| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-16页 |
| ·纤维素的结构及纤维素酶 | 第10-12页 |
| ·自然界中纤维素 | 第10-11页 |
| ·纤维素酶 | 第11-12页 |
| ·纤维素生产乙醇菌种选育 | 第12-14页 |
| ·自然界中筛选菌种 | 第12页 |
| ·基因突变选育菌种 | 第12-13页 |
| ·基因重组育种 | 第13页 |
| ·原生质体融合育种技术 | 第13-14页 |
| ·本试验研究的目的意义 | 第14-15页 |
| ·本试验研究内容 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-26页 |
| ·试验材料 | 第16-18页 |
| ·出发菌株 | 第16页 |
| ·培养基 | 第16页 |
| ·其它试剂及原料 | 第16-17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17-18页 |
| ·试验方法 | 第18-25页 |
| ·康氏木霉和酿酒酵母个体形态的观察 | 第18页 |
| ·影响康氏木霉原生质体形成条件的研究 | 第18-19页 |
| ·康氏木霉和酿酒酵母原生质体的制备 | 第19页 |
| ·康氏木霉原生质体释放方式的观察 | 第19页 |
| ·康氏木霉和酿酒酵母原生质体形态观察 | 第19-20页 |
| ·康氏木霉原生质体最佳再生培养基的确定试验 | 第20页 |
| ·影响康氏木霉原生质体再生条件的研究 | 第20页 |
| ·康氏木霉原生质体再生率的测定 | 第20-21页 |
| ·康氏木霉原生质体再生方式的观察 | 第21页 |
| ·康氏木霉原生质体热灭活条件的确定 | 第21页 |
| ·康实木霉和酿酒酵母抗药性遗传标记的确定 | 第21-22页 |
| ·康氏木霉和酿酒酵母原生质体的融合 | 第22页 |
| ·纤维素酶活的测定 | 第22-23页 |
| ·融合菌落的检出 | 第23页 |
| ·稳定融合株获得及遗传稳定性鉴定试验 | 第23-24页 |
| ·双亲融合子菌落特征的观察 | 第24页 |
| ·双亲融合子个体形态的观察 | 第24页 |
| ·双亲融合子在羧甲基纤维素平板上产水解圈的观察 | 第24页 |
| ·融合株在TTC 平板上显色情况的观察 | 第24页 |
| ·双亲和融合子总DNA 提取方法 | 第24-25页 |
| ·双亲和融合株265 rDNA 的扩增 | 第25页 |
| ·双亲和融合株可溶性蛋白质的提取 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离可溶性蛋白质 | 第25页 |
| ·双亲和融合菌株发酵产酒精 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-47页 |
| ·康氏木霉和酿酒酵母个体形态观察结果 | 第26-27页 |
| ·影响康氏木霉原生质体形成条件的研究结果 | 第27-30页 |
| ·菌丝体培养时间对原生质体形成的影响 | 第27页 |
| ·酶组成对原生质体形成的影响 | 第27-28页 |
| ·蜗牛酶浓度对原生质体形成的影响 | 第28页 |
| ·酶解时间对原生质体形成的影响 | 第28-29页 |
| ·酶解温度对原生质体形成的影响 | 第29页 |
| ·蜗牛酶溶液中渗透压稳定剂对原生质体形成的影响 | 第29-30页 |
| ·康氏木霉原生质体形态及原生质体释放方式 | 第30-31页 |
| ·康氏木霉原生质体最佳再生培养基的确定 | 第31-32页 |
| ·初试结果 | 第31-32页 |
| ·再生培养基中稳渗剂最佳浓度的试验结果 | 第32页 |
| ·影响康氏木霉原生质体再生条件的研究结果 | 第32-34页 |
| ·蜗牛酶浓度对原生质体再生的影响 | 第32-33页 |
| ·酶解温度对原生质体再生的影响 | 第33-34页 |
| ·康氏木霉原生质体再生方式的观察 | 第34页 |
| ·康氏木霉原生质体热灭活条件的确定结果 | 第34-35页 |
| ·康氏木霉和酿酒酵母抗药性遗传标记的确定 | 第35-38页 |
| ·药品的筛选 | 第35页 |
| ·放线菌酮对康氏木霉和酿酒酵母的致死浓度测定 | 第35-36页 |
| ·制霉菌素对康氏木霉和酿酒酵母的致死浓度测定 | 第36-37页 |
| ·无水乙醇对康氏木霉和酿酒酵母的致死浓度测定 | 第37-38页 |
| ·原生质体融合结果 | 第38-39页 |
| ·融合现象的观察 | 第38-39页 |
| ·融合方法一（双亲均采用抗药性遗传标记）试验结果 | 第39页 |
| ·融合方法二（康氏木霉单亲热灭活，酿酒酵母采用抗药性遗传标记）试验结果 | 第39页 |
| ·葡萄糖标准曲线的制备 | 第39-40页 |
| ·葡萄糖标准溶液OD_(540)nm 下的测定结果 | 第39-40页 |
| ·葡萄糖标准曲线 | 第40页 |
| ·融合菌落的检出结果 | 第40-43页 |
| ·融合菌落的初检结果 | 第40-42页 |
| ·融合菌落的复检结果 | 第42-43页 |
| ·稳定融合株的获得及遗传稳定性试验结果 | 第43页 |
| ·双亲融合子遗传性质的研究结果 | 第43-46页 |
| ·双亲融合子菌落特征观察 | 第43-44页 |
| ·双亲融合子个体形态的观察结果 | 第44页 |
| ·双亲和融合株总DNA 提取的研究结果 | 第44-45页 |
| ·双亲和融合株265 rDNA 的扩增结果 | 第45页 |
| ·SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离可溶性蛋白质的结果 | 第45-46页 |
| ·双亲和融合株发酵产酒精的试验结果 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| ·关于康氏木霉原生质体制备和再生 | 第47页 |
| ·关于康氏木霉和酿酒酵母抗药性遗传标记 | 第47-48页 |
| ·关于双亲融合子遗传性质的研究 | 第48页 |
| ·融合子酶活和产酒精能力的研究 | 第48-49页 |
| 5 结论 | 第49-51页 |
| 6 参考文献 | 第51-55页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
| 作者简历 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
