凝乳酶优良菌株的选诱及其酶活特性的研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 前言 | 第14-26页 |
| 1 国内外凝乳酶的研究概况 | 第14-18页 |
| ·凝乳的方法 | 第14-15页 |
| ·凝乳酶的作用机理 | 第15页 |
| ·高效凝乳酶的要求 | 第15页 |
| ·凝乳酶的分类 | 第15-17页 |
| ·按来源分 | 第15-17页 |
| ·按产品形状分 | 第17页 |
| ·凝乳酶的固定化研究 | 第17-18页 |
| 2 微生物凝乳酶的研究进展 | 第18-24页 |
| ·微生物凝乳酶的研究现状 | 第18页 |
| ·产高效凝乳酶生产菌株获得的途径 | 第18-22页 |
| ·优化工艺条件 | 第19页 |
| ·诱变育种 | 第19-20页 |
| ·基因工程育种 | 第20-21页 |
| ·蛋白质工程育种 | 第21-22页 |
| ·生产开发与展望 | 第22-24页 |
| 3 本项研究的意义与目标 | 第24-25页 |
| 4 本项试验研究的内容 | 第25-26页 |
| ·产高效凝乳酶菌株的筛选 | 第25页 |
| ·对目的菌株的诱变选育 | 第25页 |
| ·对目的菌株产酶条件的研究 | 第25页 |
| ·对目的菌株产酶性质的研究 | 第25-26页 |
| 第一章 凝乳酶生产菌的分离和筛选 | 第26-39页 |
| 引言 | 第26页 |
| 1 材料与方法 | 第26-31页 |
| ·材料 | 第26-29页 |
| ·菌种 | 第26页 |
| ·培养基及其培养方法 | 第26-27页 |
| ·仪器与设备 | 第27-28页 |
| ·药品 | 第28页 |
| ·测凝乳活力与蛋白水解活力的试剂 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-31页 |
| ·菌种分离的方法 | 第29页 |
| ·筛选高活力产凝乳酶菌株的方法 | 第29-30页 |
| ·酶活力测定方法 | 第30-31页 |
| ·菌种初步鉴定 | 第31页 |
| ·菌种毒力的测定 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-37页 |
| ·酪氨酸标准曲线的制作 | 第31-32页 |
| ·分离结果 | 第32-33页 |
| ·被选菌株的生物学特性 | 第33-35页 |
| ·菌种鉴定 | 第35-37页 |
| ·细菌个体形态的观察 | 第35-36页 |
| ·细菌培养特征的观察 | 第36页 |
| ·菌种鉴定的生理生化反应 | 第36-37页 |
| ·毒力测定结果 | 第37页 |
| 3. 小结 | 第37-39页 |
| 第二章 BZ-17菌株的诱变育种 | 第39-48页 |
| 引言 | 第39页 |
| 1 材料与方法 | 第39-42页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·出发菌株 | 第39页 |
| ·培养基及其培养方法 | 第39-40页 |
| ·仪器与设备 | 第40页 |
| ·药品与试剂 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-42页 |
| ·菌株的诱变处理 | 第40-42页 |
| ·诱变致死率和正突变率的计算 | 第42页 |
| ·菌株的筛选方法 | 第42页 |
| ·酶活力测定方法 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-47页 |
| ·紫外线诱变结果 | 第42-44页 |
| ·紫外线诱变剂量的选择 | 第42-43页 |
| ·紫外线两次诱变结果 | 第43-44页 |
| ·亚硝酸诱变结果 | 第44-45页 |
| ·亚硝酸诱变剂量的选择 | 第44页 |
| ·亚硝酸两次诱变结果 | 第44-45页 |
| ·紫外线与亚硝酸复合诱变结果 | 第45页 |
| ·突变株遗传稳定性的考察 | 第45-46页 |
| ·出发菌株BZ-17与变异株UH-9的比较 | 第46-47页 |
| 3 小结 | 第47-48页 |
| 第三章 UH-9菌株产酶条件的优化 | 第48-62页 |
| 引言 | 第48页 |
| 1 材料与方法 | 第48-52页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·菌株 | 第48页 |
| ·培养基及其培养方法 | 第48-49页 |
| ·主要药品与试剂 | 第49页 |
| ·主要仪器及设备 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-52页 |
| ·酶活力的测定方法 | 第49页 |
| ·适宜培养基的选择 | 第49页 |
| ·产酶培养基的优化 | 第49-51页 |
| ·发酵条件的优化 | 第51-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-60页 |
| ·适宜培养基的选择 | 第52页 |
| ·产酶培养基的优化 | 第52-56页 |
| ·不同碳源对产酶的影响 | 第52-53页 |
| ·不同氮源对产酶的影响 | 第53页 |
| ·磷酸盐对凝乳酶合成的影响 | 第53-54页 |
| ·钙盐对凝乳酶合成的影响 | 第54页 |
| ·最佳培养基的确定 | 第54-56页 |
| ·发酵条件的优化 | 第56-60页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第57页 |
| ·培养温度对产酶的影响 | 第57-58页 |
| ·培养基起始pH值对产酶的影响 | 第58页 |
| ·不同菌龄的种子菌对产酶的影响 | 第58-59页 |
| ·装液量对产酶的影响 | 第59页 |
| ·摇床转速对产酶的影响 | 第59-60页 |
| 3 小结 | 第60-62页 |
| 第四章 UH-9菌株凝乳酶活的研究 | 第62-70页 |
| 引言 | 第62页 |
| 1 材料与方法 | 第62-64页 |
| ·材料 | 第62-63页 |
| ·菌种 | 第62页 |
| ·培养基及其培养方法 | 第62页 |
| ·试验仪器、药品与试剂 | 第62-63页 |
| ·方法 | 第63-64页 |
| ·酶作用最适pH研究 | 第63页 |
| ·酶的pH稳定性研究 | 第63页 |
| ·酶作用最适温度研究 | 第63页 |
| ·酶的光稳定性研究 | 第63页 |
| ·酶的热稳定性研究 | 第63-64页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-69页 |
| ·酶作用的最适pH | 第64-65页 |
| ·酶的pH值稳定性 | 第65页 |
| ·酶作用的最适温度 | 第65-66页 |
| ·酶对光的稳定性 | 第66页 |
| ·酶的热稳定性 | 第66-67页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第67-69页 |
| 3 小结 | 第69-70页 |
| 第五章 研究结果与展望 | 第70-74页 |
| 1 研究结果 | 第70-71页 |
| ·菌株的筛选和鉴定 | 第70页 |
| ·产高效凝乳酶菌株的选育 | 第70-71页 |
| ·高效凝乳酶菌株产酶条件的优化 | 第71页 |
| ·UH-9凝乳酶活性的研究 | 第71页 |
| 2 本试验创新之处 | 第71-72页 |
| 3 后续研究展望 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简介 | 第82-83页 |
