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水解人参皂苷Rb1的微生物筛选

摘要第4-5页
Abstract第5页
第一章 文献综述第10-21页
    1.1 人参第10-12页
        1.1.1 人参的形态第10-11页
        1.1.2 人参的生长分布第11页
        1.1.3 人参的生物学作用第11-12页
            1.1.3.1 对中枢神经系统的特异作用第12页
            1.1.3.2 抗炎防癌第12页
            1.1.3.3 对糖尿病的作用第12页
        1.1.4 人参的成分第12页
    1.2 人参皂苷第12-15页
        1.2.1 人参皂苷的分类第13页
        1.2.2 人参皂苷的结构第13-14页
        1.2.3 人参皂苷的生物学作用第14-15页
            1.2.3.1 人参皂苷的延缓衰老作用第15页
            1.2.3.2 人参皂苷对缺血状态的缓解作用第15页
            1.2.3.3 促进造血细胞发生第15页
    1.3 人参皂苷Rb第15-17页
        1.3.1 人参皂苷Rb_1的结构第16页
        1.3.2 人参皂苷Rb_1的生物学作用第16-17页
            1.3.2.1 人参皂苷Rb_1对免疫系统的作用第16页
            1.3.2.2 人参皂苷Rb_1对呼吸系统的保护作用第16页
            1.3.2.3 人参皂苷Rb_1对内皮细胞的保护作用第16-17页
        1.3.3 人参皂苷Rb_1的性质第17页
    1.4 人参皂苷Rg_3第17-18页
        1.4.1 人参皂苷Rg_3的性质与结构第17页
        1.4.2 人参皂苷Rg_3的生物学作用第17-18页
            1.4.2.1 人参皂苷Rg_3抗肿瘤生长及抑制转移的作用第17-18页
            1.4.2.2 人参皂苷Rg_3对免疫功能的影响第18页
            1.4.2.3 抗病毒作用第18页
    1.5 酶法水解人参皂苷Rb_1的研究进展第18-19页
    1.6 前景展望第19-20页
    1.7 论文的主要研究内容第20-21页
第二章 材料与方法第21-37页
    2.1 菌种来源第21页
    2.2 实验试剂第21-22页
    2.3 实验仪器第22页
    2.4 培养基第22-23页
    2.5 试剂制备第23页
        2.5.1 人参皂苷Rb_1底物溶液的制备第23页
        2.5.2 人参皂苷标准品溶液的制备第23页
        2.5.3 人参总皂苷和芦丁营养液的制备第23页
        2.5.4 豆粕、穿山龙、槐花和人参浸出液的制备第23页
    2.6 实验方法第23-37页
        2.6.1 水解人参皂苷Rb_1菌种的筛选第24-25页
            2.6.1.1 样品的采集以及预处理第24页
            2.6.1.2 菌种的富集培养第24页
            2.6.1.3 菌种分离第24页
            2.6.1.4 菌种的初筛第24页
            2.6.1.5 菌种的复筛第24页
            2.6.1.6 酶液的提取第24-25页
            2.6.1.7 酶与底物的反应第25页
            2.6.1.8 TLC点板(薄层层析)第25页
        2.6.2 菌种发酵条件的优化第25-27页
            2.6.2.1 培养基的确定第25页
            2.6.2.2 诱导物的确定第25-26页
            2.6.2.3 诱导物加入量的确定第26页
            2.6.2.4 培养温度的确定第26-27页
            2.6.2.5 接菌量的确定第27页
        2.6.3 发酵曲线的制定第27-29页
            2.6.3.1 发酵液pH值的测定第27页
            2.6.3.2 酶活力的测定第27页
            2.6.3.3 菌体浓度的测定第27页
            2.6.3.4 蛋白质浓度的测定第27-29页
        2.6.4 酶的分离纯化-离子交换层析第29-31页
        2.6.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度检测第31-33页
        2.6.6 提纯酶的酶性质研究第33-37页
            2.6.6.1 最适pH值的研究第33页
            2.6.6.2 pH稳定性的研究第33-34页
            2.6.6.3 最适反应温度的研究第34页
            2.6.6.4 温度稳定性的研究第34页
            2.6.6.5 米氏常数的研究第34页
            2.6.6.6 金属离子对酶活力的影响第34页
            2.6.6.7 人参皂苷Rb_1水解酶的酶反应特性第34页
            2.6.6.8 提纯酶的其它酶活力测定第34-37页
第三章 结果与讨论第37-58页
    3.1 产人参皂苷Rb_1水解酶菌株的筛选第37-38页
    3.2 菌体发酵条件的优化第38-41页
        3.2.1 水解人参皂苷Rb_1的最佳培养基第38页
        3.2.2 水解人参皂苷Rb_1的最佳诱导物第38-39页
        3.2.3 诱导物的最适加入量第39-40页
        3.2.4 最适培养温度第40-41页
        3.2.5 最佳接菌量第41页
    3.3 发酵曲线第41-43页
    3.4 DEAE-Cellulose DE52柱分离纯化粗酶液第43-46页
        3.4.1 粗酶液的分离纯化第43-44页
        3.4.2 提纯酶的酶活力的检测第44-45页
        3.4.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测提纯酶的纯度第45页
        3.4.4 提纯酶分子量的测定第45-46页
    3.5 提纯酶的酶性质研究第46-58页
        3.5.1 酶反应的最适pH第46-47页
        3.5.2 pH稳定性的研究第47-48页
        3.5.3 酶反应的最适温度第48页
        3.5.4 温度稳定性的研究第48-49页
        3.5.5 金属离子对酶活力的影响第49-50页
        3.5.6 米氏常数的测定第50-51页
        3.5.7 酶反应底物特异性的研究第51-55页
        3.5.8 pNP系列酶活力的研究第55-56页
        3.5.9 α-淀粉酶活力的研究第56-58页
第四章 结论第58-59页
参考文献第59-62页
致谢第62页

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