| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-28页 |
| 1.1 酱香风味及其研究现状 | 第11-14页 |
| 1.1.1 酱香风味形成机制 | 第11-12页 |
| 1.1.2 酱香风味物质 | 第12页 |
| 1.1.3 酱香风味物质研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2 枯草芽孢杆菌酱香风味酶基因 | 第14-18页 |
| 1.2.1 酱香风味酶基因的筛选方法 | 第14-16页 |
| 1.2.2 酱香风味酶基因 | 第16-18页 |
| 1.3 CRISPR/Cas技术 | 第18-26页 |
| 1.3.1 CRISPR/Cas系统的组成 | 第18-20页 |
| 1.3.2 CRISPR/Cas系统的分类 | 第20-21页 |
| 1.3.3 CRISPR/Cas9系统的作用机制 | 第21-24页 |
| 1.3.4 CRISPR/Cas系统在微生物中的应用进展 | 第24-26页 |
| 1.4 研究的目的及意义 | 第26-28页 |
| 第二章 酱香风味酶基因的筛选 | 第28-50页 |
| 2.1 材料 | 第28-30页 |
| 2.1.1 菌株 | 第28页 |
| 2.1.2 主要药品及试剂 | 第28页 |
| 2.1.3 仪器 | 第28-29页 |
| 2.1.4 培养基及试剂的配制 | 第29-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-32页 |
| 2.2.1 菌株培养 | 第30页 |
| 2.2.2 基因组测序 | 第30-31页 |
| 2.2.3 转录组测序 | 第31页 |
| 2.2.4 基因组测序结果分析 | 第31页 |
| 2.2.5 转录组测序分析 | 第31页 |
| 2.2.6 酱香风味候选基因的筛选 | 第31页 |
| 2.2.7 酱香风味差异基因的筛选 | 第31-32页 |
| 2.3 实验结果 | 第32-49页 |
| 2.3.1 基因组测序结果及分析 | 第32-38页 |
| 2.3.2 转录组测序结果及分析 | 第38-42页 |
| 2.3.3 酱香风味候选基因 | 第42-44页 |
| 2.3.4 酱香风味差异基因rocG | 第44-49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-50页 |
| 第三章 酱香风味酶基因alsS和rocGCRISPR/Cas9载体的构建 | 第50-77页 |
| 3.1 材料 | 第50-54页 |
| 3.1.1 菌株 | 第50页 |
| 3.1.2 载体 | 第50页 |
| 3.1.3 主要药品及试剂 | 第50-51页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第51页 |
| 3.1.5 培养基及试剂的配制 | 第51页 |
| 3.1.6 PCR扩增引物 | 第51-54页 |
| 3.2 实验方法 | 第54-63页 |
| 3.2.1 p43/sgRNA重组质粒的构建及验证 | 第54-60页 |
| 3.2.2 p43/sgRNA/donor重组质粒的构建与验证 | 第60-63页 |
| 3.3 结果与分析 | 第63-75页 |
| 3.3.1 alsS,rocG基因序列 | 第63页 |
| 3.3.2 p43/sgRNA重组质粒的构建及验证 | 第63-69页 |
| 3.3.3 p43/sgRNA/donor重组质粒的构建与验证 | 第69-75页 |
| 3.4 讨论 | 第75-77页 |
| 第四章 结论与展望 | 第77-79页 |
| 4.1 结论 | 第77页 |
| 4.2 展望 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-84页 |
| 附录 | 第84-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
