中文摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-20页 |
1.1 植物细胞膜脂代谢 | 第12-15页 |
1.1.1 植物细胞膜的流动性 | 第12-13页 |
1.1.2 冷害对植物细胞膜影响 | 第13-14页 |
1.1.3 植物细胞膜鞘脂 | 第14-15页 |
1.2 一氧化氮与细胞抗氧化系统 | 第15-16页 |
1.2.1 一氧化氮与植物生理代谢 | 第15-16页 |
1.2.2 植物线粒体的功能 | 第16页 |
1.3 谷氧还蛋白 | 第16-18页 |
1.3.1 谷氧还蛋白系统概述 | 第16-17页 |
1.3.2 谷氧还蛋白系统功能 | 第17-18页 |
1.3.3 谷氧还蛋白的催化机理 | 第18页 |
1.4 研究的内容及意义 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-36页 |
2.1 实验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 仪器与试剂 | 第20-21页 |
2.1.2 实验主要试剂 | 第21页 |
2.1.3 质粒和菌株 | 第21页 |
2.1.4 实验材料 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-36页 |
2.2.1 NO和冷信号对细胞膜脂过氧化的作用 | 第22-23页 |
2.2.2 NO和冷信号对线粒体抗氧化系统的作用 | 第23-25页 |
2.2.3 谷氧还蛋白(Grx)全长及cDNA克隆 | 第25-30页 |
2.2.4 体外重组Grx蛋白 | 第30-34页 |
2.2.5 NO对Grx蛋白的作用 | 第34页 |
2.2.6 NO对Grx基因表达量检测 | 第34-35页 |
2.2.7 数据处理 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-61页 |
3.1 NO和冷信号对细胞膜脂过氧化的作用 | 第36-43页 |
3.1.1 NO和冷信号对桃果实可溶性固形物含量及相对电导率的影响 | 第36-37页 |
3.1.2 NO和冷信号对桃果实脯氨酸含量的影响 | 第37-38页 |
3.1.3 NO和冷信号对桃果实MDA含量的影响 | 第38-39页 |
3.1.4 NO和冷信号对桃果实LOX活性的影响 | 第39-40页 |
3.1.5 NO和冷信号对桃果实SOD、CAT、POD、APX活性的影响 | 第40-43页 |
3.2 NO和冷信号对线粒体谷氧还蛋白系统的作用 | 第43-48页 |
3.2.1 NO和冷信号对线粒体GR活性的影响 | 第43-44页 |
3.2.2 NO和冷信号对线粒体APX活性的影响 | 第44-45页 |
3.2.3 NO和冷信号对线粒体MDHAR活性的影响 | 第45-46页 |
3.2.4 NO和冷信号对线粒体DHAR活性的影响 | 第46页 |
3.2.5 NO和冷信号对线粒体Grx及谷胱甘肽含量的影响 | 第46-48页 |
3.3 谷氧还蛋白全长cDNA的克隆 | 第48-51页 |
3.3.1 肥城桃果实总RNA的提取 | 第48-49页 |
3.3.2 初始引物温度梯度PCR结果 | 第49页 |
3.3.3 克隆载体菌液PCR验证 | 第49-50页 |
3.3.4 Grx表达载体构建 | 第50-51页 |
3.4 谷氧还蛋白序列及结构分析 | 第51-53页 |
3.4.1 Grx序列开放阅读框分析 | 第51-52页 |
3.4.2 Grx二级结构分析 | 第52-53页 |
3.4.3 Grx三级结构分析 | 第53页 |
3.5 谷氧还蛋白体外表达与纯化 | 第53-56页 |
3.5.1 目的蛋白的表达 | 第53-54页 |
3.5.2 检测目的蛋白位置 | 第54-55页 |
3.5.3 目的蛋白的洗脱与纯化 | 第55-56页 |
3.6 NO与Grx的相互作用结果分析 | 第56-59页 |
3.6.1 NO与Grx的紫外光谱 | 第56页 |
3.6.2 NO与Grx的荧光光谱 | 第56-57页 |
3.6.3 NO对Grx荧光猝灭作用 | 第57-59页 |
3.7 NO对Grx基因表达量的影响 | 第59-61页 |
4 讨论 | 第61-64页 |
4.1 NO对肥城桃果实细胞膜脂过氧化的影响 | 第61-62页 |
4.2 NO对线粒体抗氧化系统的影响 | 第62页 |
4.3 重组Grx的表达与纯化 | 第62-63页 |
4.4 NO与Grx蛋白荧光性质的影响 | 第63-64页 |
5 结论 | 第64-65页 |
创新之处 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
攻读学位期间论文发表情况 | 第79页 |