| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-27页 |
| ·代谢组学及其在微生物领域的研究进展 | 第11-16页 |
| ·代谢组学 | 第11-14页 |
| ·代谢组学研究的几个层次 | 第11-12页 |
| ·代谢组学技术平台 | 第12-13页 |
| ·代谢组学解析流程 | 第13页 |
| ·代谢组学的生物分析策略 | 第13-14页 |
| ·代谢组学在微生物研究中的应用 | 第14-16页 |
| ·微生物代谢组学 | 第15页 |
| ·代谢途径研究及发酵过程中细胞生理生化状态测定方面的应用 | 第15-16页 |
| ·代谢组学在微生物代谢工程学中的应用 | 第16页 |
| ·环境微生物研究 | 第16页 |
| ·微生物代谢物的提取 | 第16-18页 |
| ·具有代表性的生物样品的获得 | 第16-17页 |
| ·快速样品制备和淬灭 | 第17页 |
| ·实验设计 | 第17-18页 |
| ·代谢网络定量分析 | 第18-23页 |
| ·代谢控制分析 | 第18-20页 |
| ·基本理论 | 第19-20页 |
| ·应用 | 第20页 |
| ·代谢通量分析 | 第20-23页 |
| ·基本理论 | 第20-21页 |
| ·应用 | 第21-22页 |
| ·代谢平衡分析 | 第22-23页 |
| ·微生物代谢网络数据库 | 第23-24页 |
| ·参考生化数据库 | 第23-24页 |
| ·代谢途径数据库 | 第24页 |
| ·工业微生物技术和应用 | 第24-26页 |
| ·微生物催化合成 | 第25页 |
| ·重要工业微生物的代谢工程 | 第25-26页 |
| ·本论文的研究意义与内容 | 第26-27页 |
| 第二章 不同遗传背景的大肠杆菌代谢通量分析 | 第27-40页 |
| ·前言 | 第27页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·仪器和试剂 | 第27-28页 |
| ·菌株 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-30页 |
| ·样品制备 | 第28页 |
| ·细胞培养条件 | 第28页 |
| ·发酵液制备 | 第28页 |
| ·生长曲线的绘制 | 第28-29页 |
| ·细胞浓度测定 | 第29页 |
| ·残糖测定 | 第29页 |
| ·标准溶液的配制 | 第29页 |
| ·HPLC 条件 | 第29页 |
| ·代谢平衡分析方法 | 第29-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-39页 |
| ·三株大肠杆菌生长曲线及葡萄糖残余浓度曲线 | 第30-31页 |
| ·细胞浓度测定结果 | 第31页 |
| ·大肠杆菌发酵液中有机酸的测定 | 第31-33页 |
| ·有机酸标准品分析 | 第31页 |
| ·有机酸外标工作曲线和线性范围的确定 | 第31-33页 |
| ·发酵不同时间大肠肝菌发酵液中有机酸含量的测定 | 第33页 |
| ·大肠杆菌代谢通量分析 | 第33-39页 |
| ·大肠杆菌代谢反应方程 | 第34页 |
| ·不同遗传背景的大肠杆菌代谢通量比较 | 第34-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第三章 GC-MS 分析细菌胞内代谢物的代谢组学研究方法的建立 | 第40-55页 |
| ·前言 | 第40页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·仪器和试剂 | 第40-41页 |
| ·试验菌株 | 第41页 |
| ·培养基及培养条件 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-45页 |
| ·实验设计 | 第41-44页 |
| ·大肠肝菌快速淬灭有机溶剂选择的实验设计 | 第42-43页 |
| ·气相色谱衍生条件优化的实验设计 | 第43-44页 |
| ·胞内代谢物的提取方法 | 第44页 |
| ·衍生方法 | 第44页 |
| ·标准溶液的配制 | 第44页 |
| ·GC-MS 分析方法 | 第44页 |
| ·数据处理 | 第44-45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-54页 |
| ·微生物淬灭方法的确定 | 第45-46页 |
| ·淬灭方法的选择 | 第45页 |
| ·淬灭所用有机溶剂的确定 | 第45-46页 |
| ·气相衍生条件的确定 | 第46-47页 |
| ·GC-MS 方法学研究大肠杆菌胞内代谢物 | 第47-51页 |
| ·大肠杆菌胞内代谢物GC-MS指纹图谱 | 第47-48页 |
| ·胞内代谢物GC-MS定性定量分析 | 第48-49页 |
| ·胞内代谢物标准品GC-MS定量参数 | 第49-51页 |
| ·六种细菌用于代谢组学研究的GC-MS方法学考察 | 第51-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 第四章 生物催化生成对苯二甲酸微生物协同作用的代谢途径分析 | 第55-64页 |
| ·前言 | 第55页 |
| ·实验材料 | 第55-56页 |
| ·仪器和试剂 | 第55-56页 |
| ·试验菌株 | 第56页 |
| ·培养基 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-58页 |
| ·样品制备 | 第56-57页 |
| ·细胞培养及发酵液制备 | 第57页 |
| ·细胞破碎及胞内代谢物的衍生 | 第57页 |
| ·标准溶液的配制 | 第57页 |
| ·HPLC 检测条件 | 第57页 |
| ·GC-MS 检测条件 | 第57-58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-63页 |
| ·对苯二甲酸等 4 种标准品 HPLC 图谱 | 第58页 |
| ·对苯二甲酸等 4 种标准品 HPLC 定量参数 | 第58-60页 |
| ·发酵液中主要代谢物的 HPLC 分析 | 第60页 |
| ·胞内代谢物的GC-MS检测 | 第60-62页 |
| ·代谢途径分析 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表和撰写的论文 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
