高通量筛选策略降低黄酒发酵过程中尿素的积累
| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-14页 |
| 1.1 EC | 第7-9页 |
| 1.1.1 EC简介 | 第7页 |
| 1.1.2 降低EC的方法 | 第7-9页 |
| 1.1.2.1 代谢工程法 | 第7-8页 |
| 1.1.2.2 酶法 | 第8页 |
| 1.1.2.3 工艺优化 | 第8-9页 |
| 1.2 适应性进化 | 第9-10页 |
| 1.2.1 适应性进化简介 | 第9页 |
| 1.2.2 适应性进化应用 | 第9-10页 |
| 1.3 高通量筛选 | 第10-11页 |
| 1.3.1 高通量筛选简介 | 第10页 |
| 1.3.2 高通量筛选的应用 | 第10-11页 |
| 1.4 课题背景与意义 | 第11-12页 |
| 1.5 课题研究内容 | 第12-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-21页 |
| 2.1 实验菌株与培养基 | 第14-15页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第14页 |
| 2.1.2 培养基 | 第14页 |
| 2.1.3 引物 | 第14-15页 |
| 2.2 试剂和仪器设备 | 第15页 |
| 2.2.1 试剂 | 第15页 |
| 2.2.2 仪器 | 第15页 |
| 2.3 培养方法 | 第15页 |
| 2.4 高通量筛选方法 | 第15-16页 |
| 2.5 模拟黄酒发酵鉴定 | 第16-17页 |
| 2.5.1 种子液制备 | 第16-17页 |
| 2.5.2 发酵工艺流程 | 第17页 |
| 2.6 适应性进化传代培养 | 第17页 |
| 2.7 诱变处理方法 | 第17-18页 |
| 2.7.1 ARTP诱变处理 | 第17-18页 |
| 2.7.2 UV诱变处理 | 第18页 |
| 2.7.3 DES诱变处理 | 第18页 |
| 2.8 其他分析方法 | 第18-19页 |
| 2.8.1 氨基酸检测 | 第18页 |
| 2.8.2 氨基甲酸乙酯检测 | 第18-19页 |
| 2.8.3 尿素检测 | 第19页 |
| 2.8.3.1 高效荧光液相色谱检测 | 第19页 |
| 2.8.3.2 尿素高通量检测方法 | 第19页 |
| 2.9 超高速流式细胞仪分选 | 第19-20页 |
| 2.9.1 染色 | 第19-20页 |
| 2.9.2 超高速流式细胞仪分选 | 第20页 |
| 2.10 实时荧光定量PCR | 第20-21页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第21-38页 |
| 3.1 适应性进化解除氮代谢物阻遏效应 | 第21-24页 |
| 3.1.1 适应性进化结果分析 | 第21页 |
| 3.1.2 高通量筛选 | 第21-22页 |
| 3.1.3 尿素利用检测 | 第22-23页 |
| 3.1.4 稳定性检测 | 第23页 |
| 3.1.5 模拟黄酒发酵 | 第23-24页 |
| 3.2 尿素低积累量菌株高通量筛选 | 第24-35页 |
| 3.2.1 流式细胞仪检测致死率 | 第24-25页 |
| 3.2.2 尿素高通量检测方法的确定 | 第25-26页 |
| 3.2.3 ARTP诱变 | 第26-29页 |
| 3.2.4 紫外诱变 | 第29-31页 |
| 3.2.5 化学诱变 | 第31-34页 |
| 3.2.6 尿素低积累量菌株稳定性确定 | 第34页 |
| 3.2.7 尿素低积累量菌株模拟黄酒发酵 | 第34-35页 |
| 3.3 尿素积累相关基因的转录水平分析 | 第35-38页 |
| 3.3.1 适应性进化菌株RT-qPCR分析 | 第35-36页 |
| 3.3.2 诱变菌株RT-qPCR分析 | 第36页 |
| 3.3.3 模拟黄酒发酵特性分析 | 第36-38页 |
| 主要结论与展望 | 第38-40页 |
| 主要结论 | 第38页 |
| 展望 | 第38-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 附录： 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第46页 |
