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Issatchenkia terricola XJ-2乙醛脱氢酶的纯化和性质及其基因的克隆与表达

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-14页
表格索引第14-16页
图形索引第16-21页
缩写符号第21-23页
第一章 文献综述第23-53页
 1 醛类简介第23-24页
   ·醛类的来源和作用第23页
   ·乙醛及其毒性第23-24页
 2 醛脱氢酶研究进展第24-38页
   ·ALDH的来源和分类第25-28页
   ·ALDH的重要生理功能第28-29页
   ·ALDH的结构第29-30页
   ·ALDH的催化机理第30-32页
   ·微生物来源的ALDH第32-37页
   ·ALDH的应用现状第37-38页
 3 基因克隆与表达第38-41页
   ·基于随机引物PCR的染色体步移技术研究进展第39-40页
   ·大肠杆菌pET表达系统第40-41页
 4 研究目的、意义及内容第41-43页
 参考文献第43-53页
第二章 产乙醛脱氢酶酵母菌株的分离和鉴定第53-67页
 1 材料与方法第53-57页
   ·材料第53-55页
   ·方法第55-57页
 2 结果与分析第57-61页
   ·产乙醛脱氢酶酵母菌株的筛选第57页
   ·HS-GC检验菌株XJ-2的乙醛脱氢酶活力第57-58页
   ·菌株XJ-2的鉴定第58-61页
 3 讨论第61-62页
 4 本章小结第62-64页
 参考文献第64-67页
第三章 I.terricola XJ-2乙醛脱氢酶的分离纯化及其酶学性质的研究第67-89页
 1 材料与方法第67-71页
   ·材料第67-68页
   ·方法第68-71页
 2 结果与分析第71-82页
   ·乙醛脱氢酶的分离纯化第71-75页
   ·乙醛脱氢酶的分子量第75页
   ·乙醛脱氢酶的最适反应温度第75-76页
   ·乙醛脱氢酶的热稳定性第76-77页
   ·乙醛脱氢酶的最适反应pH第77-78页
   ·乙醛脱氢酶的pH稳定性第78-79页
   ·金属离子对乙醛脱氢酶活力的影响第79-80页
   ·化学试剂对乙醛脱氢酶活力的影响第80页
   ·乙醛脱氢酶的底物特异性第80-81页
   ·乙醛脱氢酶的动力学常数第81-82页
 3 讨论第82-84页
 4 本章小结第84-85页
 参考文献第85-89页
第四章 I.terricola XJ-2乙醛脱氢酶基因克隆、表达及重组酶性质的研究第89-131页
 1 材料与方法第89-103页
   ·材料第89-91页
   ·方法第91-103页
 2 结果与分析第103-124页
   ·酵母I.terricola XJ-2基因组DNA的提取第103-104页
   ·乙醛脱氢酶基因保守区的克隆第104-106页
   ·乙醛脱氢酶全长基因的克隆第106-110页
   ·I.terricola XJ-2乙醛脱氢酶基因序列(ist-ALD)分析第110-112页
   ·I.terricola XJ-2乙醛脱氢酶(ist-ALDH)氨基酸序列分析第112-115页
   ·I.terricola XJ-2乙醛脱氢酶基因ist-ALD的扩增第115页
   ·pET-23a-ist-ALD的构建与验证第115-116页
   ·pET-32a-ist-ALD的构建与验证第116-117页
   ·ist-ALD基因在大肠杆菌中的诱导表达第117页
   ·重组乙醛脱氢酶表达形式鉴定第117-118页
   ·重组质粒稳定性检测第118-119页
   ·重组酶ist-ALDH的纯化第119页
   ·重组酶ist-ALDH酶学性质的研究第119-124页
 3 讨论第124-127页
 4 本章小结第127-129页
 参考文献第129-131页
第五章 重组大肠杆菌诱导表达乙醛脱氢酶的条件优化及细胞转化清除乙醛的研究第131-157页
 1 材料与方法第131-136页
   ·试验材料第131-133页
   ·试验方法第133-136页
 2 结果与分析第136-151页
   ·菌体生长量的测定第136-137页
   ·单因素试验第137-139页
   ·影响重组大肠杆菌表达乙醛脱氢酶关键因子的筛选第139-141页
   ·响应曲面法优化表达培养条件第141-146页
   ·重组大肠杆菌细胞转化清除乙醛的研究第146-151页
 3 讨论第151-153页
 4 本章小结第153-155页
 参考文献第155-157页
全文结论第157-159页
论文创新点第159-161页
展望第161-163页
致谢第163-165页
攻读博士期间发表论文及申请专利情况第165页

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