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基因组改组选育泡菜中增强降解亚硝酸盐能力乳酸菌菌株与特性分析

致谢第7-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
第一章 绪论第18-27页
    1.1 亚硝酸盐的主要来源及危害第18-19页
        1.1.1 蔬菜中的亚硝酸盐第18-19页
        1.1.2 肉制品中的亚硝酸盐第19页
        1.1.3 水体中的亚硝酸盐第19页
        1.1.4 亚硝酸盐的危害第19页
    1.2 泡菜中乳酸菌及降解亚硝酸盐的研究进展第19-21页
        1.2.1 亚硝酸盐的降解方法第19-20页
        1.2.2 乳酸菌降解亚硝酸盐的研究第20-21页
    1.3 基因组改组技术第21-23页
        1.3.1 基因组改组技术的原理第21-22页
        1.3.2 基因组改组技术在乳酸菌育种中的应用第22-23页
    1.4 双向电泳技术的应用第23-24页
        1.4.1 蛋白质组学第23页
        1.4.2 蛋白质双向电泳技术第23-24页
        1.4.3 蛋白质组学在乳酸菌研究中的应用第24页
    1.5 本课题研究目的、意义及主要内容第24-27页
        1.5.1 本课题研究的目的、意义第24-25页
        1.5.2 本课题主要研究内容第25-26页
        1.5.3 本课题研究技术路线第26-27页
第二章 降解亚硝酸盐的植物乳杆菌~(60)Coγ射线诱变选育第27-38页
    2.1 材料与方法第27-29页
        2.1.1 材料与试剂第27-28页
        2.1.2 仪器与设备第28页
        2.1.3 培养基第28页
        2.1.4 实验方法第28-29页
    2.2 试验方案设计第29-31页
        2.2.1 乳酸菌16SrDNA分离鉴定第29-30页
        2.2.2 乳酸菌的亚硝酸盐及食盐耐受性研究第30页
        2.2.3 泡菜中分离所得乳酸菌对亚硝酸盐降解能力测定第30页
        2.2.4 植物乳杆菌生长曲线的测定第30页
        2.2.5 ~(60)Co-γ射线诱变处理第30-31页
        2.2.6 ~(60)Co-γ射线诱变选育正突变菌株的筛选第31页
        2.2.7 突变菌株遗传稳定性考察第31页
    2.3 结果与分析第31-37页
        2.3.1 乳酸菌的分离鉴定第31-32页
        2.3.2 乳酸菌菌株对亚硝酸盐及食盐耐受性第32-33页
        2.3.3 泡菜中分离所得乳酸菌对亚硝酸盐降解率的测定第33页
        2.3.4 植物乳杆菌生长曲线的测定第33-34页
        2.3.5 ~(60)Co-γ对植物乳杆菌的致死效果第34-35页
        2.3.6 平板初筛和摇瓶复筛第35-36页
        2.3.7 突变菌株的遗传稳定性考察第36-37页
    2.4 本章小结第37-38页
第三章 基因组改组选育降解亚硝酸盐能力增强乳酸菌菌株第38-52页
    3.1 材料与方法第38-40页
        3.1.1 材料与试剂第38页
        3.1.2 仪器与设备第38-39页
        3.1.3 培养基第39页
        3.1.4 缓冲液第39页
        3.1.5 实验方法第39-40页
    3.2 试验方案设计第40-41页
        3.2.1 EDTA、赖氨酸、甘氨酸前处理对植物乳杆菌原生质体制备及再生的影响第40页
        3.2.2 培养时间对植物乳杆菌原生质体形成率及再生率的影响第40-41页
        3.2.3 植物乳杆菌原生质体制备及再生条件优化第41页
    3.3 结果与分析第41-51页
        3.3.1 不同添加物对植物乳杆菌原生质体形成率及再生率的影响第41-42页
        3.3.2 培养时间对植物乳杆菌原生质体形成率及再生率的影响第42-43页
        3.3.3 溶菌酶处理时间对原生质体形成率及再生率的影响第43-44页
        3.3.4 混合酶浓度对原生质体的形成率及再生率影响第44-45页
        3.3.5 植物乳杆菌原生质体制备及再生条件优化正交实验第45-46页
        3.3.6 原生质体热灭活第46-47页
        3.3.7 原生质体紫外灭活率第47页
        3.3.8 PEG6000浓度对原生质体融合的影响第47-48页
        3.3.9 融合时间对原生质体融合率的影响第48-49页
        3.3.10 第一轮基因组改组第49页
        3.3.11 第一轮基因组改组菌株遗传稳定考察第49-50页
        3.3.12 第二轮基因组改组第50页
        3.3.13 第二轮基因组改组菌株遗传稳定性考察第50-51页
    3.4 本章小结第51-52页
第四章 原始菌株、诱变菌株、改组菌株的发酵特性第52-61页
    4.1 材料与方法第52-54页
        4.1.1 材料与试剂第52页
        4.1.2 试剂第52-53页
        4.1.3 仪器与设备第53页
        4.1.4 培养基第53页
        4.1.5 实验方法第53-54页
    4.2 试验方案设计第54-55页
        4.2.1 植物乳杆菌原始菌株、诱变菌株及改组菌株亚硝酸盐降解曲线第54页
        4.2.2 植物乳杆菌原始菌株、诱变菌株及改组菌株亚硝酸盐酶活曲线第54页
        4.2.3 植物乳杆菌原始菌株、诱变菌株及改组菌株产乳酸能力第54-55页
        4.2.4 植物乳杆菌原始菌株、诱变菌株及改组菌株产乳酸能力第55页
        4.2.5 植物乳杆菌原始菌株、诱变菌株及改组菌株发酵泡菜特性研究第55页
    4.3 结果分析第55-60页
        4.3.1 植物乳杆菌原始菌株、诱变菌株及改组菌株亚硝酸盐降解曲线第55页
        4.3.2 不同菌株亚硝酸盐还原酶酶活比较第55-56页
        4.3.3 乳酸菌产乳酸能力第56-57页
        4.3.4 发酵液中葡萄糖的含量变化第57-58页
        4.3.5 乳酸菌接种自制发酵泡菜第58-60页
    4.4 本章小结第60-61页
第五章 原始菌株、诱变菌株、基因组改组菌株在添加亚硝酸盐条件下蛋白差异表达分析第61-70页
    5.1 材料与方法第61-64页
        5.1.1 实验材料和试剂第61-62页
        5.1.2 实验仪器与设备第62页
        5.1.3 实验方法第62-64页
    5.2 实验方案设计第64-65页
        5.2.1 预制胶条的选择第64-65页
        5.2.2 蛋白质提取方法的确定第65页
        5.2.3 改组菌株、诱变菌株、原始菌株双向电泳图谱的对比分析第65页
        5.2.4 差异蛋白点的鉴定第65页
    5.3 结果分析第65-68页
        5.3.1 IPG预制胶条pH范围的选择第65-66页
        5.3.2 蛋白提取方法的比较第66-67页
        5.3.3 原始菌株、诱变菌株、改组菌株双向电泳图谱对比分析第67页
        5.3.4 差异蛋白点的分析鉴定第67-68页
    5.4 本章小结第68-70页
第六章 结论与展望第70-72页
    6.1 结论第70页
    6.2 展望第70-72页
参考文献第72-81页
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况第81页

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