| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-21页 |
| 1.1 中药中天然产物化学的研究 | 第9-11页 |
| 1.1.1 中药化学与天然产物开发 | 第9-10页 |
| 1.1.2 基于生物技术的天然产物化学研究 | 第10-11页 |
| 1.2 丹参的植物形态及生长习性,分类,药理学研究 | 第11-13页 |
| 1.2.2 丹参的分类 | 第12页 |
| 1.2.3 丹参的药理学研究 | 第12-13页 |
| 1.3 丹参中的化学成分及主要成分的药理作用 | 第13-17页 |
| 1.3.1 丹参中主要化学成分的研究 | 第13-16页 |
| 1.3.1.1 丹参素的化学结构 | 第15页 |
| 1.3.1.2 其他水溶性成分的化学结构 | 第15-16页 |
| 1.3.2 丹参素的药理作用 | 第16-17页 |
| 1.4 丹参素生物转化的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.5 本论文主要研究内容 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-36页 |
| 2.1 实验材料、试剂与设备 | 第21-23页 |
| 2.1.1 菌种 | 第21页 |
| 2.1.2 培养基 | 第21页 |
| 2.1.3 试剂与材料 | 第21-22页 |
| 2.1.4 仪器 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-36页 |
| 2.2.1 微生物的发酵培养 | 第23页 |
| 2.2.2 粗酶液的提取 | 第23页 |
| 2.2.3 酶活力测定方法 | 第23页 |
| 2.2.4 薄层层析法 | 第23-24页 |
| 2.2.5 粗酶液酶反应条件的研究 | 第24-25页 |
| 2.2.6 提取酶液蛋白含量的测定及蛋白浓度与酶活力关系的研究 | 第25-27页 |
| 2.2.6.1 G-250考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 | 第25-27页 |
| 2.2.6.2 粗酶液浓度的变化与酶活力之间的关系 | 第27页 |
| 2.2.7 用DEAE-cellulose DE52阴离子交换层析分离纯化丹参素转化酶 | 第27-29页 |
| 2.2.7.1 DEAE—cellulose DE52阴离子交换柱的处理 | 第28-29页 |
| 2.2.7.2 DEAE柱的上样分离 | 第29页 |
| 2.2.8 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测纯化度及计算丹参素转化酶的分子量 | 第29-32页 |
| 2.2.8.1 溶液的配制 | 第29-30页 |
| 2.2.8.2 胶的制备 | 第30-31页 |
| 2.2.8.3 样品处理 | 第31页 |
| 2.2.8.4 实验过程 | 第31-32页 |
| 2.2.9 提纯酶的酶性质研究 | 第32-33页 |
| 2.2.9.1 最适pH值的研究 | 第32页 |
| 2.2.9.2 pH稳定性的研究 | 第32页 |
| 2.2.9.3 最适反应温度的研究 | 第32页 |
| 2.2.9.4 温度稳定性的研究 | 第32页 |
| 2.2.9.5 金属离子对酶活影响的研究 | 第32-33页 |
| 2.2.9.6 丹参素转化酶的米氏常数 | 第33页 |
| 2.2.10 丹参素转化酶酶特性的研究 | 第33-36页 |
| 2.2.10.1 pNP系列酶活力研究 | 第33-35页 |
| 2.2.10.2 α-淀粉酶酶活力研究 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第36-53页 |
| 3.1 粗酶液的酶反应条件的研究 | 第36-39页 |
| 3.1.1 酶反应最适底物浓度的确定 | 第36-37页 |
| 3.1.2 酶反应最适pH的确定 | 第37页 |
| 3.1.3 酶反应最适温度的确定 | 第37-38页 |
| 3.1.4 酶反应最佳反应时间的确定 | 第38-39页 |
| 3.2 粗酶液蛋白含量的研究 | 第39-40页 |
| 3.2.1 考马斯亮蓝G-250法测定蛋白含量 | 第39页 |
| 3.2.2 粗酶液浓度变化与酶活的关系 | 第39-40页 |
| 3.3 DEAE-cellulose DE52阴离子交换柱分离纯化丹参素转化酶 | 第40-44页 |
| 3.3.1 上柱前酶活的测定 | 第40-41页 |
| 3.3.2 DEAE阴离子交换柱的上样分离 | 第41-42页 |
| 3.3.3 峰值管酶液酶活力检测 | 第42-43页 |
| 3.3.4 SDS-PAGE检测丹参素转化酶纯化度并计算提纯酶的分子量 | 第43-44页 |
| 3.3.4.1 SDS-PAGE检测丹参素转化酶纯化度 | 第43-44页 |
| 3.3.4.2 根据SDS-PAGE电泳图计算提纯酶的分子量 | 第44页 |
| 3.4 提纯酶液的酶性质研究 | 第44-50页 |
| 3.4.1 提纯酶液最适pH值的研究 | 第44-45页 |
| 3.4.2 pH稳定性的研究 | 第45-47页 |
| 3.4.3 最适反应温度的研究 | 第47页 |
| 3.4.4 温度稳定性的研究 | 第47-48页 |
| 3.4.5 金属离子对酶活力影响的研究 | 第48-49页 |
| 3.4.6 丹参素转化酶米氏常数的研究 | 第49-50页 |
| 3.5 酶反应特异性的研究 | 第50-53页 |
| 3.5.1 pNP系列酶活力的测定 | 第50-52页 |
| 3.5.2 α-淀粉酶活力测定 | 第52-53页 |
| 第四章 结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
