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代谢工程改造谷氨酸棒状杆菌发酵生产纤维素谷氨酸和γ-氨基丁酸

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第1章 绪论第12-24页
    1.1 木质纤维素生物炼制第12-14页
    1.2 谷氨酸棒状杆菌与生物炼制第14-15页
    1.3 谷氨酸发酵生产第15-20页
    1.4 γ-氨基丁酸发酵生产第20-22页
    1.5 立题依据和主要研究内容第22-24页
第2章 木质纤维素中过量生物素的发现及其对谷氨酸棒状杆菌发酵谷氨酸的影响第24-48页
    2.1 引言第24-25页
    2.2 材料与方法第25-32页
        2.2.1 原料第25页
        2.2.2 酶、试剂以及仪器设备第25页
        2.2.3 菌种、培养基以及培养方法第25-26页
        2.2.4 原料预处理以及生物脱毒第26页
        2.2.5 玉米秸秆水解液制备第26-27页
        2.2.6 谷氨酸发酵第27-30页
        2.2.7 实时荧光定量PCR第30页
        2.2.8 B族维生素测定第30-32页
        2.2.9 分析方法第32页
        2.2.10 谷氨酸糖酸转化率计算第32页
    2.3 结果与讨论第32-47页
        2.3.1 水解液中谷氨酸发酵情况第32-34页
        2.3.2 青霉素诱导谷氨酸发酵第34-36页
        2.3.3 发酵过程中的胞内外生物素浓度变化第36-38页
        2.3.4 玉米秸秆水解液中生物素对谷氨酸发酵的影响第38-43页
        2.3.5 生物炼制过程中的生物素第43-45页
        2.3.6 生物炼制过程中的其他B族维生素第45-47页
    2.4 本章小结第47-48页
第3章 代谢工程改造谷氨酸棒状杆菌利用玉米秸秆原料生产谷氨酸第48-68页
    3.1 引言第48-49页
    3.2 材料与方法第49-57页
        3.2.1 菌种、培养基以及培养方法第49页
        3.2.2 酶、试剂以及仪器设备第49-54页
        3.2.3 质粒构建第54-55页
        3.2.4 重组菌株构建第55-56页
        3.2.5 木质纤维素原料及其生物炼制处理第56页
        3.2.6 谷氨酸发酵第56-57页
        3.2.7 分析方法第57页
        3.2.8 谷氨酸糖酸转化率计算第57页
    3.3 结果与讨论第57-66页
        3.3.1 谷氨酸棒状杆菌S9114在高生物素水解液下的谷氨酸发酵第57-59页
        3.3.2 谷氨酸转运体MscCG改造促进谷氨酸分泌第59-61页
        3.3.3 通过odhA基因RBS弱化提高谷氨酸生产第61-63页
        3.3.4 强化谷氨酸合成以及分泌途径提高谷氨酸生产的尝试第63-65页
        3.3.5 重组谷氨酸棒状杆菌XW6谷氨酸发酵评价第65-66页
    3.4 本章小结第66-68页
第4章 谷氨酸棒状杆菌分泌表达谷氨酸脱羧酶促进纤维素γ-氨基丁酸发酵生产第68-87页
    4.1 引言第68-69页
    4.2 材料与方法第69-76页
        4.2.1 菌种、培养基以及培养条件第69页
        4.2.2 酶、试剂以及仪器设备第69-74页
        4.2.3 质粒构建以及重组菌株构建第74-75页
        4.2.4 木质纤维素原料及其生物炼制处理第75页
        4.2.5 GABA发酵第75-76页
        4.2.6 蛋白样品处理以及SDS-PAGE第76页
        4.2.7 分析方法第76页
        4.2.8 γ-氨基丁酸得率计算第76页
    4.3 结果与讨论第76-86页
        4.3.1 异源表达大肠杆菌谷氨酸脱羧酶突变体实现GABA发酵生产第76-77页
        4.3.2 分泌表达谷氨酸脱羧酶促进GABA生产第77-80页
        4.3.3 表达质粒启动子优化和阻断GABA降解提高GABA产量第80-83页
        4.3.4 发酵罐上重组菌株利用复合培养基发酵生产GABA第83-85页
        4.3.5 重组菌株利用玉米秸秆水解液发酵生产GABA第85-86页
    4.4 本章小结第86-87页
第5章 结论与展望第87-90页
    5.1 结论与创新点第87-88页
    5.2 展望第88-90页
参考文献第90-113页
附录Ⅰ 仪器设备第113-114页
附录Ⅱ 人工合成的gad基因序列第114-116页
博士期间研究成果第116-117页
致谢第117页

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