摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第12-24页 |
1.1 木质纤维素生物炼制 | 第12-14页 |
1.2 谷氨酸棒状杆菌与生物炼制 | 第14-15页 |
1.3 谷氨酸发酵生产 | 第15-20页 |
1.4 γ-氨基丁酸发酵生产 | 第20-22页 |
1.5 立题依据和主要研究内容 | 第22-24页 |
第2章 木质纤维素中过量生物素的发现及其对谷氨酸棒状杆菌发酵谷氨酸的影响 | 第24-48页 |
2.1 引言 | 第24-25页 |
2.2 材料与方法 | 第25-32页 |
2.2.1 原料 | 第25页 |
2.2.2 酶、试剂以及仪器设备 | 第25页 |
2.2.3 菌种、培养基以及培养方法 | 第25-26页 |
2.2.4 原料预处理以及生物脱毒 | 第26页 |
2.2.5 玉米秸秆水解液制备 | 第26-27页 |
2.2.6 谷氨酸发酵 | 第27-30页 |
2.2.7 实时荧光定量PCR | 第30页 |
2.2.8 B族维生素测定 | 第30-32页 |
2.2.9 分析方法 | 第32页 |
2.2.10 谷氨酸糖酸转化率计算 | 第32页 |
2.3 结果与讨论 | 第32-47页 |
2.3.1 水解液中谷氨酸发酵情况 | 第32-34页 |
2.3.2 青霉素诱导谷氨酸发酵 | 第34-36页 |
2.3.3 发酵过程中的胞内外生物素浓度变化 | 第36-38页 |
2.3.4 玉米秸秆水解液中生物素对谷氨酸发酵的影响 | 第38-43页 |
2.3.5 生物炼制过程中的生物素 | 第43-45页 |
2.3.6 生物炼制过程中的其他B族维生素 | 第45-47页 |
2.4 本章小结 | 第47-48页 |
第3章 代谢工程改造谷氨酸棒状杆菌利用玉米秸秆原料生产谷氨酸 | 第48-68页 |
3.1 引言 | 第48-49页 |
3.2 材料与方法 | 第49-57页 |
3.2.1 菌种、培养基以及培养方法 | 第49页 |
3.2.2 酶、试剂以及仪器设备 | 第49-54页 |
3.2.3 质粒构建 | 第54-55页 |
3.2.4 重组菌株构建 | 第55-56页 |
3.2.5 木质纤维素原料及其生物炼制处理 | 第56页 |
3.2.6 谷氨酸发酵 | 第56-57页 |
3.2.7 分析方法 | 第57页 |
3.2.8 谷氨酸糖酸转化率计算 | 第57页 |
3.3 结果与讨论 | 第57-66页 |
3.3.1 谷氨酸棒状杆菌S9114在高生物素水解液下的谷氨酸发酵 | 第57-59页 |
3.3.2 谷氨酸转运体MscCG改造促进谷氨酸分泌 | 第59-61页 |
3.3.3 通过odhA基因RBS弱化提高谷氨酸生产 | 第61-63页 |
3.3.4 强化谷氨酸合成以及分泌途径提高谷氨酸生产的尝试 | 第63-65页 |
3.3.5 重组谷氨酸棒状杆菌XW6谷氨酸发酵评价 | 第65-66页 |
3.4 本章小结 | 第66-68页 |
第4章 谷氨酸棒状杆菌分泌表达谷氨酸脱羧酶促进纤维素γ-氨基丁酸发酵生产 | 第68-87页 |
4.1 引言 | 第68-69页 |
4.2 材料与方法 | 第69-76页 |
4.2.1 菌种、培养基以及培养条件 | 第69页 |
4.2.2 酶、试剂以及仪器设备 | 第69-74页 |
4.2.3 质粒构建以及重组菌株构建 | 第74-75页 |
4.2.4 木质纤维素原料及其生物炼制处理 | 第75页 |
4.2.5 GABA发酵 | 第75-76页 |
4.2.6 蛋白样品处理以及SDS-PAGE | 第76页 |
4.2.7 分析方法 | 第76页 |
4.2.8 γ-氨基丁酸得率计算 | 第76页 |
4.3 结果与讨论 | 第76-86页 |
4.3.1 异源表达大肠杆菌谷氨酸脱羧酶突变体实现GABA发酵生产 | 第76-77页 |
4.3.2 分泌表达谷氨酸脱羧酶促进GABA生产 | 第77-80页 |
4.3.3 表达质粒启动子优化和阻断GABA降解提高GABA产量 | 第80-83页 |
4.3.4 发酵罐上重组菌株利用复合培养基发酵生产GABA | 第83-85页 |
4.3.5 重组菌株利用玉米秸秆水解液发酵生产GABA | 第85-86页 |
4.4 本章小结 | 第86-87页 |
第5章 结论与展望 | 第87-90页 |
5.1 结论与创新点 | 第87-88页 |
5.2 展望 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-113页 |
附录Ⅰ 仪器设备 | 第113-114页 |
附录Ⅱ 人工合成的gad基因序列 | 第114-116页 |
博士期间研究成果 | 第116-117页 |
致谢 | 第117页 |