| 引言 | 第1-20页 |
| 1 HSP 概述 | 第8-10页 |
| 2 HSP 与多肽的结合及复合物的免疫原性 | 第10-11页 |
| 3 HSP 与天然免疫 | 第11页 |
| 4 HSP 受体 | 第11-16页 |
| ·CD91 | 第12-13页 |
| ·CD40 | 第13-14页 |
| ·CD36 | 第14页 |
| ·LOX-1 | 第14-15页 |
| ·TLR | 第15页 |
| ·SR-A | 第15-16页 |
| 5 HSP 的信号转导 | 第16-20页 |
| 材料和方法 | 第20-35页 |
| 1 实验材料 | 第20-24页 |
| ·限制性内切酶及其它试剂 | 第20页 |
| ·质粒和菌种 | 第20页 |
| ·实验标本 | 第20页 |
| ·引物合成 | 第20页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第20-21页 |
| ·SDS-PAGE 和Western Blot 所用试剂 | 第21-23页 |
| ·纯化蛋白所用试剂 | 第23-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-35页 |
| ·PCR 法获取GFP 片断 | 第24页 |
| ·PCR 产物电泳及回收 | 第24页 |
| ·PCR 产物与pMD18-T 载体连接 | 第24-25页 |
| ·感受态细胞制备 | 第25页 |
| ·连接产物转化到JM109 感受态细胞 | 第25页 |
| ·质粒的提取与鉴定 | 第25-26页 |
| ·将GFP 从pMD18-T 载体上亚克隆到pET28-HSP65 上 | 第26-28页 |
| ·重组蛋白HSP65-GFP 在大肠杆菌中诱导表达 | 第28页 |
| ·SDS-PAGE | 第28-29页 |
| ·Western Blot | 第29页 |
| ·镍亲和层析法纯化重组蛋白HSP65-GFP 和HSP65 | 第29-31页 |
| ·细胞的准备 | 第31-32页 |
| ·结合实验 | 第32-34页 |
| ·竞争实验 | 第34-35页 |
| 实验结果 | 第35-40页 |
| 1 重组PET28-HSP65-GFP 质粒的构建及序列测定 | 第35-36页 |
| ·PCR 法钓取GFP 基因 | 第35页 |
| ·GFP 基因的TA 克隆和测序 | 第35页 |
| ·重组pET28-HSP65-GFP 质粒的构建和测序 | 第35-36页 |
| 2 重组 HSP65、HSP65-GFP 蛋白的表达、纯化和鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组HSP65-GFP 蛋白的诱导表达、纯化和鉴定 | 第36页 |
| ·重组HSP65 蛋白的诱导表达、纯化和鉴定 | 第36-37页 |
| 3 HSP65-GFP 与小鼠腹腔巨噬细胞的结合实验 | 第37-38页 |
| ·时间和温度对结合实验的影响 | 第37页 |
| ·胎牛血清对结合实验的影响 | 第37页 |
| ·HSP65 对HSP65-GFP 与巨噬细胞结合的竞争实验 | 第37-38页 |
| 4 HSP65-GFP 与人外周血单个核细胞的结合实验 | 第38页 |
| 5 HSP65-GFP 与U937 细胞的结合实验 | 第38页 |
| 6 HSP65-GFP 与血小板的结合实验 | 第38-40页 |
| 讨论 | 第40-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-57页 |
| 附录 | 第57-68页 |
| 图片 | 第57-67页 |
| 英文缩写词表 | 第67-68页 |
| 中文摘要 | 第68-72页 |
| ABSTRACT | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 导师简介 | 第79-80页 |
| 作者简介 | 第80页 |
