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白桦脂酸对酿酒酵母凋亡的调控及与酵母液泡蛋白酶Pep4p的关联研究

致谢第10-11页
摘要第11-13页
ABSTRACT第13-14页
1 前言第15-29页
    1.1 白桦脂酸的研究进展第15-20页
        1.1.1 白桦脂酸抗肿瘤作用及机制研究第15-18页
        1.1.2 白桦脂酸的其他生物活性第18-20页
    1.2 酿酒酵母作为凋亡模式生物的研究进展第20-25页
        1.2.1 触发酵母的凋亡第21页
        1.2.2 酵母细胞凋亡的作用机制第21-25页
    1.3 酵母细胞凋亡与Pep4p的作用第25-27页
    1.4 课题的选题背景与研究思路第27-29页
2 材料与方法第29-38页
    2.1 实验材料、器材与试剂第29-30页
        2.1.1 实验菌株第29页
        2.1.2 实验培养基第29页
        2.1.3 实验试剂第29-30页
        2.1.4 实验主要器材第30页
    2.2 实验方法第30-31页
        2.2.1 扩大培养及酵母细胞生长曲线的测定第30页
        2.2.2 酵母细胞生长及前处理第30-31页
        2.2.3 细胞活力实验第31页
        2.2.4 细胞存活率实验第31页
    2.3 酵母细胞凋亡检测第31-33页
        2.3.1 DAPI细胞核染色实验第31-32页
        2.3.2 Annexin V-FITC双染检测细胞凋亡实验第32页
        2.3.3 TUNEL染色第32-33页
        2.3.4 透射电镜观察细胞内部结构第33页
    2.4 酵母Metacaspase活性检测第33-34页
    2.5 白桦脂酸处理对酵母线粒体的影响第34页
        2.5.1 细胞内ROS的检测第34页
        2.5.2 细胞内线粒体膜电势检测第34页
    2.6 荧光定量PCR检测酵母caspase和线粒体凋亡基因表达量的变化第34-38页
3 实验结果第38-55页
    3.1 酵母细胞的生长曲线第38页
    3.2 白桦脂酸对酵母活力及存活率的影响第38-42页
        3.2.1 使用细胞兰活力试剂盒检测白桦脂酸对酵母活力的影响第39-40页
        3.2.2 白桦脂酸处理对酵母存活率的影响第40-42页
    3.3 白桦脂酸诱导酵母细胞死亡及凋亡特征第42-47页
        3.3.1 白桦脂酸处理酵母细胞后DAPI染色结果第42-43页
        3.3.2 白桦脂酸处理酵母细胞后Annexin V/PI双染结果第43-44页
        3.3.3 白桦脂酸处理酵母细胞后的TUNEL染色结果第44-45页
        3.3.4 白桦脂酸处理对酵母细胞超微结构的影响第45-47页
    3.4 白桦脂酸诱导细胞凋亡伴随着线粒体的扰动第47-50页
        3.4.1 白桦脂酸处理导致酵母细胞内ROS水平上升第47-49页
        3.4.2 白桦脂酸处理能够改变酵母细胞线粒体膜电位第49-50页
    3.5 白桦脂酸处理对酵母细胞内metacaspase的影响第50-52页
    3.6 白桦脂酸处理酵母细胞后线粒体相关的凋亡基因的qPCR检测结果第52-55页
4 讨论第55-60页
    4.1 酵母细胞的生长及存活率第55页
    4.2 白桦脂酸引起酵母细胞凋亡第55-56页
    4.3 白桦脂酸处理酵母细胞不依赖metacaspase第56页
    4.4 白桦脂酸诱导酵母细胞凋亡通过线粒体途径第56-60页
        4.4.1 白桦脂酸处理导致酵母线粒体的扰动第56-57页
        4.4.2 白桦脂酸处理导致线粒体凋亡蛋白的表达改变第57-60页
5 总结与展望第60-62页
    5.1 主要研究结论第60-61页
    5.2 后续研究展望第61-62页
参考文献第62-70页
作者简历及在此期间学术成果第70页

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