| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 引言 | 第7-14页 |
| ·大肠杆菌 LPS 结构与功能 | 第7-8页 |
| ·大肠杆菌 LPS 结构 | 第7-8页 |
| ·大肠杆菌 LPS 功能 | 第8页 |
| ·大肠杆菌类脂 A 合成与修饰 | 第8-10页 |
| ·大肠杆菌类脂 A 合成 | 第9-10页 |
| ·大肠杆菌类脂 A 修饰 | 第10页 |
| ·类脂 A 的应用价值 | 第10-11页 |
| ·立题背景和意义 | 第11-12页 |
| ·课题研究方案及研究内容 | 第12-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-28页 |
| ·实验材料与仪器设备 | 第14-17页 |
| ·菌株、质粒、引物及培养条件 | 第14-15页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16-17页 |
| ·分子生物学相关操作 | 第17-21页 |
| ·基因组 DNA 提取及质粒提取 | 第17页 |
| ·PCR 反应 | 第17页 |
| ·质粒和 DNA 片段的酶切连接 | 第17页 |
| ·Cre 酶温敏型表达载体 pKD-Cre 的构建 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及电转化 | 第18页 |
| ·大肠杆菌突变株验证及抗性基因的去除 | 第18页 |
| ·大肠杆菌中基因敲除的方法 | 第18-20页 |
| ·大肠杆菌中外源基因染色体整合表达的方法 | 第20-21页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株的构建及其类脂 A 的结构鉴定 | 第21-24页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株的构建 | 第21-23页 |
| ·HW001、HW002、HW003、HW004 和 HW005 菌株类脂 A 结构提取 | 第23页 |
| ·HW001、HW002、HW003、HW004 和 HW005 菌株类脂 A 结构的 TLC 分析 | 第23页 |
| ·HW001、HW002、HW003、HW004 和 HW005 菌株类脂 A 结构的 ESI/MS 分析 | 第23页 |
| ·HW006 和 HW007 菌株 LPS 小量提取及 SDS-PAGE 分析 | 第23-24页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株外膜特性的分析 | 第24-25页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株生长曲线的测定 | 第24页 |
| ·NPN 法测定细胞外膜渗透性 | 第24页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株最小抑菌浓度的测定 | 第24页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株细胞表面疏水性测定 | 第24-25页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株 LPS 提取纯化及 RAW264.7 细胞刺激实验 | 第25-28页 |
| ·W3110、HW001、HW002、HW003、HW004 和 HW005 菌株 LPS 大量提取方法 | 第25页 |
| ·W3110、HW001、HW002、HW003、HW004 和 HW005 菌株的 LPS 纯化方法 | 第25页 |
| ·RAW264.7 细胞培养及不同 LPS 刺激方法 | 第25-26页 |
| ·细胞因子 IL-6 和 TNF-α含量测定 | 第26-28页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第28-47页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株的构建及其类脂 A 结构的确定 | 第28-41页 |
| ·Cre 酶温敏型表达载体 pKD-Cre 的构建 | 第28页 |
| ·大肠杆菌染色体基因整合表达出发菌株 HW000 的构建 | 第28-30页 |
| ·大肠杆菌 HW001 突变菌株的构建及其类脂 A 结构的确定 | 第30-32页 |
| ·大肠杆菌 HW002 突变菌株的构建及其类脂 A 结构的确定 | 第32-34页 |
| ·大肠杆菌 HW003 突变菌株的构建及其类脂 A 结构的确定 | 第34-36页 |
| ·大肠杆菌 HW004 突变菌株的构建及其类脂 A 结构的确定 | 第36-39页 |
| ·大肠杆菌 HW005 突变菌株的构建及其类脂 A 结构的确定 | 第39-40页 |
| ·大肠杆菌 HW006 和 HW007 突变菌株的构建及其 LPS 结构的确定 | 第40-41页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株细胞外膜特性的比较 | 第41-44页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株生长速率的比较 | 第41-42页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株细胞外膜渗透性的比较 | 第42-43页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株 MIC 的比较 | 第43-44页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株细胞表面疏水性的比较 | 第44页 |
| ·各种大肠杆菌类脂 A 突变菌株 LPS 细胞刺激能力的比较 | 第44-47页 |
| 主要结论与展望 | 第47-49页 |
| 主要结论 | 第47页 |
| 展望 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |
