致谢 | 第10-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
ABSTRACT | 第13-14页 |
1 前言 | 第15-29页 |
1.1 白桦脂酸的研究进展 | 第15-20页 |
1.1.1 白桦脂酸抗肿瘤作用及机制研究 | 第15-18页 |
1.1.2 白桦脂酸的其他生物活性 | 第18-20页 |
1.2 酿酒酵母作为凋亡模式生物的研究进展 | 第20-25页 |
1.2.1 触发酵母的凋亡 | 第21页 |
1.2.2 酵母细胞凋亡的作用机制 | 第21-25页 |
1.3 酵母细胞凋亡与Pep4p的作用 | 第25-27页 |
1.4 课题的选题背景与研究思路 | 第27-29页 |
2 材料与方法 | 第29-38页 |
2.1 实验材料、器材与试剂 | 第29-30页 |
2.1.1 实验菌株 | 第29页 |
2.1.2 实验培养基 | 第29页 |
2.1.3 实验试剂 | 第29-30页 |
2.1.4 实验主要器材 | 第30页 |
2.2 实验方法 | 第30-31页 |
2.2.1 扩大培养及酵母细胞生长曲线的测定 | 第30页 |
2.2.2 酵母细胞生长及前处理 | 第30-31页 |
2.2.3 细胞活力实验 | 第31页 |
2.2.4 细胞存活率实验 | 第31页 |
2.3 酵母细胞凋亡检测 | 第31-33页 |
2.3.1 DAPI细胞核染色实验 | 第31-32页 |
2.3.2 Annexin V-FITC双染检测细胞凋亡实验 | 第32页 |
2.3.3 TUNEL染色 | 第32-33页 |
2.3.4 透射电镜观察细胞内部结构 | 第33页 |
2.4 酵母Metacaspase活性检测 | 第33-34页 |
2.5 白桦脂酸处理对酵母线粒体的影响 | 第34页 |
2.5.1 细胞内ROS的检测 | 第34页 |
2.5.2 细胞内线粒体膜电势检测 | 第34页 |
2.6 荧光定量PCR检测酵母caspase和线粒体凋亡基因表达量的变化 | 第34-38页 |
3 实验结果 | 第38-55页 |
3.1 酵母细胞的生长曲线 | 第38页 |
3.2 白桦脂酸对酵母活力及存活率的影响 | 第38-42页 |
3.2.1 使用细胞兰活力试剂盒检测白桦脂酸对酵母活力的影响 | 第39-40页 |
3.2.2 白桦脂酸处理对酵母存活率的影响 | 第40-42页 |
3.3 白桦脂酸诱导酵母细胞死亡及凋亡特征 | 第42-47页 |
3.3.1 白桦脂酸处理酵母细胞后DAPI染色结果 | 第42-43页 |
3.3.2 白桦脂酸处理酵母细胞后Annexin V/PI双染结果 | 第43-44页 |
3.3.3 白桦脂酸处理酵母细胞后的TUNEL染色结果 | 第44-45页 |
3.3.4 白桦脂酸处理对酵母细胞超微结构的影响 | 第45-47页 |
3.4 白桦脂酸诱导细胞凋亡伴随着线粒体的扰动 | 第47-50页 |
3.4.1 白桦脂酸处理导致酵母细胞内ROS水平上升 | 第47-49页 |
3.4.2 白桦脂酸处理能够改变酵母细胞线粒体膜电位 | 第49-50页 |
3.5 白桦脂酸处理对酵母细胞内metacaspase的影响 | 第50-52页 |
3.6 白桦脂酸处理酵母细胞后线粒体相关的凋亡基因的qPCR检测结果 | 第52-55页 |
4 讨论 | 第55-60页 |
4.1 酵母细胞的生长及存活率 | 第55页 |
4.2 白桦脂酸引起酵母细胞凋亡 | 第55-56页 |
4.3 白桦脂酸处理酵母细胞不依赖metacaspase | 第56页 |
4.4 白桦脂酸诱导酵母细胞凋亡通过线粒体途径 | 第56-60页 |
4.4.1 白桦脂酸处理导致酵母线粒体的扰动 | 第56-57页 |
4.4.2 白桦脂酸处理导致线粒体凋亡蛋白的表达改变 | 第57-60页 |
5 总结与展望 | 第60-62页 |
5.1 主要研究结论 | 第60-61页 |
5.2 后续研究展望 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
作者简历及在此期间学术成果 | 第70页 |