| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 课题研究的目的和意义 | 第11页 |
| 1.2 国内外研究现状及分析 | 第11-20页 |
| 1.2.1 嗜热链球菌研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.2 德氏乳杆菌保加利亚亚种研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.3 双组分信号转导系统研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.4 嗜热链球菌中双组分信号转导系统研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.5 德氏乳杆菌保加利亚亚种中双组分信号转导系统研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3 主要研究内容 | 第20-22页 |
| 1.3.1 菌株中TCS的分布分析 | 第20页 |
| 1.3.2 单菌和两菌共同发酵酸奶过程中，各自TCSs的变化 | 第20页 |
| 1.3.3 关键TCSs失活与功能鉴定 | 第20-22页 |
| 第2章 材料和方法 | 第22-39页 |
| 2.1 材料和仪器 | 第22-26页 |
| 2.1.1 菌株来源 | 第22页 |
| 2.1.2 实验设备 | 第22-23页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 常用试剂的配制 | 第24-26页 |
| 2.1.5 引物 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-39页 |
| 2.2.1 基因组DNA提取 | 第26-27页 |
| 2.2.2 菌株中TCS分布的PCR检测 | 第27-29页 |
| 2.2.3 菌株生产性能研究 | 第29-31页 |
| 2.2.4 RNA提取 | 第31-32页 |
| 2.2.5 cDNA的合成 | 第32-33页 |
| 2.2.6 RT-qPCR | 第33-34页 |
| 2.2.7 重组质粒的构建 | 第34-38页 |
| 2.2.8 数据结果分析方法 | 第38-39页 |
| 第3章 菌株中TCS的分布分析 | 第39-48页 |
| 3.1 菌株CS5和CH3基因组DNA的提取 | 第39-40页 |
| 3.2 S.thermophilus CS5中TCS分布 | 第40-41页 |
| 3.3 S.thermophilus CS5中TCS结构域与功能性 | 第41-43页 |
| 3.3.1 S.thermophilus CS5中TCS结构域分析 | 第42页 |
| 3.3.2 S.thermophilus CS5中TCS功能性分析 | 第42-43页 |
| 3.4 L.delbrueckii subsp. bulgaricus CH3中TCS分布 | 第43-44页 |
| 3.5 L.delbrueckii subsp. bulgaricus CH3中TCS结构域与功能性 | 第44-47页 |
| 3.5.1 L.delbrueckii subsp. bulgaricus CH3中TCS结构域分析 | 第45-46页 |
| 3.5.2 L.delbrueckii subsp. bulgaricus CH3中TCS功能性分析 | 第46-47页 |
| 3.6 本章小结 | 第47-48页 |
| 第4章 单菌和两菌共生发酵酸奶过程中TCSs变化 | 第48-72页 |
| 4.1 菌株生长阶段测定 | 第48-50页 |
| 4.1.1 S.thermophilus CS5菌株生长阶段分析 | 第48-49页 |
| 4.1.2 L.delbrueckii subsp. bulgaricus CH3生长阶段分析 | 第49页 |
| 4.1.3 CS5和CH3两种菌共生的生长阶段分析 | 第49-50页 |
| 4.2 菌株RNA提取及cDNA合成 | 第50-56页 |
| 4.2.1 S.thermophilus CS5 RNA提取及cDNA合成 | 第51-52页 |
| 4.2.2 L.delbrueckii subsp. bulgaricus CH3 RNA提取cDNA合成 | 第52-54页 |
| 4.2.3 CS5和CH3共生菌株RNA的提取及cDNA的合成 | 第54-56页 |
| 4.3 RT-qPCR引物筛选 | 第56-57页 |
| 4.3.1 S.thermophilus CS5引物筛选 | 第56页 |
| 4.3.2 L.delbrueckii subsp. bulgaricus CH3引物筛选 | 第56-57页 |
| 4.4 L.delbrueckii subsp. bulgaricus CH3菌株各TCSs差异表达分析 | 第57-63页 |
| 4.4.1 单菌发酵过程中不同阶段TCSs的表达情况 | 第57-59页 |
| 4.4.2 共生培养发酵不同阶段TCSs的表达情况 | 第59-62页 |
| 4.4.3 共生培养对TCSs表达量影响 | 第62-63页 |
| 4.5 S.thermophilus CS5各TCSs基因差异表达分析 | 第63-70页 |
| 4.5.1 单菌发酵不同阶段TCSs的表达情况 | 第63-66页 |
| 4.5.2 共生培养发酵不同阶段TCSs的表达情况 | 第66-68页 |
| 4.5.3 共生培养对TCSs表达量影响 | 第68-70页 |
| 4.6 本章小结 | 第70-72页 |
| 第5章 关键TCSs失活与功能鉴定 | 第72-83页 |
| 5.1 突变菌株CH3-H、CH3-R的功能鉴定 | 第72-77页 |
| 5.1.1 共生菌株生长阶段的测定 | 第72-74页 |
| 5.1.2 共生菌株产乙醛能力的研究 | 第74-76页 |
| 5.1.3 共生菌株产黏能力的研究 | 第76-77页 |
| 5.2 重组质粒的构建 | 第77-82页 |
| 5.2.1 S.thermophilus CS5菌株关键TCSs基因片段PCR扩增 | 第77-78页 |
| 5.2.2 载体质粒p RV300提取与酶切位点的验证 | 第78-79页 |
| 5.2.3 外源片段、载体的双酶切和胶回收 | 第79-80页 |
| 5.2.4 重组质粒的构建 | 第80-81页 |
| 5.2.5 转化子验证 | 第81页 |
| 5.2.6 红霉素筛选浓度的确定 | 第81-82页 |
| 5.3 本章小结 | 第82-83页 |
| 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-90页 |
| 附录 | 第90-95页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第95-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
