摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-14页 |
表格索引 | 第14-16页 |
图形索引 | 第16-21页 |
缩写符号 | 第21-23页 |
第一章 文献综述 | 第23-53页 |
1 醛类简介 | 第23-24页 |
·醛类的来源和作用 | 第23页 |
·乙醛及其毒性 | 第23-24页 |
2 醛脱氢酶研究进展 | 第24-38页 |
·ALDH的来源和分类 | 第25-28页 |
·ALDH的重要生理功能 | 第28-29页 |
·ALDH的结构 | 第29-30页 |
·ALDH的催化机理 | 第30-32页 |
·微生物来源的ALDH | 第32-37页 |
·ALDH的应用现状 | 第37-38页 |
3 基因克隆与表达 | 第38-41页 |
·基于随机引物PCR的染色体步移技术研究进展 | 第39-40页 |
·大肠杆菌pET表达系统 | 第40-41页 |
4 研究目的、意义及内容 | 第41-43页 |
参考文献 | 第43-53页 |
第二章 产乙醛脱氢酶酵母菌株的分离和鉴定 | 第53-67页 |
1 材料与方法 | 第53-57页 |
·材料 | 第53-55页 |
·方法 | 第55-57页 |
2 结果与分析 | 第57-61页 |
·产乙醛脱氢酶酵母菌株的筛选 | 第57页 |
·HS-GC检验菌株XJ-2的乙醛脱氢酶活力 | 第57-58页 |
·菌株XJ-2的鉴定 | 第58-61页 |
3 讨论 | 第61-62页 |
4 本章小结 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-67页 |
第三章 I.terricola XJ-2乙醛脱氢酶的分离纯化及其酶学性质的研究 | 第67-89页 |
1 材料与方法 | 第67-71页 |
·材料 | 第67-68页 |
·方法 | 第68-71页 |
2 结果与分析 | 第71-82页 |
·乙醛脱氢酶的分离纯化 | 第71-75页 |
·乙醛脱氢酶的分子量 | 第75页 |
·乙醛脱氢酶的最适反应温度 | 第75-76页 |
·乙醛脱氢酶的热稳定性 | 第76-77页 |
·乙醛脱氢酶的最适反应pH | 第77-78页 |
·乙醛脱氢酶的pH稳定性 | 第78-79页 |
·金属离子对乙醛脱氢酶活力的影响 | 第79-80页 |
·化学试剂对乙醛脱氢酶活力的影响 | 第80页 |
·乙醛脱氢酶的底物特异性 | 第80-81页 |
·乙醛脱氢酶的动力学常数 | 第81-82页 |
3 讨论 | 第82-84页 |
4 本章小结 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-89页 |
第四章 I.terricola XJ-2乙醛脱氢酶基因克隆、表达及重组酶性质的研究 | 第89-131页 |
1 材料与方法 | 第89-103页 |
·材料 | 第89-91页 |
·方法 | 第91-103页 |
2 结果与分析 | 第103-124页 |
·酵母I.terricola XJ-2基因组DNA的提取 | 第103-104页 |
·乙醛脱氢酶基因保守区的克隆 | 第104-106页 |
·乙醛脱氢酶全长基因的克隆 | 第106-110页 |
·I.terricola XJ-2乙醛脱氢酶基因序列(ist-ALD)分析 | 第110-112页 |
·I.terricola XJ-2乙醛脱氢酶(ist-ALDH)氨基酸序列分析 | 第112-115页 |
·I.terricola XJ-2乙醛脱氢酶基因ist-ALD的扩增 | 第115页 |
·pET-23a-ist-ALD的构建与验证 | 第115-116页 |
·pET-32a-ist-ALD的构建与验证 | 第116-117页 |
·ist-ALD基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第117页 |
·重组乙醛脱氢酶表达形式鉴定 | 第117-118页 |
·重组质粒稳定性检测 | 第118-119页 |
·重组酶ist-ALDH的纯化 | 第119页 |
·重组酶ist-ALDH酶学性质的研究 | 第119-124页 |
3 讨论 | 第124-127页 |
4 本章小结 | 第127-129页 |
参考文献 | 第129-131页 |
第五章 重组大肠杆菌诱导表达乙醛脱氢酶的条件优化及细胞转化清除乙醛的研究 | 第131-157页 |
1 材料与方法 | 第131-136页 |
·试验材料 | 第131-133页 |
·试验方法 | 第133-136页 |
2 结果与分析 | 第136-151页 |
·菌体生长量的测定 | 第136-137页 |
·单因素试验 | 第137-139页 |
·影响重组大肠杆菌表达乙醛脱氢酶关键因子的筛选 | 第139-141页 |
·响应曲面法优化表达培养条件 | 第141-146页 |
·重组大肠杆菌细胞转化清除乙醛的研究 | 第146-151页 |
3 讨论 | 第151-153页 |
4 本章小结 | 第153-155页 |
参考文献 | 第155-157页 |
全文结论 | 第157-159页 |
论文创新点 | 第159-161页 |
展望 | 第161-163页 |
致谢 | 第163-165页 |
攻读博士期间发表论文及申请专利情况 | 第165页 |