致谢 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第18-27页 |
1.1 亚硝酸盐的主要来源及危害 | 第18-19页 |
1.1.1 蔬菜中的亚硝酸盐 | 第18-19页 |
1.1.2 肉制品中的亚硝酸盐 | 第19页 |
1.1.3 水体中的亚硝酸盐 | 第19页 |
1.1.4 亚硝酸盐的危害 | 第19页 |
1.2 泡菜中乳酸菌及降解亚硝酸盐的研究进展 | 第19-21页 |
1.2.1 亚硝酸盐的降解方法 | 第19-20页 |
1.2.2 乳酸菌降解亚硝酸盐的研究 | 第20-21页 |
1.3 基因组改组技术 | 第21-23页 |
1.3.1 基因组改组技术的原理 | 第21-22页 |
1.3.2 基因组改组技术在乳酸菌育种中的应用 | 第22-23页 |
1.4 双向电泳技术的应用 | 第23-24页 |
1.4.1 蛋白质组学 | 第23页 |
1.4.2 蛋白质双向电泳技术 | 第23-24页 |
1.4.3 蛋白质组学在乳酸菌研究中的应用 | 第24页 |
1.5 本课题研究目的、意义及主要内容 | 第24-27页 |
1.5.1 本课题研究的目的、意义 | 第24-25页 |
1.5.2 本课题主要研究内容 | 第25-26页 |
1.5.3 本课题研究技术路线 | 第26-27页 |
第二章 降解亚硝酸盐的植物乳杆菌~(60)Coγ射线诱变选育 | 第27-38页 |
2.1 材料与方法 | 第27-29页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第27-28页 |
2.1.2 仪器与设备 | 第28页 |
2.1.3 培养基 | 第28页 |
2.1.4 实验方法 | 第28-29页 |
2.2 试验方案设计 | 第29-31页 |
2.2.1 乳酸菌16SrDNA分离鉴定 | 第29-30页 |
2.2.2 乳酸菌的亚硝酸盐及食盐耐受性研究 | 第30页 |
2.2.3 泡菜中分离所得乳酸菌对亚硝酸盐降解能力测定 | 第30页 |
2.2.4 植物乳杆菌生长曲线的测定 | 第30页 |
2.2.5 ~(60)Co-γ射线诱变处理 | 第30-31页 |
2.2.6 ~(60)Co-γ射线诱变选育正突变菌株的筛选 | 第31页 |
2.2.7 突变菌株遗传稳定性考察 | 第31页 |
2.3 结果与分析 | 第31-37页 |
2.3.1 乳酸菌的分离鉴定 | 第31-32页 |
2.3.2 乳酸菌菌株对亚硝酸盐及食盐耐受性 | 第32-33页 |
2.3.3 泡菜中分离所得乳酸菌对亚硝酸盐降解率的测定 | 第33页 |
2.3.4 植物乳杆菌生长曲线的测定 | 第33-34页 |
2.3.5 ~(60)Co-γ对植物乳杆菌的致死效果 | 第34-35页 |
2.3.6 平板初筛和摇瓶复筛 | 第35-36页 |
2.3.7 突变菌株的遗传稳定性考察 | 第36-37页 |
2.4 本章小结 | 第37-38页 |
第三章 基因组改组选育降解亚硝酸盐能力增强乳酸菌菌株 | 第38-52页 |
3.1 材料与方法 | 第38-40页 |
3.1.1 材料与试剂 | 第38页 |
3.1.2 仪器与设备 | 第38-39页 |
3.1.3 培养基 | 第39页 |
3.1.4 缓冲液 | 第39页 |
3.1.5 实验方法 | 第39-40页 |
3.2 试验方案设计 | 第40-41页 |
3.2.1 EDTA、赖氨酸、甘氨酸前处理对植物乳杆菌原生质体制备及再生的影响 | 第40页 |
3.2.2 培养时间对植物乳杆菌原生质体形成率及再生率的影响 | 第40-41页 |
3.2.3 植物乳杆菌原生质体制备及再生条件优化 | 第41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-51页 |
3.3.1 不同添加物对植物乳杆菌原生质体形成率及再生率的影响 | 第41-42页 |
3.3.2 培养时间对植物乳杆菌原生质体形成率及再生率的影响 | 第42-43页 |
3.3.3 溶菌酶处理时间对原生质体形成率及再生率的影响 | 第43-44页 |
3.3.4 混合酶浓度对原生质体的形成率及再生率影响 | 第44-45页 |
3.3.5 植物乳杆菌原生质体制备及再生条件优化正交实验 | 第45-46页 |
3.3.6 原生质体热灭活 | 第46-47页 |
3.3.7 原生质体紫外灭活率 | 第47页 |
3.3.8 PEG6000浓度对原生质体融合的影响 | 第47-48页 |
3.3.9 融合时间对原生质体融合率的影响 | 第48-49页 |
3.3.10 第一轮基因组改组 | 第49页 |
3.3.11 第一轮基因组改组菌株遗传稳定考察 | 第49-50页 |
3.3.12 第二轮基因组改组 | 第50页 |
3.3.13 第二轮基因组改组菌株遗传稳定性考察 | 第50-51页 |
3.4 本章小结 | 第51-52页 |
第四章 原始菌株、诱变菌株、改组菌株的发酵特性 | 第52-61页 |
4.1 材料与方法 | 第52-54页 |
4.1.1 材料与试剂 | 第52页 |
4.1.2 试剂 | 第52-53页 |
4.1.3 仪器与设备 | 第53页 |
4.1.4 培养基 | 第53页 |
4.1.5 实验方法 | 第53-54页 |
4.2 试验方案设计 | 第54-55页 |
4.2.1 植物乳杆菌原始菌株、诱变菌株及改组菌株亚硝酸盐降解曲线 | 第54页 |
4.2.2 植物乳杆菌原始菌株、诱变菌株及改组菌株亚硝酸盐酶活曲线 | 第54页 |
4.2.3 植物乳杆菌原始菌株、诱变菌株及改组菌株产乳酸能力 | 第54-55页 |
4.2.4 植物乳杆菌原始菌株、诱变菌株及改组菌株产乳酸能力 | 第55页 |
4.2.5 植物乳杆菌原始菌株、诱变菌株及改组菌株发酵泡菜特性研究 | 第55页 |
4.3 结果分析 | 第55-60页 |
4.3.1 植物乳杆菌原始菌株、诱变菌株及改组菌株亚硝酸盐降解曲线 | 第55页 |
4.3.2 不同菌株亚硝酸盐还原酶酶活比较 | 第55-56页 |
4.3.3 乳酸菌产乳酸能力 | 第56-57页 |
4.3.4 发酵液中葡萄糖的含量变化 | 第57-58页 |
4.3.5 乳酸菌接种自制发酵泡菜 | 第58-60页 |
4.4 本章小结 | 第60-61页 |
第五章 原始菌株、诱变菌株、基因组改组菌株在添加亚硝酸盐条件下蛋白差异表达分析 | 第61-70页 |
5.1 材料与方法 | 第61-64页 |
5.1.1 实验材料和试剂 | 第61-62页 |
5.1.2 实验仪器与设备 | 第62页 |
5.1.3 实验方法 | 第62-64页 |
5.2 实验方案设计 | 第64-65页 |
5.2.1 预制胶条的选择 | 第64-65页 |
5.2.2 蛋白质提取方法的确定 | 第65页 |
5.2.3 改组菌株、诱变菌株、原始菌株双向电泳图谱的对比分析 | 第65页 |
5.2.4 差异蛋白点的鉴定 | 第65页 |
5.3 结果分析 | 第65-68页 |
5.3.1 IPG预制胶条pH范围的选择 | 第65-66页 |
5.3.2 蛋白提取方法的比较 | 第66-67页 |
5.3.3 原始菌株、诱变菌株、改组菌株双向电泳图谱对比分析 | 第67页 |
5.3.4 差异蛋白点的分析鉴定 | 第67-68页 |
5.4 本章小结 | 第68-70页 |
第六章 结论与展望 | 第70-72页 |
6.1 结论 | 第70页 |
6.2 展望 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-81页 |
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第81页 |