萜烯主成分分析 | 第48页 |
2.3.5 两个年份甘肃高台产区主要气候参数的比较 | 第48-50页 |
2.3.6 单萜生物合成相关基因转录水平表达 | 第50-55页 |
2.4 小结 | 第55-57页 |
第三章 不同产区小白玫瑰果实萜烯合成代谢差异及关键基因的筛选 | 第57-80页 |
3.1 材料 | 第57-58页 |
3.1.1 植物材料 | 第57页 |
3.1.2 两个产区的气候条件和土壤类型 | 第57-58页 |
3.2 实验方法 | 第58-60页 |
3.2.1 葡萄果实理化指标测定 | 第58页 |
3.2.2 游离态和结合态香气物质分析 | 第58页 |
3.2.3 香气物质定性定量分析 | 第58页 |
3.2.4 RNA-seq测序谱库构建及转录组分析 | 第58-59页 |
3.2.5 序列拼接及比对注释 | 第59页 |
3.2.6 差异表达基因 | 第59-60页 |
3.2.7 实时荧光定量PCR方法 | 第60页 |
3.2.8 数据分析 | 第60页 |
3.2.9 产区气象资料 | 第60页 |
3.3 结果与讨论 | 第60-78页 |
3.3.1 两个产区'小白玫瑰'果实游离态和结合态萜烯香气物质分析 | 第60-67页 |
3.3.2 萜烯合成相关基因转录表达分析 | 第67-70页 |
3.3.3 单萜糖基转移酶(GTs)基因表达轮廓分析 | 第70-72页 |
3.3.4 差异表达基因(DEGs)与转录因子基因(TFs)的共表达网络分析 | 第72-75页 |
3.3.5 果实成熟激素相关基因分析和共表达网络分析 | 第75-78页 |
3.3.6 Real-time PCR验证基因表达 | 第78页 |
3.4 小结 | 第78-80页 |
第四章 单萜葡糖基转移酶基因的转录调控 | 第80-103页 |
4.1 材料与方法 | 第80-82页 |
4.1.1 植物材料 | 第80页 |
4.1.2 仪器 | 第80页 |
4.1.3 常用试剂配制 | 第80-82页 |
4.1.4 主要化学试剂盒试剂盒 | 第82页 |
4.1.5 菌株及载体 | 第82页 |
4.2 实验方法 | 第82-90页 |
4.2.1 单萜葡糖基转移酶全长基因的克隆 | 第82-83页 |
4.2.2 葡萄果实基因组DNA提取与纯化 | 第83-84页 |
4.2.3 葡萄GT14基因启动子序列的获得 | 第84页 |
4.2.4 promoter-LUC/GUS瞬时表达载体构建及转化农杆菌 | 第84-85页 |
4.2.5 农杆菌介导瞬时转化烟草叶片 | 第85页 |
4.2.6 光照、温度和ABA处理烟草叶片 | 第85-86页 |
4.2.7 烟草瞬时转化叶片GUS活性检测 | 第86-88页 |
4.2.8 序列分析 | 第88页 |
4.2.9 Sequenom MassArray系统甲基化检测步骤 | 第88-90页 |
4.3 结果与讨论 | 第90-102页 |
4.3.1 '琼瑶浆'和'小白玫瑰'果实VvGT7和VvGT14基因序列分析 | 第90-93页 |
4.3.2 '琼瑶浆'和'小白玫瑰'果实VvGT14基因启动子的序列分析 | 第93-95页 |
4.3.3 '小白玫瑰'VvGT14启动子对光、温和ABA的响应 | 第95-98页 |
4.3.4 '小白玫瑰'VvGT14启动子甲基化分析 | 第98-102页 |
4.4 小结 | 第102-103页 |
笫五章 全文总结及展望 | 第103-104页 |
5.1 结论 | 第103页 |
5.2 下一步设想 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-114页 |
致谢 | 第114-115页 |
附录 | 第115-130页 |
个人简介 | 第130-131页 |