摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
1.1 人参 | 第10-12页 |
1.1.1 人参的形态 | 第10-11页 |
1.1.2 人参的生长分布 | 第11页 |
1.1.3 人参的生物学作用 | 第11-12页 |
1.1.3.1 对中枢神经系统的特异作用 | 第12页 |
1.1.3.2 抗炎防癌 | 第12页 |
1.1.3.3 对糖尿病的作用 | 第12页 |
1.1.4 人参的成分 | 第12页 |
1.2 人参皂苷 | 第12-15页 |
1.2.1 人参皂苷的分类 | 第13页 |
1.2.2 人参皂苷的结构 | 第13-14页 |
1.2.3 人参皂苷的生物学作用 | 第14-15页 |
1.2.3.1 人参皂苷的延缓衰老作用 | 第15页 |
1.2.3.2 人参皂苷对缺血状态的缓解作用 | 第15页 |
1.2.3.3 促进造血细胞发生 | 第15页 |
1.3 人参皂苷Rb | 第15-17页 |
1.3.1 人参皂苷Rb_1的结构 | 第16页 |
1.3.2 人参皂苷Rb_1的生物学作用 | 第16-17页 |
1.3.2.1 人参皂苷Rb_1对免疫系统的作用 | 第16页 |
1.3.2.2 人参皂苷Rb_1对呼吸系统的保护作用 | 第16页 |
1.3.2.3 人参皂苷Rb_1对内皮细胞的保护作用 | 第16-17页 |
1.3.3 人参皂苷Rb_1的性质 | 第17页 |
1.4 人参皂苷Rg_3 | 第17-18页 |
1.4.1 人参皂苷Rg_3的性质与结构 | 第17页 |
1.4.2 人参皂苷Rg_3的生物学作用 | 第17-18页 |
1.4.2.1 人参皂苷Rg_3抗肿瘤生长及抑制转移的作用 | 第17-18页 |
1.4.2.2 人参皂苷Rg_3对免疫功能的影响 | 第18页 |
1.4.2.3 抗病毒作用 | 第18页 |
1.5 酶法水解人参皂苷Rb_1的研究进展 | 第18-19页 |
1.6 前景展望 | 第19-20页 |
1.7 论文的主要研究内容 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-37页 |
2.1 菌种来源 | 第21页 |
2.2 实验试剂 | 第21-22页 |
2.3 实验仪器 | 第22页 |
2.4 培养基 | 第22-23页 |
2.5 试剂制备 | 第23页 |
2.5.1 人参皂苷Rb_1底物溶液的制备 | 第23页 |
2.5.2 人参皂苷标准品溶液的制备 | 第23页 |
2.5.3 人参总皂苷和芦丁营养液的制备 | 第23页 |
2.5.4 豆粕、穿山龙、槐花和人参浸出液的制备 | 第23页 |
2.6 实验方法 | 第23-37页 |
2.6.1 水解人参皂苷Rb_1菌种的筛选 | 第24-25页 |
2.6.1.1 样品的采集以及预处理 | 第24页 |
2.6.1.2 菌种的富集培养 | 第24页 |
2.6.1.3 菌种分离 | 第24页 |
2.6.1.4 菌种的初筛 | 第24页 |
2.6.1.5 菌种的复筛 | 第24页 |
2.6.1.6 酶液的提取 | 第24-25页 |
2.6.1.7 酶与底物的反应 | 第25页 |
2.6.1.8 TLC点板(薄层层析) | 第25页 |
2.6.2 菌种发酵条件的优化 | 第25-27页 |
2.6.2.1 培养基的确定 | 第25页 |
2.6.2.2 诱导物的确定 | 第25-26页 |
2.6.2.3 诱导物加入量的确定 | 第26页 |
2.6.2.4 培养温度的确定 | 第26-27页 |
2.6.2.5 接菌量的确定 | 第27页 |
2.6.3 发酵曲线的制定 | 第27-29页 |
2.6.3.1 发酵液pH值的测定 | 第27页 |
2.6.3.2 酶活力的测定 | 第27页 |
2.6.3.3 菌体浓度的测定 | 第27页 |
2.6.3.4 蛋白质浓度的测定 | 第27-29页 |
2.6.4 酶的分离纯化-离子交换层析 | 第29-31页 |
2.6.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度检测 | 第31-33页 |
2.6.6 提纯酶的酶性质研究 | 第33-37页 |
2.6.6.1 最适pH值的研究 | 第33页 |
2.6.6.2 pH稳定性的研究 | 第33-34页 |
2.6.6.3 最适反应温度的研究 | 第34页 |
2.6.6.4 温度稳定性的研究 | 第34页 |
2.6.6.5 米氏常数的研究 | 第34页 |
2.6.6.6 金属离子对酶活力的影响 | 第34页 |
2.6.6.7 人参皂苷Rb_1水解酶的酶反应特性 | 第34页 |
2.6.6.8 提纯酶的其它酶活力测定 | 第34-37页 |
第三章 结果与讨论 | 第37-58页 |
3.1 产人参皂苷Rb_1水解酶菌株的筛选 | 第37-38页 |
3.2 菌体发酵条件的优化 | 第38-41页 |
3.2.1 水解人参皂苷Rb_1的最佳培养基 | 第38页 |
3.2.2 水解人参皂苷Rb_1的最佳诱导物 | 第38-39页 |
3.2.3 诱导物的最适加入量 | 第39-40页 |
3.2.4 最适培养温度 | 第40-41页 |
3.2.5 最佳接菌量 | 第41页 |
3.3 发酵曲线 | 第41-43页 |
3.4 DEAE-Cellulose DE52柱分离纯化粗酶液 | 第43-46页 |
3.4.1 粗酶液的分离纯化 | 第43-44页 |
3.4.2 提纯酶的酶活力的检测 | 第44-45页 |
3.4.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测提纯酶的纯度 | 第45页 |
3.4.4 提纯酶分子量的测定 | 第45-46页 |
3.5 提纯酶的酶性质研究 | 第46-58页 |
3.5.1 酶反应的最适pH | 第46-47页 |
3.5.2 pH稳定性的研究 | 第47-48页 |
3.5.3 酶反应的最适温度 | 第48页 |
3.5.4 温度稳定性的研究 | 第48-49页 |
3.5.5 金属离子对酶活力的影响 | 第49-50页 |
3.5.6 米氏常数的测定 | 第50-51页 |
3.5.7 酶反应底物特异性的研究 | 第51-55页 |
3.5.8 pNP系列酶活力的研究 | 第55-56页 |
3.5.9 α-淀粉酶活力的研究 | 第56-58页 |
第四章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-62页 |
致谢 | 第62页 |