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乳酸片球菌素pedA基因的克隆与表达

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-10页
第一章 文献综述第10-30页
   ·乳酸菌细菌素的研究第10-18页
     ·细菌素的发展历史第10-12页
     ·细菌素的分类第12-13页
     ·乳酸菌细菌素的生物学特性第13-14页
     ·抑菌机理第14-16页
     ·细菌素抗性菌的产生第16页
     ·细菌素在食品工业的应用第16-18页
   ·乳酸片球菌素的遗传学分析和作用机制的研究第18-20页
     ·乳酸片球菌素基因结构组成第18-19页
     ·分子结构与作用机制第19-20页
   ·乳酸片球菌素的异源表达第20-28页
     ·乳酸片球菌素在大肠杆菌中的异源表达第21-23页
     ·乳酸片球菌素在乳酸菌中的异源表达第23-26页
     ·乳酸片球菌素在酵母系统中的异源表达第26-28页
   ·乳酸片球菌素研究的目的和意义第28-30页
第二章 片球菌素 pedA 基因的克隆及在大肠杆菌中的融合表达第30-53页
   ·材料和试剂第30-37页
     ·试验药品第30-32页
     ·试验仪器第32-33页
     ·菌株第33页
     ·克隆载体第33页
     ·试剂和修饰酶类第33页
     ·试剂盒第33-34页
     ·主要试剂配制第34-37页
     ·PCR 引物的设计与合成第37页
   ·方法第37-47页
     ·pedA 基因的获取第37-39页
     ·目的片断与 T 载体的连接第39-40页
     ·重组质粒转化 E. coli DH5α感受态菌第40-42页
     ·Trx-Ped A 编码序列原核表达载体的构建第42-45页
     ·重组质粒的鉴定第45页
     ·重组蛋白的融合表达与鉴定第45-46页
     ·诱导条件的优化第46-47页
   ·结果第47-52页
     ·PCR 扩增 pedA 基因第47页
     ·TA 克隆的鉴定第47-49页
     ·Trx-Ped A 编码序列原核表达载体的构建第49页
     ·重组质粒的鉴定第49-50页
     ·融合蛋白的诱导表达第50-51页
     ·诱导条件的优化第51-52页
   ·本章小结第52-53页
第三章 融合蛋白包涵体的纯化及复性研究第53-65页
   ·材料和试剂第53-56页
     ·试验药品第53-54页
     ·试验仪器第54页
     ·菌种第54页
     ·试剂和修饰酶类及其它第54页
     ·主要试剂的配制第54-56页
   ·方法第56-58页
     ·制备细胞抽提物第56页
     ·包涵体蛋白的洗涤与溶解第56页
     ·包涵体蛋白复性条件的探索第56页
     ·融合蛋白 Ni 柱纯化第56-57页
     ·肠激酶处理与片球菌素基因工程产物活性的检测第57-58页
   ·结果与讨论第58-64页
     ·细胞抽提物的分析第58-59页
     ·包涵体的溶解与复性第59-60页
     ·融合蛋白 Ni 柱纯化第60-61页
     ·肠激酶处理与片球菌素基因工程产物活性的检测第61-64页
   ·本章小结第64-65页
第四章 片球菌素基因工程产物抑菌活性的研究第65-70页
   ·材料和试剂第65页
     ·试验药品和仪器第65页
     ·菌种第65页
   ·方法第65-66页
     ·片球菌素基因工程产物的抑菌谱第65页
     ·片球菌素基因工程产物对李氏杆菌生长的抑制第65-66页
     ·温度对片球菌素基因工程产物活性的影响第66页
   ·结果与讨论第66-69页
     ·片球菌素基因工程产物的抑菌谱第66-67页
     ·片球菌素基因工程产物对李氏杆菌生长的抑制第67-68页
     ·温度对片球菌素基因工程产物活性的影响第68-69页
   ·本章小结第69-70页
第五章 结论与展望第70-71页
参考文献第71-81页
发表论文和科研情况说明第81-82页
致谢第82页

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