| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-15页 |
| ·甾体药物 | 第8-10页 |
| ·甾体化合物 | 第8页 |
| ·甾体药物概述 | 第8-10页 |
| ·甾体药物生产的微生物转化法 | 第10页 |
| ·甾体药物中间体——雄烯二酮 | 第10-12页 |
| ·雄烯二酮 | 第10-11页 |
| ·雄烯二酮的研究现状 | 第11-12页 |
| ·微生物降解植物甾醇机理的研究 | 第12页 |
| ·3-甾酮-△~1-脱氢酶 | 第12-14页 |
| ·3-甾酮-△~1-脱氢酶及其性质 | 第12-13页 |
| ·KSDD 的研究进展 | 第13-14页 |
| ·立题意义 | 第14页 |
| ·本课题主要的研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第15-25页 |
| ·实验材料 | 第15-17页 |
| ·实验仪器 | 第15页 |
| ·菌株与质粒 | 第15页 |
| ·试剂 | 第15-16页 |
| ·培养基 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-25页 |
| ·重组大肠杆菌 E. coli BL21/pET22b-ksdd 的构建及其生长、产酶特性分析 | 第17-19页 |
| ·KSDD 酶的 Ni-NTA 纯化 | 第19-20页 |
| ·重组大肠杆菌全细胞转化 AD | 第20页 |
| ·全细胞转化产物的 TLC 分析及 HPLC 检测 | 第20页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌 B. subtilis 168/pMA5-ksdd 的构建及其 AD 转化分析 | 第20-22页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌的发酵优化及转化工艺优化 | 第22-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-54页 |
| ·重组大肠杆菌的构建及其生长、产酶特性分析 | 第25-34页 |
| ·KSDD 酶简单生物信息学分析 | 第25-28页 |
| ·重组大肠杆菌的构建及验证 | 第28-29页 |
| ·重组大肠杆菌的诱导表达及产酶分析 | 第29-32页 |
| ·重组大肠杆菌全细胞转化 AD | 第32-34页 |
| ·高效转化 AD 重组枯草芽孢杆菌的构建及转化条件的初步摸索 | 第34-40页 |
| ·重组质粒 pMA5-ksdd 的构建 | 第34-35页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌的构建 | 第35-36页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌中 KSDD 的酶活测定 | 第36页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌中 KSDD 酶的 AD 转化能力分析 | 第36-40页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌转化 AD 产 ADD 的培养基优化 | 第40-48页 |
| ·种子生长曲线和最佳种龄的确定 | 第40-41页 |
| ·碳源对重组枯草芽孢杆菌转化 AD 产 ADD 的影响 | 第41-43页 |
| ·氮源对重组枯草芽孢杆菌转化 AD 产 ADD 的影响 | 第43-45页 |
| ·无机盐对重组枯草芽孢杆菌转化 AD 产 ADD 的影响 | 第45-47页 |
| ·玉米浆对重组枯草芽孢杆菌转化 AD 产 ADD 的影响 | 第47页 |
| ·正交实验设计优化培养基成分 | 第47-48页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌转化 AD 产 ADD 的发酵条件优化 | 第48-51页 |
| ·初始 pH 对菌体量及 AD 转化率的影响 | 第48-49页 |
| ·接种量对菌体量及 AD 转化率的影响 | 第49-50页 |
| ·重组菌在最优培养基、培养条件下的生长曲线及最佳转化菌龄的确定 | 第50-51页 |
| ·全细胞转化过程中助溶剂的优化 | 第51-54页 |
| ·不同助溶剂对 AD 溶解度的影响 | 第51-52页 |
| ·全细胞转化过程中最佳助溶剂浓度的确定 | 第52-54页 |
| 主要结论与展望 | 第54-56页 |
| 主要结论 | 第54-55页 |
| 展望 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第61页 |
