| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-27页 |
| ·海藻多糖 | 第14页 |
| ·琼胶 | 第14-18页 |
| ·琼胶的结构 | 第14-16页 |
| ·琼胶寡糖的研究进展 | 第16-18页 |
| ·增殖肠道益生菌作用 | 第16-17页 |
| ·保湿美白作用 | 第17页 |
| ·抗肿瘤和抗病毒作用 | 第17页 |
| ·抑菌作用 | 第17页 |
| ·抗炎作用 | 第17-18页 |
| ·抗氧化作用 | 第18页 |
| ·渔业饲料添加剂 | 第18页 |
| ·琼胶降解细菌 | 第18-21页 |
| ·琼胶降解菌的来源 | 第18-20页 |
| ·琼胶降解细菌的分类 | 第20-21页 |
| ·琼胶酶 | 第21-25页 |
| ·琼胶酶的分类 | 第21-22页 |
| ·琼胶酶研究进展 | 第22-24页 |
| ·α-琼胶酶 | 第22-23页 |
| ·β-琼胶酶 | 第23-24页 |
| ·琼胶酶的糖苷水解酶家族归属 | 第24-25页 |
| ·琼胶酶的应用 | 第25页 |
| ·本论文研究的思路、目的与意义 | 第25-27页 |
| 第二章 海水中琼胶降解细菌的筛选及鉴定 | 第27-39页 |
| ·实验材料和仪器 | 第27-28页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·海水样来源 | 第27页 |
| ·实验培养基 | 第27-28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-32页 |
| ·琼胶酶生产菌的分离与纯化及保藏 | 第28-29页 |
| ·琼胶酶酶活力的测定 | 第29-31页 |
| ·标准曲线的制备 | 第29-30页 |
| ·琼胶酶活的测定 | 第30-31页 |
| ·16S rDNA序列分析鉴定 | 第31-32页 |
| ·基因组DNA提取 | 第31-32页 |
| ·16S rDNA的PCR扩增与序列测定 | 第32页 |
| ·序列分析与系统发育树的构建 | 第32页 |
| ·实验结果与分析 | 第32-37页 |
| ·菌株的初筛与复筛 | 第32-33页 |
| ·复筛后菌株的酶活测定 | 第33-34页 |
| ·16S rDNA序列分析鉴定 | 第34-37页 |
| ·16S rDNA的PCR扩增与序列测定 | 第34-36页 |
| ·BLAST同源性搜索与系统发育树的绘制 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37页 |
| ·小结 | 第37-39页 |
| 第三章 琼胶酶产菌Thalassospira sp.fst-13007产琼胶酶的发酵条件优化 | 第39-53页 |
| ·实验材料与仪器设备 | 第39-40页 |
| ·菌种与试剂 | 第39页 |
| ·仪器 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-42页 |
| ·初始培养基配方及发酵培养条件 | 第40页 |
| ·酶活测定 | 第40页 |
| ·生长曲线和产酶曲线的测定 | 第40页 |
| ·种子液的制备 | 第40-41页 |
| ·单因素实验 | 第41-42页 |
| ·碳源对产酶活力的影响 | 第41页 |
| ·氮源对产酶活力的影响 | 第41页 |
| ·盐度对产酶活力的影响 | 第41页 |
| ·pH对产酶活力的影响 | 第41页 |
| ·发酵温度对产酶活力的影响 | 第41-42页 |
| ·装液量对产酶活力的影响 | 第42页 |
| ·接种量对产酶活力的影响 | 第42页 |
| ·摇床转速对产酶活力的影响 | 第42页 |
| ·产酶条件的正交试验 | 第42页 |
| ·实验结果 | 第42-51页 |
| ·菌株fst-13007产酶曲线分析 | 第42-43页 |
| ·单因素实验 | 第43-51页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第43-44页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第44-45页 |
| ·NaCl浓度对产酶的影响 | 第45-46页 |
| ·起始pH对产酶的影响 | 第46页 |
| ·发酵温度对产酶的影响 | 第46-47页 |
| ·装液量对产酶的影响 | 第47-48页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第48-49页 |
| ·摇床转速对产酶的影响 | 第49页 |
| ·正交实验 | 第49-51页 |
| ·正交结果验证 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第四章 琼胶酶的分离纯化与分子量鉴定 | 第53-63页 |
| ·实验材料 | 第53-54页 |
| ·仪器 | 第53页 |
| ·菌株 | 第53-54页 |
| ·试剂 | 第54页 |
| ·发酵培养条件 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-57页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第54-55页 |
| ·酶活的测定方法 | 第55-56页 |
| ·琼胶酶粗酶液的制备 | 第56-57页 |
| ·菌株Thalassospira.sp fst-13007发酵液的制备 | 第56页 |
| ·硫酸铵分级盐析 | 第56页 |
| ·超滤膜纯化 | 第56页 |
| ·DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析 | 第56-57页 |
| ·Sephacryl S-100凝胶柱过滤层析 | 第57页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第57页 |
| ·结果分析 | 第57-61页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第57-58页 |
| ·超滤膜纯化 | 第58页 |
| ·DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析 | 第58-59页 |
| ·Sephacryl S-100凝胶柱过滤层析 | 第59-60页 |
| ·琼胶酶纯化结果 | 第60页 |
| ·琼胶酶的分子量测定 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 第五章 琼胶酶aga-fst酶学性质 | 第63-74页 |
| ·实验材料 | 第63-64页 |
| ·仪器 | 第63页 |
| ·试剂 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64-66页 |
| ·琼胶酶酶解最适温度和热稳定性 | 第64页 |
| ·琼胶酶酶解最适pH和酸碱稳定性 | 第64-65页 |
| ·金属离子与化学试剂对酶反应的影响 | 第65页 |
| ·不同底物浓度对酶反应的影响 | 第65页 |
| ·MALDI-TOF-TOF/MS蛋白质谱测序 | 第65-66页 |
| ·胶内酶解及Ziptip脱盐 | 第65页 |
| ·MALDI-TOF-TOF | 第65-66页 |
| ·数据分析 | 第66页 |
| ·底物特异性 | 第66页 |
| ·琼胶酶水解模式 | 第66页 |
| ·结果分析 | 第66-72页 |
| ·酶的最适反应温度与热稳定性 | 第66-67页 |
| ·酶的最适pH值与酸碱稳定性 | 第67-68页 |
| ·金属离子对琼胶酶酶解效率 | 第68-69页 |
| ·不同底物浓度对酶的影响 | 第69-70页 |
| ·蛋白质质谱分析 | 第70-71页 |
| ·底物特异性 | 第71页 |
| ·琼胶酶水解模式 | 第71-72页 |
| ·讨论 | 第72页 |
| ·小结 | 第72-74页 |
| 第六章 琼胶酶aga-fst酶解产物的鉴定及生物活性的初步研究 | 第74-82页 |
| ·实验材料 | 第74-75页 |
| ·仪器 | 第74-75页 |
| ·试剂材料 | 第75页 |
| ·实验方法 | 第75-77页 |
| ·酶解产物的制备 | 第75页 |
| ·TLC薄层色谱分析 | 第75页 |
| ·LC-MS/MS分析 | 第75-76页 |
| ·琼胶寡糖体外清除DPPH自由基的能力 | 第76-77页 |
| ·实验结果 | 第77-80页 |
| ·TLC薄层色谱分析 | 第77-78页 |
| ·LC-MS/MS分析 | 第78-79页 |
| ·琼胶寡糖体外清除DPPH自由基的能力 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80页 |
| ·小结 | 第80-82页 |
| 第七章 总结与展望 | 第82-84页 |
| ·总结 | 第82页 |
| ·创新点 | 第82页 |
| ·展望 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
