| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-20页 |
| ·引言 | 第9页 |
| ·腺苷的理化性质及应用 | 第9-10页 |
| ·腺苷的理化性质 | 第9页 |
| ·腺苷的应用 | 第9-10页 |
| ·腺苷的生产方法 | 第10页 |
| ·化学合成法 | 第10页 |
| ·RNA水解法 | 第10页 |
| ·微生物发酵法 | 第10页 |
| ·腺苷的检测方法 | 第10页 |
| ·腺苷的发酵过程优化 | 第10-11页 |
| ·营养环境的优化 | 第11页 |
| ·发酵条件的优化 | 第11页 |
| ·腺苷的生物合成途径及调节机制 | 第11-15页 |
| ·腺苷生物合成途径 | 第11-13页 |
| ·腺苷生物合成的调节机制 | 第13-15页 |
| ·腺苷生产菌的常规育种思路及育种实例 | 第15-18页 |
| ·常规育种思路 | 第15-16页 |
| ·基于代谢工程理论的腺苷工程菌的构建思路 | 第16-17页 |
| ·腺苷生产菌的育种实例 | 第17-18页 |
| ·论文的立题背景和研究内容 | 第18-20页 |
| ·立题背景 | 第18页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-35页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·质粒 | 第20页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第20-25页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21-23页 |
| ·主要溶液 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-35页 |
| ·细菌基因组DNA的小量提取 | 第25页 |
| ·质粒的小量提取 | 第25-26页 |
| ·目的基因扩增 | 第26页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第26-27页 |
| ·DNA的回收纯化 | 第27-28页 |
| ·DNA的酶切 | 第28页 |
| ·连接 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第28-29页 |
| ·枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第29页 |
| ·转化子鉴定 | 第29-30页 |
| ·目的基因测序 | 第30页 |
| ·RNA提取 | 第30页 |
| ·RT-qPCR实验 | 第30-31页 |
| ·SDS-PAGE实验 | 第31-32页 |
| ·谷氨酰胺PRPP转酰胺酶酶活测定 | 第32-33页 |
| ·枯草芽孢杆菌发酵腺苷的培养条件及分析测定方法 | 第33-34页 |
| ·高效液相色谱法定量检测发酵液中的腺苷浓度 | 第34-35页 |
| 3 结果与讨论 | 第35-55页 |
| ·腺苷发酵过程分阶段溶氧控制策略 | 第35-39页 |
| ·腺苷发酵过程中的溶氧变化情况 | 第35-36页 |
| ·不同溶氧水平下对腺苷发酵过程的影响 | 第36页 |
| ·分阶段供养策略的提出及其验证 | 第36-39页 |
| ·腺苷发酵过程溶氧与pH相结合控制策略 | 第39-42页 |
| ·不同pH值下对腺苷发酵过程的影响 | 第39-40页 |
| ·腺苷发酵过程中结合溶氧和pH分阶段控制策略的验证 | 第40-42页 |
| ·枯草芽孢杆菌整合质粒pKF的构建 | 第42-46页 |
| ·P43、purF重叠片段的构建 | 第42-44页 |
| ·整合质粒pKF的构建 | 第44-46页 |
| ·枯草芽孢杆菌XGLF的构建 | 第46-48页 |
| ·质粒pKF电转化枯草芽孢杆菌XGL | 第46页 |
| ·质粒pKF整合枯草芽孢杆菌XGL | 第46-47页 |
| ·枯草芽孢杆菌XGLF的筛选 | 第47-48页 |
| ·相关基因转录分析 | 第48-49页 |
| ·PRPP转酰胺酶活性分析 | 第49-50页 |
| ·胞内IMP含量分析 | 第50-51页 |
| ·嘌呤操纵子中强启动子P43的插入对枯草芽孢杆菌XGLF发酵的影响 | 第51-53页 |
| ·摇瓶分批发酵 | 第51页 |
| ·5L发酵罐发酵参数比较 | 第51-53页 |
| ·枯草芽孢杆菌XGLFA的构建 | 第53-54页 |
| ·载体pBE43::purA电转化枯草芽孢杆菌XGLF | 第53页 |
| ·重组菌B.subtilis XGLFA的蛋白电泳分析 | 第53-54页 |
| ·purA过表达对B.subtilis XGLFA发酵的影响 | 第54-55页 |
| 4 结论 | 第55-56页 |
| 5 展望 | 第56-57页 |
| 6 参考文献 | 第57-63页 |
| 7 研究生期间发表论文情况 | 第63-64页 |
| 8 致谢 | 第64页 |
