| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-25页 |
| 1.1 纳米抗体的简介 | 第9-11页 |
| 1.1.1 纳米抗体的结构特点 | 第9-11页 |
| 1.1.2 纳米抗体的生物功能特点 | 第11页 |
| 1.2 纳米抗体表达的研究进展 | 第11-20页 |
| 1.2.1 大肠杆菌 | 第15页 |
| 1.2.2 芽孢杆菌 | 第15-16页 |
| 1.2.3 乳酸杆菌 | 第16页 |
| 1.2.4 酵母细胞 | 第16-17页 |
| 1.2.5 丝状真菌 | 第17-18页 |
| 1.2.6 昆虫细胞 | 第18页 |
| 1.2.7 哺乳动物细胞 | 第18-19页 |
| 1.2.8 植物 | 第19-20页 |
| 1.3 纳米抗体产量提高的策略 | 第20-21页 |
| 1.3.1 分子水平 | 第20页 |
| 1.3.2 表达水平 | 第20-21页 |
| 1.3.3 理论分析水平 | 第21页 |
| 1.4 治疗性纳米抗体的研究进展 | 第21-23页 |
| 1.5 本研究的研究内容 | 第23-25页 |
| 第2章 纳米抗体与DsbA-DsbA~(mut)在大肠杆菌中融合表达 | 第25-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 载体及菌株 | 第25页 |
| 2.1.2 实验主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.3 实验器材 | 第26-27页 |
| 2.1.4 溶液及培养基配制 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-33页 |
| 2.2.1 大肠杆菌中重组表达载体的构建及转化 | 第28-29页 |
| 2.2.2 大肠杆菌中VHH10及VHH16初步表达及条件优化 | 第29-30页 |
| 2.2.3 DsbA-DsbA~(mut)-VHH的融合蛋白分离纯化 | 第30-31页 |
| 2.2.4 Western-Blot检测DsbA-DsbA~(mut)-VHH | 第31-32页 |
| 2.2.5 VHH10及VHH16单体纳米抗体的获得 | 第32-33页 |
| 2.2.6 VHH10及VHH16三维结构的分析 | 第33页 |
| 2.3 实验结果及讨论 | 第33-44页 |
| 2.3.1 大肠杆菌中表达载体的构建及鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3.2 大肠杆菌中DsbA-DsbA~(mut)-VHH的初步表达及条件优化 | 第34-37页 |
| 2.3.3 DsbA-DsbA~(mut)-VHH融合蛋白的纯化 | 第37页 |
| 2.3.4 Western-blot验证DsbA-DsbA~(mut)-VHH | 第37-38页 |
| 2.3.5 VHH10及VHH16单体纳米抗体的获得 | 第38-39页 |
| 2.3.6 VHH10及VHH16三维结构分析 | 第39-44页 |
| 2.4 本章小结 | 第44-45页 |
| 第3章 纳米抗体结合活性及热稳定性分析 | 第45-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第45-46页 |
| 3.1.1 菌株与载体 | 第45页 |
| 3.1.2 实验主要试剂 | 第45页 |
| 3.1.3 实验器材 | 第45-46页 |
| 3.1.4 溶液及培养基的配制 | 第46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-49页 |
| 3.2.1 双抗夹心Elisa进行VHH10及VHH16活性检测 | 第46-47页 |
| 3.2.2 VHH10及VHH16热稳定性分析 | 第47-49页 |
| 3.3 实验结果及讨论 | 第49-53页 |
| 3.3.1 双抗夹心Elisa进行VHH10及VHH16活性检测 | 第49-50页 |
| 3.3.2 VHH10及VHH16热稳定性分析 | 第50-53页 |
| 3.4 本章小结 | 第53-55页 |
| 第4章 纳米抗体在枯草芽孢杆菌与毕赤酵母中的表达 | 第55-71页 |
| 4.1 实验材料 | 第55-57页 |
| 4.1.1 载体及菌株 | 第55页 |
| 4.1.2 实验主要试剂 | 第55页 |
| 4.1.3 实验器材 | 第55页 |
| 4.1.4 溶液及培养基配制 | 第55-57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-63页 |
| 4.2.1 VHH10及VHH16在枯草芽孢杆菌中表达 | 第57-60页 |
| 4.2.2 VHH10及VHH16在毕赤酵母中表达 | 第60-63页 |
| 4.3 实验结果及讨论 | 第63-70页 |
| 4.3.1 VHH10及VHH16在枯草芽孢杆菌中表达 | 第63-67页 |
| 4.3.2 VHH10及VHH16在毕赤酵母中表达 | 第67-70页 |
| 4.4 本章小节 | 第70-71页 |
| 第5章 结论与展望 | 第71-73页 |
| 5.1 主要结论 | 第71页 |
| 5.2 展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 发表论文及参加科研情况 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
