| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 γ-环糊精（CD）的概述 | 第9-11页 |
| 1.1.1 γ-CD的结构与性质 | 第9-10页 |
| 1.1.2 γ-CD的应用 | 第10页 |
| 1.1.3 γ-CD的制备 | 第10-11页 |
| 1.2 环糊精葡萄糖基转移酶（CGTase）的概述 | 第11-13页 |
| 1.2.1 γ-CGTase的来源 | 第11页 |
| 1.2.2 γ-CGTase的结构 | 第11-12页 |
| 1.2.3 CGTase的功能 | 第12页 |
| 1.2.4 CGTase的环化机理 | 第12-13页 |
| 1.3 CGTase产物特异性的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3.1 改善CGTase产物特异性的意义 | 第13-14页 |
| 1.3.2 CGTase产物特异性的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.4 立题依据及意义 | 第15页 |
| 1.5 主要研究内容 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-26页 |
| 2.2.1 菌体培养方法 | 第16-17页 |
| 2.2.2 4αGTase的分离纯化 | 第17页 |
| 2.2.3 CGTase的分离纯化 | 第17-18页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第18页 |
| 2.2.5 蛋白质浓度测定 | 第18页 |
| 2.2.6 CGTase的环化活力测定 | 第18页 |
| 2.2.7 4αGTase的酶活测定 | 第18-19页 |
| 2.2.8 CGTase的酶学性质测定 | 第19页 |
| 2.2.9 CGTase催化玉米淀粉产 γ-CD的研究 | 第19-22页 |
| 2.2.10 CGTase的生物信息学分析方法 | 第22页 |
| 2.2.11 突变体的构建 | 第22-24页 |
| 2.2.12 突变体的表达 | 第24页 |
| 2.2.13 突变体的性质鉴定 | 第24-26页 |
| 3 结果与讨论 | 第26-46页 |
| 3.1 4αGTase的分离纯化 | 第26-27页 |
| 3.1.1 4αGTase的纯化效率 | 第26页 |
| 3.1.2 4αGTase的SDS-PAGE电泳分析 | 第26-27页 |
| 3.2 CGTase的分离纯化 | 第27-28页 |
| 3.3 CGTase的酶学性质研究 | 第28-31页 |
| 3.3.1 CGTase最适温度测定 | 第28-29页 |
| 3.3.2 CGTase最适pH测定 | 第29页 |
| 3.3.3 CGTase温度稳定性研究 | 第29-30页 |
| 3.3.4 CGTase pH稳定性研究 | 第30-31页 |
| 3.3.5 金属离子对酶的影响 | 第31页 |
| 3.4 底物状态对CGTase催化淀粉产 γ-CD的影响 | 第31-34页 |
| 3.4.1 底物种类对 γ-CD产率的影响 | 第31-32页 |
| 3.4.2 底物状态对 γ-CD产率的影响 | 第32-34页 |
| 3.5 反应条件对 γ-CD产率的影响 | 第34-37页 |
| 3.5.1 4αGTase添加量对 γ-CD产率的影响 | 第34-35页 |
| 3.5.2 CGTase添加量对 γ-CD产率的影响 | 第35页 |
| 3.5.3 CGTase反应时间对 γ-CD产率的影响 | 第35-36页 |
| 3.5.4 底物浓度对 γ-CD产率的影响 | 第36-37页 |
| 3.5.5 正交优化结果 | 第37页 |
| 3.6 CGTase的生物信息学分析 | 第37-40页 |
| 3.6.1 多重序列比对分析 | 第37-38页 |
| 3.6.2 CGTase的结构分析 | 第38-40页 |
| 3.7 CGTase的定点突变 | 第40-46页 |
| 3.7.1 突变体验证 | 第40-41页 |
| 3.7.2 突变CGTase的表达与纯化 | 第41-42页 |
| 3.7.3 突变体的酶学性质 | 第42-45页 |
| 3.7.4 突变体的产物特异性 | 第45-46页 |
| 主要结论与展望 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54-55页 |
| 附件：七种不同来源 CGTase 的氨基酸全序列比对图 | 第55-56页 |
