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木质素合成酶C3H基因的克隆及鉴定

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 文献综述第10-22页
   ·前言第10页
   ·木质素的组成第10-11页
   ·木质素的生物合成途径第11-16页
     ·苯丙烷代谢途径第11-14页
     ·木质素生物合成的特异途径第14-16页
   ·木质素基因工程研究现状第16-17页
     ·苯丙烷途径的上游调控及其对植物生长发育的影响第16页
     ·木质素组成的调控及其对植物生长发育的影响第16-17页
     ·木质素特异合成途径的调控及其对木质素含量的影响第17页
   ·木质素在工农业生产中的应用第17-18页
     ·木质素基因工程对造纸制浆的影响第17-18页
     ·木质素基因工程在提高饲料消化率方面应用第18页
     ·木质素在肥料缓释以及改良土壤方面的应用第18页
   ·木质素合成酶 C3H 的研究进展第18-20页
     ·C3H 的研究进展第18-19页
     ·苯丙烷苯环 C3羟基化途径的修订第19-20页
   ·本题的目的及其研究意义第20页
   ·实验方案第20-22页
第二章 107 杨基因组 DNA 的提取及 c3h 基因扩增引物筛选第22-29页
   ·材料和试剂第22-23页
     ·材料第22页
     ·试剂第22-23页
     ·试剂的配制第23页
     ·主要仪器第23页
   ·实验方法第23-25页
     ·107 杨树基因组 DNA 的提取第23-24页
     ·1%琼脂糖凝胶的制作第24页
     ·1%琼脂糖凝胶电泳第24页
     ·特异引物的设计第24-25页
     ·杨树 DNA 的 PCR 的扩增第25页
   ·结果与分析第25-26页
   ·讨论第26-29页
第三章 107 杨树次生木质部 c3h 基因的 RT-PCR 扩增及鉴定第29-37页
   ·材料和试剂第29-30页
     ·实验材料第29页
     ·主要试剂及试剂盒第29页
     ·主要仪器第29-30页
   ·实验方法与步骤第30-32页
     ·欧美杨 107 号杨树次生木质部总 RNA 的提取第30页
       ·实验材料的处理第30页
       ·实验方法第30页
     ·目的基因的 RT-PCR 扩增第30-31页
       ·反转录 cDNA 第一条链第31页
       ·PCR 反应第31页
     ·目的片段的回收第31-32页
   ·结果与分析第32-34页
     ·总 RNA 的提取结果第32-33页
     ·目的片段的 RT-PCR 扩增结果第33页
     ·目的片段的回收结果第33-34页
   ·讨论第34-37页
     ·总 RNA 的提取第34-35页
     ·目的片段的 RT-PCR 扩增第35-36页
     ·目的片段的回收第36-37页
第四章 重组质粒的转化与鉴定第37-53页
   ·材料第37-38页
     ·菌种与载体第37页
     ·酶及化学试剂第37页
     ·试剂盒第37页
     ·主要仪器第37-38页
   ·实验方法第38-43页
     ·培养基的制备第38-39页
       ·LB 液体培养基制备第38页
       ·LB 固体培养基制备第38页
       ·LB/Amp 平板培养基第38-39页
       ·转化用 LB/Amp/X-gal/IPTG 平板培养基第39页
     ·目的片段与 pMD20-T 载体的连接第39页
     ·大肠杆菌 JM109 感受态细胞的制备(CaCl2法)第39-40页
     ·重组质粒的转化第40页
     ·重组质粒的菌落 PCR 鉴定第40-41页
     ·重组质粒的提取第41-42页
     ·重组质粒的扩增鉴定第42页
     ·重组质粒的酶切鉴定第42页
     ·重组质粒的测序鉴定分析第42-43页
   ·结果与分析第43-51页
     ·重组质粒的转化第43页
     ·菌落 PCR 筛选第43-44页
     ·重组质粒的扩增鉴定第44-46页
     ·重组质粒的酶切鉴定第46-47页
     ·重组质粒的测序第47-48页
     ·扩增的 c3h 基因目的片段与模板序列的比对第48-51页
   ·讨论第51-53页
     ·DNA 片段的连接以及重组质粒的转化第51-52页
     ·重组质粒的提取第52页
     ·重组质粒的 PCR 扩增鉴定第52-53页
第五章 C3H 的生物信息学分析第53-65页
   ·前言第53页
   ·材料第53-54页
   ·方法第54页
   ·结果与分析第54-64页
     ·核苷酸序列、氨基酸序列的组成成分及理化性质分析第54-56页
     ·导肽的预测和分析第56页
     ·跨膜结构域的预测和分析第56-58页
     ·疏水性/亲水性的预测和分析第58-59页
     ·二级结构的预测和分析第59-60页
     ·功能域及三级结构预测和分析第60-61页
     ·欧美杨 107 的 C3H 的遗传进化分析第61-64页
   ·讨论第64-65页
第六章 结论与展望第65-67页
   ·结论第65-66页
   ·展望第66-67页
参考文献第67-72页
致谢第72-73页
附录第73页

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