| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-16页 |
| 第1章 引言 | 第16-28页 |
| ·本文所涉及的水产品中食源性致病菌的概述 | 第16-18页 |
| ·沙门氏菌 | 第16-17页 |
| ·志贺氏菌 | 第17页 |
| ·金黄色葡萄球菌 | 第17-18页 |
| ·副溶血性弧菌 | 第18页 |
| ·食源性致病菌检测技术的研究进展 | 第18-25页 |
| ·免疫学技术 | 第19-20页 |
| ·酶联免疫吸附(ELISA) | 第19页 |
| ·免疫磁珠分离(IMS) | 第19-20页 |
| ·免疫印迹法 | 第20页 |
| ·免疫芯片 | 第20页 |
| ·分子生物学技术 | 第20-23页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第20-21页 |
| ·环介导等温扩增(LAMP) | 第21-22页 |
| ·基因芯片 | 第22页 |
| ·核酸序列依赖性扩增(NASBA) | 第22-23页 |
| ·代谢学技术 | 第23-24页 |
| ·电子鼻 | 第23页 |
| ·微量热技术 | 第23页 |
| ·电阻抗技术 | 第23-24页 |
| ·其它新技术 | 第24-25页 |
| ·量子点 | 第24页 |
| ·变性高效液相色谱(DHPLC) | 第24-25页 |
| ·多重PCR检测技术的研究及应用现状 | 第25-26页 |
| ·PCR试剂盒开发的研究现状 | 第26页 |
| ·本课题的研究意义与内容 | 第26-28页 |
| 第2章 共增菌培养基SSSV的设计与研究 | 第28-44页 |
| ·材料和仪器 | 第28-29页 |
| ·实验原料 | 第28页 |
| ·实验菌株 | 第28-29页 |
| ·主要试剂和培养基 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-33页 |
| ·共增菌培养基SSSV的设计和优化 | 第29-30页 |
| ·添加剂单因素试验 | 第29-30页 |
| ·正交试验优化 | 第30页 |
| ·SSSV增菌效果的研究 | 第30-31页 |
| ·SSSV单增菌效果的验证 | 第30页 |
| ·SSSV复合增菌效果的验证 | 第30-31页 |
| ·SSSV选择性的验证 | 第31页 |
| ·目标菌在SSSV中的动力学分析 | 第31页 |
| ·SSSV对冷伤目标菌的复原能力的研究 | 第31-32页 |
| ·SSSV对实际水产样品的增菌效果 | 第32页 |
| ·统计学分析 | 第32-33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-42页 |
| ·共增菌培养基SSSV的设计和优化 | 第33-37页 |
| ·添加剂单因素筛选 | 第33-36页 |
| ·正交试验优化配方 | 第36页 |
| ·SSSV培养基最优配方 | 第36-37页 |
| ·SSSV增菌效果的分析 | 第37-39页 |
| ·SSSV单增菌效果 | 第37-38页 |
| ·SSSV复合增菌效果 | 第38-39页 |
| ·SSSV的选择性分析 | 第39页 |
| ·四种目标菌在SSSV中的动力学分析 | 第39-41页 |
| ·SSSV对冷伤目标菌的复原能力 | 第41-42页 |
| ·SSSV应用与实际水产样品检测 | 第42页 |
| ·本章小结 | 第42-44页 |
| 第3章 多重PCR方法的建立、优化与评价 | 第44-60页 |
| ·材料与仪器 | 第44-45页 |
| ·实验原料 | 第44页 |
| ·实验菌株 | 第44页 |
| ·主要试剂和培养基 | 第44-45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-48页 |
| ·多重PCR引物设计与合成 | 第45页 |
| ·菌株活化与培养 | 第45-46页 |
| ·细菌DNA提取 | 第46页 |
| ·单重PCR扩增 | 第46页 |
| ·单重PCR扩增产物测序 | 第46页 |
| ·多重PCR反应条件的优化 | 第46-47页 |
| ·多重PCR扩增产物测序鉴定 | 第47页 |
| ·多重PCR特异性的验证 | 第47页 |
| ·多重 PCR灵敏度的测定 | 第47页 |
| ·SSSV培养-多重PCR检测水产样品 | 第47-48页 |
| ·SSSV培养-多重PCR检测方法的评价 | 第48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-57页 |
| ·单重PCR扩增 | 第48-49页 |
| ·单重PCR扩增产物测序结果 | 第49-50页 |
| ·多重PCR反应条件的优化 | 第50-53页 |
| ·最适引物添加量的选择 | 第50-51页 |
| ·最适Mg~(2+)添加量的选择 | 第51页 |
| ·最适Taq酶添加量的选择 | 第51-52页 |
| ·最适退火温度的选择 | 第52页 |
| ·优化后的多重PCR反应体系条件及参数 | 第52-53页 |
| ·多重PCR扩增产物测序结果 | 第53页 |
| ·多重PCR引物特异性的验证 | 第53-54页 |
| ·多重PCR灵敏度 | 第54页 |
| ·SSSV培养-多重PCR检测水产样品 | 第54-55页 |
| ·SSSV培养-多重PCR检测方法与国标方法的比较 | 第55-57页 |
| ·本章小结 | 第57-60页 |
| 第4章 四重PCR检测试剂盒的组装、应用与评价 | 第60-68页 |
| ·材料与仪器 | 第60页 |
| ·原料 | 第60页 |
| ·主要试剂 | 第60页 |
| ·主要实验仪器 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-63页 |
| ·试剂盒的组装 | 第60-61页 |
| ·小同保存条件对试剂盒的影响 | 第61-62页 |
| ·试剂盒保质期试验 | 第62页 |
| ·试剂盒重复性试验 | 第62页 |
| ·批内重复性试验 | 第62页 |
| ·批间重复性试验 | 第62页 |
| ·试剂盒的应用 | 第62-63页 |
| ·结果与讨论 | 第63-66页 |
| ·不同保存条件对试剂盒的影响 | 第63-64页 |
| ·试剂盒保质期试验 | 第64-65页 |
| ·试剂盒重复性试验 | 第65-66页 |
| ·批内重复性 | 第65页 |
| ·批间重复性 | 第65-66页 |
| ·试剂盒的应用结果 | 第66页 |
| ·本章小结 | 第66-68页 |
| 第5章 总结、创新点与展望 | 第68-72页 |
| ·研究结论 | 第68-69页 |
| ·创新点 | 第69页 |
| ·展望 | 第69-72页 |
| 参考文献 | 第72-82页 |
| 附录 | 第82-86页 |
| 附录1 水产品沙志金副四种致病菌多重PCR检测试剂盒使用说明书 | 第82-86页 |
| 发表的论文及申请的专利 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |