| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 8二甲基异戊烯基柚皮素的研究进展 | 第10-14页 |
| 1.1.1 8-二甲基异戊烯基柚皮素的简介 | 第10-11页 |
| 1.1.2 8-二甲基异戊烯基柚皮素的生物活性 | 第11页 |
| 1.1.3 8-二甲基异戊烯基柚皮素的生产方法 | 第11-12页 |
| 1.1.4 8-二甲基异戊烯基柚皮素的生物合成路径 | 第12-14页 |
| 1.2 前体柚皮素的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 植物提取柚皮素 | 第14页 |
| 1.2.2 化学合成柚皮素 | 第14-15页 |
| 1.2.3 生物合成柚皮素 | 第15-17页 |
| 1.3 合成生物学简介 | 第17-20页 |
| 1.3.1 合成生物的发展与应用 | 第17-18页 |
| 1.3.2 合成生物学常用优化策略 | 第18-20页 |
| 1.4 本课题的研究内容与意义 | 第20-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-29页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 实验质粒 | 第22-23页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第24-27页 |
| 2.1.5 实验试剂配制 | 第27-29页 |
| 2.2 基因操作方法 | 第29-33页 |
| 2.2.1 目的片段的PCR扩增 | 第29-30页 |
| 2.2.2 DNA提取及回收 | 第30-31页 |
| 2.2.3 酶切反应与纯化 | 第31-32页 |
| 2.2.3.1 酶切反应 | 第31-32页 |
| 2.2.3.2 纯化 | 第32页 |
| 2.2.4 DNA片段的连接 | 第32-33页 |
| 2.3 大肠杆菌转化与筛选 | 第33-35页 |
| 2.3.1 大肠杆菌宿主转化 | 第33-34页 |
| 2.3.2 转化子的筛选验证 | 第34页 |
| 2.3.3 质粒提取 | 第34-35页 |
| 2.3.4 酶切验证 | 第35页 |
| 2.4 酿酒酵母转化与筛选 | 第35-37页 |
| 2.4.1 酿酒酵母转化 | 第35-36页 |
| 2.4.2 酿酒酵母菌落PCR验证 | 第36-37页 |
| 2.4.3 酿酒酵母基因组提取 | 第37页 |
| 2.5 发酵培养与产物提取 | 第37-39页 |
| 2.5.1 摇瓶发酵 | 第37-38页 |
| 2.5.2 产物提取 | 第38页 |
| 2.5.3 产物检测 | 第38-39页 |
| 2.6 生物信息学分析 | 第39页 |
| 2.6.1 蛋白序列比对 | 第39页 |
| 2.6.2 蛋白二级结构预测 | 第39页 |
| 2.7 基因元件的获得 | 第39-42页 |
| 第三章 前体菌株的构建 | 第42-52页 |
| 3.1 引言 | 第42-43页 |
| 3.2 酿酒酵母功能模块的构建 | 第43-46页 |
| 3.3 柚皮素合成模块的转化及发酵筛选 | 第46-48页 |
| 3.3.1 柚皮素合成模块的转化 | 第46页 |
| 3.3.2 不同基因组合的发酵筛选 | 第46-48页 |
| 3.4 δ位点整合柚皮素合成模块及发酵验证 | 第48-52页 |
| 3.4.1 δ位点整合柚皮素合成模块 | 第48-49页 |
| 3.4.2 柚皮素合成菌株的发酵 | 第49-50页 |
| 3.4.3 发酵培养基的优化 | 第50-52页 |
| 第四章 合成8DN酿酒酵母菌株的构建及优化 | 第52-62页 |
| 4.1 引言 | 第52-53页 |
| 4.2 8DN合成菌株的构建 | 第53-54页 |
| 4.3 合成8DN菌株的发酵与验证 | 第54-56页 |
| 4.3.1 合成8DN酿酒酵母菌株的发酵 | 第54-55页 |
| 4.3.2 柚皮素饲喂与8DN生产菌的对比 | 第55-56页 |
| 4.4 N8DT基因的优化改造 | 第56-62页 |
| 4.4.1 N8DT蛋白结构分析 | 第56-59页 |
| 4.4.2 蛋白截断的设计与构建 | 第59页 |
| 4.4.3 蛋白优化结果的验证分析 | 第59-62页 |
| 第五章 结论与展望 | 第62-64页 |
| 5.1 结论 | 第62-63页 |
| 5.2 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第74-76页 |
| 附录 | 第76-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |