| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| ·γ-氨基丁酸 | 第7-10页 |
| ·GABA 结构与理化性质 | 第7页 |
| ·GABA 的生理功能和应用 | 第7-8页 |
| ·GABA 的生产方法 | 第8-9页 |
| ·GABA 的代谢途经 | 第9-10页 |
| ·谷氨酸脱羧酶 | 第10-11页 |
| ·谷氨酸棒杆菌和 L-谷氨酸的合成 | 第11-13页 |
| ·谷氨酸棒杆菌 | 第11页 |
| ·L-谷氨酸及其生物合成途经 | 第11-12页 |
| ·影响 L-谷氨酸生物合成的要素 | 第12-13页 |
| ·立题背景与意义 | 第13-14页 |
| ·研究思路和研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第15-23页 |
| ·实验材料 | 第15-17页 |
| ·菌株、质粒及引物 | 第15页 |
| ·培养基 | 第15-16页 |
| ·工具酶、试剂和试剂盒 | 第16-17页 |
| ·实验仪器 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-23页 |
| ·基因组的提取和目的基因的扩增 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第18页 |
| ·谷氨酸脱羧酶基因共表达重组质粒的构建 | 第18-20页 |
| ·谷氨酸棒杆菌工程菌的构建 | 第20页 |
| ·谷氨酸棒杆菌工程菌摇瓶发酵及其优化 | 第20-21页 |
| ·谷氨酸棒杆菌工程菌 GAD 酶活和胞内氨基酸含量测定 | 第21-22页 |
| ·谷氨酸棒杆菌工程菌上罐发酵生产 GABA | 第22页 |
| ·分析方法 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-41页 |
| ·重组质粒与谷氨酸棒杆菌工程菌的构建 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的构建 | 第23-24页 |
| ·谷氨酸棒杆菌工程菌的构建 | 第24页 |
| ·阶段小结 | 第24页 |
| ·谷氨酸棒杆菌工程菌 GABA 合成能力比较 | 第24-25页 |
| ·谷氨酸棒杆菌工程菌初步发酵比较 | 第24-25页 |
| ·阶段小结 | 第25页 |
| ·工程菌 ATCC 13032/pDXW-10-gadB1-gadB2 摇瓶发酵初步优化 | 第25-31页 |
| ·种子培养基优化和生长曲线测定 | 第26-27页 |
| ·尿素补加次数对 GABA 合成的影响 | 第27-29页 |
| ·葡萄糖浓度对 GABA 合成的影响 | 第29页 |
| ·玉米浆浓度对 GABA 合成的影响 | 第29-30页 |
| ·PLP 的添加对 GABA 合成的影响 | 第30-31页 |
| ·阶段小结 | 第31页 |
| ·工程菌 ATCC 13032/pDXW-10-gadB1-gadB2 发酵过程各参数研究 | 第31-38页 |
| ·发酵过程 OD562和残糖变化 | 第32-33页 |
| ·胞外 pH 变化和氨基酸产量变化的关系 | 第33-35页 |
| ·胞内 L-谷氨酸和 GABA 积累水平以及比酶活变化 | 第35-37页 |
| ·延时发酵提高 GABA 产量 | 第37-38页 |
| ·阶段小结 | 第38页 |
| ·工程菌 ATCC 13032/pDXW-10-gadB1-gadB2 上罐发酵 | 第38-41页 |
| ·发酵过程 OD562和残糖变化 | 第38-40页 |
| ·发酵过程胞外 pH 和氨基酸含量变化 | 第40页 |
| ·阶段小结 | 第40-41页 |
| 主要结论与展望 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |
