| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 解脂耶氏酵母的基本特性及应用潜力 | 第12页 |
| 1.2 解脂耶氏酵母遗传操作工具及方法 | 第12-14页 |
| 1.2.1 启动子和终止子 | 第12-13页 |
| 1.2.2 遗传操作方法 | 第13-14页 |
| 1.3 解脂耶氏酵母在代谢工程中的应用 | 第14-17页 |
| 1.3.1 生产各类化合物简述 | 第14页 |
| 1.3.2 乙酰辅酶A | 第14-15页 |
| 1.3.3 解脂耶氏酵母脂肪酸代谢与过氧化物酶体工程 | 第15-16页 |
| 1.3.4 解脂耶氏酵母合成萜类化合物研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 本论文研究的内容与意义 | 第17-20页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第17-18页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第18-20页 |
| 第二章 解脂耶氏酵母中甲羟戊酸合成途径的过氧化物酶体定位 | 第20-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-27页 |
| 2.1.1 实验菌株和质粒 | 第22-23页 |
| 2.1.2 实验引物 | 第23-24页 |
| 2.1.3 分子生物操作常用酶 | 第24页 |
| 2.1.4 常用试剂盒 | 第24页 |
| 2.1.5 常用生化制剂和药品 | 第24-25页 |
| 2.1.6 培养基及实验室常用试剂配方 | 第25-26页 |
| 2.1.7 仪器和设备 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-32页 |
| 2.2.1 菌种的保藏 | 第27-28页 |
| 2.2.2 分子生物学常规操作 | 第28-32页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第32-42页 |
| 2.3.1 一种增强型过氧化物酶体定位信号ePTS1的功能验证 | 第32-34页 |
| 2.3.2 甲羟戊酸合成途径基因的克隆表达 | 第34-37页 |
| 2.3.3 甲羟戊酸合成途径的过氧化物酶体定位对甲羟戊酸合成的影响 | 第37-40页 |
| 2.3.4 改造解脂耶氏酵母过氧化物酶体提高甲羟戊酸产量 | 第40-42页 |
| 本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 解脂耶氏酵母α-法呢烯高产菌株的构建 | 第43-58页 |
| 3.1 实验材料 | 第43-47页 |
| 3.1.1 实验菌株和质粒 | 第43-45页 |
| 3.1.2 实验引物 | 第45-47页 |
| 3.2 实验方法 | 第47-48页 |
| 3.2.1 α-法呢烯的摇瓶发酵和收集方法 | 第47页 |
| 3.2.2 α-法呢烯的分批补料发酵 | 第47页 |
| 3.2.3 α-法呢烯检测方法 | 第47页 |
| 3.2.4 三油酸甘油酯的定性与定量分析 | 第47-48页 |
| 3.3 实验结果 | 第48-57页 |
| 3.3.1 α-法呢烯的鉴定 | 第48-49页 |
| 3.3.2 α-法呢烯合成途径表达质粒的构建 | 第49-51页 |
| 3.3.3 在工程菌株MP2细胞质中逐步过表达α-法呢烯生物合成途径 | 第51-53页 |
| 3.3.4 逐步将α-法呢烯合成途径过表达并定位至MP2过氧化物酶体 | 第53-54页 |
| 3.3.5 工程菌株FP3利用不同种类油脂发酵生产α-法呢烯 | 第54-55页 |
| 3.3.6 α-法呢烯的补料分批发酵 | 第55-57页 |
| 本章小结 | 第57-58页 |
| 全文总结 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第66-67页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第67页 |
