中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-30页 |
·乳酸菌细菌素的研究 | 第10-18页 |
·细菌素的发展历史 | 第10-12页 |
·细菌素的分类 | 第12-13页 |
·乳酸菌细菌素的生物学特性 | 第13-14页 |
·抑菌机理 | 第14-16页 |
·细菌素抗性菌的产生 | 第16页 |
·细菌素在食品工业的应用 | 第16-18页 |
·乳酸片球菌素的遗传学分析和作用机制的研究 | 第18-20页 |
·乳酸片球菌素基因结构组成 | 第18-19页 |
·分子结构与作用机制 | 第19-20页 |
·乳酸片球菌素的异源表达 | 第20-28页 |
·乳酸片球菌素在大肠杆菌中的异源表达 | 第21-23页 |
·乳酸片球菌素在乳酸菌中的异源表达 | 第23-26页 |
·乳酸片球菌素在酵母系统中的异源表达 | 第26-28页 |
·乳酸片球菌素研究的目的和意义 | 第28-30页 |
第二章 片球菌素 pedA 基因的克隆及在大肠杆菌中的融合表达 | 第30-53页 |
·材料和试剂 | 第30-37页 |
·试验药品 | 第30-32页 |
·试验仪器 | 第32-33页 |
·菌株 | 第33页 |
·克隆载体 | 第33页 |
·试剂和修饰酶类 | 第33页 |
·试剂盒 | 第33-34页 |
·主要试剂配制 | 第34-37页 |
·PCR 引物的设计与合成 | 第37页 |
·方法 | 第37-47页 |
·pedA 基因的获取 | 第37-39页 |
·目的片断与 T 载体的连接 | 第39-40页 |
·重组质粒转化 E. coli DH5α感受态菌 | 第40-42页 |
·Trx-Ped A 编码序列原核表达载体的构建 | 第42-45页 |
·重组质粒的鉴定 | 第45页 |
·重组蛋白的融合表达与鉴定 | 第45-46页 |
·诱导条件的优化 | 第46-47页 |
·结果 | 第47-52页 |
·PCR 扩增 pedA 基因 | 第47页 |
·TA 克隆的鉴定 | 第47-49页 |
·Trx-Ped A 编码序列原核表达载体的构建 | 第49页 |
·重组质粒的鉴定 | 第49-50页 |
·融合蛋白的诱导表达 | 第50-51页 |
·诱导条件的优化 | 第51-52页 |
·本章小结 | 第52-53页 |
第三章 融合蛋白包涵体的纯化及复性研究 | 第53-65页 |
·材料和试剂 | 第53-56页 |
·试验药品 | 第53-54页 |
·试验仪器 | 第54页 |
·菌种 | 第54页 |
·试剂和修饰酶类及其它 | 第54页 |
·主要试剂的配制 | 第54-56页 |
·方法 | 第56-58页 |
·制备细胞抽提物 | 第56页 |
·包涵体蛋白的洗涤与溶解 | 第56页 |
·包涵体蛋白复性条件的探索 | 第56页 |
·融合蛋白 Ni 柱纯化 | 第56-57页 |
·肠激酶处理与片球菌素基因工程产物活性的检测 | 第57-58页 |
·结果与讨论 | 第58-64页 |
·细胞抽提物的分析 | 第58-59页 |
·包涵体的溶解与复性 | 第59-60页 |
·融合蛋白 Ni 柱纯化 | 第60-61页 |
·肠激酶处理与片球菌素基因工程产物活性的检测 | 第61-64页 |
·本章小结 | 第64-65页 |
第四章 片球菌素基因工程产物抑菌活性的研究 | 第65-70页 |
·材料和试剂 | 第65页 |
·试验药品和仪器 | 第65页 |
·菌种 | 第65页 |
·方法 | 第65-66页 |
·片球菌素基因工程产物的抑菌谱 | 第65页 |
·片球菌素基因工程产物对李氏杆菌生长的抑制 | 第65-66页 |
·温度对片球菌素基因工程产物活性的影响 | 第66页 |
·结果与讨论 | 第66-69页 |
·片球菌素基因工程产物的抑菌谱 | 第66-67页 |
·片球菌素基因工程产物对李氏杆菌生长的抑制 | 第67-68页 |
·温度对片球菌素基因工程产物活性的影响 | 第68-69页 |
·本章小结 | 第69-70页 |
第五章 结论与展望 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-81页 |
发表论文和科研情况说明 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |