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卵黄高磷蛋白的分离纯化、结构表征及功能特性研究

摘要第1-14页
Abstract第14-18页
縮略语表第18-19页
第一章 文献综述第19-36页
 1 卵黄高磷蛋白的来源第19-21页
 2 卵黄高磷蛋白的组成第21-22页
 3 卵黄高磷蛋白的结构第22-26页
 4 卵黄高磷蛋白的分离纯化第26-27页
 5 卵黄高磷蛋白的物化特性第27-30页
   ·金属螯合作用第27-28页
   ·热稳定性第28-29页
   ·抗氧化性第29页
   ·乳化性及界面性能第29-30页
 6 卵黄高磷蛋白的生物活性第30-33页
   ·抗菌抗病毒作用第30-31页
   ·生理学功能第31-33页
 7 选题意义及主要研究内容第33-36页
   ·本课题研究意义第33-34页
   ·本课题主要研究内容第34-36页
第二章 卵黄高磷蛋白的分离纯化与鉴定第36-53页
 1 材料与方法第37-43页
   ·材料第37-38页
     ·原料第37页
     ·主要试剂第37页
     ·主要仪器设备第37-38页
   ·方法第38-43页
     ·聚乙二醇沉淀法制备卵黄高磷蛋白第38-39页
     ·聚乙二醇法制备卵黄高磷蛋白样品的分析第39-41页
     ·阴离子交换色谱第41-42页
     ·电泳第42-43页
     ·统计分析第43页
 2 结果与分析第43-51页
   ·聚乙二醇浓度对卵黄高磷蛋白分离效果的影响第43-44页
   ·溶液pH对卵黄高磷蛋白分离效果的影响第44-45页
   ·最佳分离条件的确定第45-47页
   ·卵黄高磷蛋白的纯度、组分和结构分析第47-49页
   ·阴离子交换层析纯化不含多价金属离子的卵黄高磷蛋白第49-51页
 3 讨论第51-52页
 4 本章小结第52-53页
第三章 卵黄高磷蛋白的结构分析第53-75页
 1 材料与方法第53-57页
   ·材料第53-54页
     ·原料第53页
     ·主要试剂第53-54页
     ·主要仪器设备第54页
   ·方法第54-57页
     ·卵黄高磷蛋白制备第54页
     ·氨基酸组成分析第54-55页
     ·傅里叶红外FTIR分析第55页
     ·圆二色谱CD分析第55页
     ·SDS-PAGE和胶内酶切提取肽段第55-56页
     ·LTQ-MS鉴定卵黄高磷蛋白的磷酸化位点第56页
     ·生物信息学分析第56-57页
 2 结果与分析第57-72页
   ·卵黄高磷蛋白的氨基酸组成第57-59页
   ·卵黄高磷蛋白的结构分析第59-61页
     ·FTIR分析结果第59-60页
     ·CD分析结果第60-61页
   ·卵黄高磷蛋白磷酸化位点鉴定第61-69页
   ·卵黄高磷蛋白生物信息学分析第69-72页
     ·卵黄高磷蛋白与磷酸化蛋白质的氨基酸组成分析第69-71页
     ·不同物种来源卵黄高磷蛋白的多序列比对和进化树分析第71页
     ·卵黄高磷蛋白与磷酸化蛋白质多序列比对和进化树分析第71-72页
 3 讨论第72-73页
 4 本章小结第73-75页
第四章 卵黄高磷蛋白与钙离子相互作用研究第75-89页
 1 材料与方法第75-78页
   ·材料第75-76页
     ·原料第75页
     ·主要试剂第75-76页
     ·主要仪器设备第76页
   ·方法第76-78页
     ·卵黄高磷蛋白的制备第76页
     ·钙离子选择性电极分析(ISE)第76-77页
     ·等温滴定量热分析(ITC)第77-78页
     ·圆二色谱分析(CD)第78页
     ·荧光光谱分析第78页
 2 结果与分析第78-86页
   ·卵黄高磷蛋白与钙离子之间的结合常数第78-80页
   ·卵黄高磷蛋白与钙离子作用的热力学第80-83页
   ·钙离子结合对卵黄高磷蛋白结构的影响第83-86页
     ·卵黄高磷蛋白结合钙离子的二级结构变化第83-85页
     ·卵黄高磷蛋白结合钙离子的荧光光谱分析第85-86页
 3 讨论第86-87页
 4 本章小结第87-89页
第五章 卵黄高磷蛋白对磷酸钙矿物晶相转化的影响研究第89-111页
 1 材料与方法第90-93页
   ·材料第90-91页
     ·原料第90页
     ·主要试剂第90页
     ·主要仪器设备第90-91页
   ·方法第91-93页
     ·卵黄高磷蛋白的制备第91页
     ·磷酸钙晶相转化实验第91-92页
     ·分析与表征第92-93页
 2 结果与分析第93-110页
   ·卵黄高磷蛋白促进磷酸钙矿物晶相的转化第93-97页
   ·卵黄高磷蛋白影响磷酸钙矿物的微观形貌和化学组成第97-99页
   ·卵黄高磷蛋白参与了磷酸钙矿物的形成第99-103页
   ·卵黄高磷蛋白与游离钙离子的互作是其调控磷酸钙矿化的关键第103-106页
   ·BSA调控磷酸钙矿化的模式与卵黄高磷蛋白不同第106-109页
   ·卵黄高磷蛋白调控磷酸钙矿物晶相转化的机制第109-110页
 3 讨论第110页
 4 本章小结第110-111页
第六章 卵黄高磷蛋白磷酸化程度对其调控矿化的影响第111-128页
 1 材料与方法第111-115页
   ·材料第111-112页
     ·原料第111页
     ·主要试剂第111-112页
     ·主要仪器设备第112页
   ·方法第112-115页
     ·卵黄高磷蛋白的制备第112页
     ·碱液去磷酸化处理第112-113页
     ·非变性凝胶电泳(Native-PAGE)第113页
     ·磷含量测定及去磷酸化程度计算第113-114页
     ·圆二色谱分析第114页
     ·矿化实验第114页
     ·pH-Stat实验第114-115页
     ·分析方法第115页
 2 结果与分析第115-126页
   ·卵黄高磷蛋白的去磷酸化第115-118页
     ·碱处理对卵黄高磷蛋白的去磷酸化作用第115-116页
     ·碱处理对卵黄高磷蛋白的水解作用第116-117页
     ·去磷酸化对卵黄高磷蛋白二级结构的影响第117-118页
   ·去磷酸化对卵黄高磷蛋白参与矿化的影响第118-120页
     ·荧光光谱分析结果第118-119页
     ·FTIR分析结果第119-120页
   ·pH-Stat研究磷酸钙矿物形成及转化的动态过程第120-122页
     ·卵黄高磷蛋白参与时的滴定曲线第120-121页
     ·不同浓度卵黄高磷蛋白对滴定曲线的影响第121-122页
     ·不同去磷酸化程度对滴定曲线的影响第122页
   ·pH-Stat实验矿化产物的表征与分析第122-126页
     ·矿化产物的FTIR光谱图第122-123页
     ·矿化产物的晶相组成第123-125页
     ·矿化产物的微观形貌第125-126页
 3 讨论第126-127页
 4 本章小结第127-128页
第七章 卵黄高磷蛋白磷酸肽对矿化的影响第128-144页
 1 材料与方法第128-132页
   ·材料第128-129页
     ·原料第128-129页
     ·主要试剂第129页
     ·主要仪器设备第129页
   ·方法第129-132页
     ·卵黄高磷蛋白的制备第129-130页
     ·酶解制备卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)第130页
     ·阴离子交换层析分离和脱盐处理第130页
     ·电泳第130-131页
     ·圆二色谱分析第131页
     ·pH-stat实验第131页
     ·分析与表征第131页
     ·质谱鉴定第131-132页
 2 结果与分析第132-142页
   ·卵黄高磷蛋白的酶解效果第132-133页
   ·卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPPs)的分离和脱盐第133-134页
   ·卵黄高磷蛋白磷酸肽的组分和分子量第134-135页
   ·卵黄高磷蛋白磷酸肽的二级结构分析第135页
   ·卵黄高磷蛋白磷酸肽对矿化反应过程的影响第135-136页
   ·矿化产物的表征与分析第136-140页
     ·卵黄高磷蛋白磷酸肽各组分参与矿化反应分析第136-137页
     ·FTIR分析第137-138页
     ·XRD分析第138-139页
     ·SEM分析第139-140页
   ·卵黄高磷蛋白磷酸肽质谱鉴定第140-142页
 3 讨论第142-143页
 4 本章小结第143-144页
第八章 结论与展望第144-147页
 1 结论第144-146页
 2 实验创新点第146页
 3 展望第146-147页
参考文献第147-163页
附录第163-172页
 1 不同来源的卵黄高磷蛋白多序列比对第163-166页
 2 磷酸化蛋白质的多序列比对第166-170页
 3 作者简介第170-172页
致谢第172-173页

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