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芽孢杆菌高效合成表面活性素的代谢机制及功能研究

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第一章 绪论第11-26页
    1.1 概述第11-19页
        1.1.1 Surfactin的结构与活性第11-14页
        1.1.2 Surfactin的工应用价值第14-16页
        1.1.3 枯草芽孢杆菌surfactin的合成与调控第16-19页
    1.2 Surfactin的国内外研究现状第19-22页
        1.2.1 Surfactin高效合成策略第19-21页
        1.2.2 Surfactin作为信号分子在芽孢杆菌细胞分化中的天然功能第21-22页
    1.3 本研究主要研究内容第22-26页
        1.3.1 本研究立项依据及研究意义第22-24页
        1.3.2 本论文主要研究内容第24-26页
第二章 Surfactin高产菌株的筛选鉴定及其发酵特性研究第26-51页
    2.1 前言第26页
    2.2 材料与方法第26-31页
        2.2.1 大曲样品第26页
        2.2.2 主要试剂和仪器第26页
        2.2.3 培养基和菌种第26-27页
        2.2.4 菌株筛选和分析方法第27-29页
        2.2.5 菌株B. amyloliquefaciens 1-45 的发酵条件优化第29-31页
    2.3 结果与讨论第31-49页
        2.3.1 菌株初筛与分子鉴定第31-33页
        2.3.2 菌株复筛摇瓶培养及其产surfactin的定性定量分析第33-36页
        2.3.3 高产菌种B. amyloliquefaciens 1-45 的形态和进化分析第36-38页
        2.3.4 高产菌株B. amyloliquefaciens 1-45 的发酵条件优化第38-49页
    2.4 本章小结第49-51页
第三章 Surfactin在酿造大曲中的抗菌功能第51-67页
    3.1 前言第51页
    3.2 材料与方法第51-55页
        3.2.1 试剂和仪器第51页
        3.2.2 微生物菌株和培养条件第51-52页
        3.2.3 大曲芽孢杆菌对不良风味链霉菌的抑制效应第52页
        3.2.4 大曲芽孢杆菌与S. sampsonii的相互作用关系研究第52-53页
        3.2.5 链霉菌生长和geosmin含量的测定第53-54页
        3.2.6 抗菌素的分析方法第54页
        3.2.7 菌株 2-16 和 1-45 对geosmin的去除能力研究第54-55页
        3.2.8 统计分析第55页
    3.3 结果与讨论第55-65页
        3.3.1 大曲中天然抑制S. sampsonii的微生物鉴定第55-58页
        3.3.2 大曲芽孢杆菌与链霉菌的相互作用关系研究第58-60页
        3.3.3 菌株 2-16 和 1-45 抗菌代谢物分析第60-63页
        3.3.4 HPLC纯化脂肽对S. sampsonii的抑制作用第63-64页
        3.3.5 菌株 2-16 和 1-45 对geosmin的消除作用第64-65页
    3.4 本章小结第65-67页
第四章 大曲内部芽孢杆菌相互作用关系研究第67-79页
    4.1 前言第67页
    4.2 材料与方法第67-69页
        4.2.1 试剂与仪器第67页
        4.2.2 微生物和培养基第67-68页
        4.2.3 发酵实验设计第68页
        4.2.4 分析方法第68-69页
        4.2.5 数据处理第69页
    4.3 结果与讨论第69-76页
        4.3.1 大曲中产surfactin与产水解酶芽孢杆菌的功能分化第69-71页
        4.3.2 大曲中高产surfactin与高产水解酶芽孢杆菌的相互作用关系第71-72页
        4.3.3 不同功能大曲芽孢杆菌协同发酵优化提高surfactin产量第72-76页
    4.4 特殊环境中微生物相互作用关系与功能定向强化的思考第76-77页
    4.5 本章小结第77-79页
第五章 基于比较基因组与转录组学的surfactin高产机制解析第79-98页
    5.1 前言第79页
    5.2 材料与方法第79-82页
        5.2.1 菌株第79页
        5.2.2 试剂和仪器第79页
        5.2.3 培养基和培养条件第79页
        5.2.4 细胞生长和surfactin含量测定第79-80页
        5.2.5 基因组研究第80-81页
        5.2.6 转录组研究第81-82页
    5.3 结果与讨论第82-97页
        5.3.1 B. amyloliquefaciens MT45和DSM7T菌体生长和产surfactin能力的比较分析第82-84页
        5.3.2 基因组和比较基因组分析第84-87页
        5.3.3 转录组分析第87-90页
        5.3.4 从头构建B. amyloliquefaciens MT45生物合成surfactin的KEGG途径第90-93页
        5.3.5 基于时间序列表达趋势的srfA转录调控分析第93-97页
    5.4 本章小结第97-98页
第六章 基因组优化构建surfactin高效合成细胞工厂第98-119页
    6.1 前言第98页
    6.2 材料与方法第98-106页
        6.2.1 质粒、菌株与引物第98-100页
        6.2.2 试剂和药品第100-101页
        6.2.3 仪器和设备第101页
        6.2.4 培养基第101-102页
        6.2.5 DNA操作第102-105页
        6.2.6 分析方法第105-106页
    6.3 结果与讨论第106-117页
        6.3.1 B. subtilis整合片段的高效融合方法建立第106-107页
        6.3.2 敲除竞争途径对surfactin合成的影响第107-109页
        6.3.3 过量表达抗性基因对surfactin合成的影响第109-111页
        6.3.4 强化支链脂肪酸合成途径对surfactin合成的影响第111-114页
        6.3.5 强化乙酰CoA供应对surfactin合成的影响第114-115页
        6.3.6 提高srfA转录水平对surfactin合成的影响第115-117页
    6.4 本章小结第117-119页
主要结论与展望第119-121页
    主要结论第119-120页
    展望第120-121页
论文主要创新点第121-122页
致谢第122-124页
参考文献第124-138页
附录Ⅰ: 作者在攻读博士学位期间发表的论文第138-139页
附录Ⅱ: 附表第139-148页

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