| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 生物胺 | 第9-13页 |
| 1.1.1 生物胺产生机理 | 第9-10页 |
| 1.1.2 生物胺的生理作用 | 第10-11页 |
| 1.1.3 生物胺的毒性作用 | 第11页 |
| 1.1.4 黄酒中生物胺的含量范围 | 第11-13页 |
| 1.2 黄酒中生物胺产生菌 | 第13-14页 |
| 1.2.1 黄酒酿造及酒曲中主要生物胺产生菌 | 第13页 |
| 1.2.2 产生物胺细菌的种属研究 | 第13-14页 |
| 1.3 RAPD及种属鉴定技术的发展 | 第14-15页 |
| 1.3.1 RAPD分型及发展应用 | 第14页 |
| 1.3.2 种属鉴定的发展应用 | 第14-15页 |
| 1.4 多重PCR的发展应用 | 第15-16页 |
| 1.4.1 多重PCR的发展 | 第15页 |
| 1.4.2 生物胺产生菌多重PCR的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.5 Real-Time PCR发展应用 | 第16-17页 |
| 1.5.1 Real-Time PCR的发展 | 第16页 |
| 1.5.2 生物胺产生菌的Real-Time PCR研究现状 | 第16-17页 |
| 1.6 本课题的研究意义、目的及内容 | 第17-18页 |
| 1.6.1 研究意义和目的 | 第17页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第17-18页 |
| 1.7 本课题研究的主要技术路线 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 质粒与菌株 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.3 主要的仪器与设备 | 第20-21页 |
| 2.1.4 培养基及各种溶液的配制 | 第21-22页 |
| 2.1.5 RAPD、种属鉴定、多重PCR以及荧光定量PCR引物 | 第22-23页 |
| 2.2 试验方法及步骤 | 第23-33页 |
| 2.2.1 固体脱羧酶培养基初筛 | 第23页 |
| 2.2.2 初筛菌株的确定 | 第23页 |
| 2.2.3 样品基因组的制备 | 第23-24页 |
| 2.2.4 组胺和腐胺筛选菌株的鉴定 | 第24-26页 |
| 2.2.5 菌株酒精耐受度分析 | 第26页 |
| 2.2.6 多重PCR方法的建立 | 第26-29页 |
| 2.2.7 Real-Time PCR方法的建立 | 第29-33页 |
| 3 结果和讨论 | 第33-59页 |
| 3.1 生物胺产生菌的初筛 | 第33页 |
| 3.2 初筛菌株的确认 | 第33-38页 |
| 3.3 产组胺和腐胺细菌的分型 | 第38-39页 |
| 3.4 组胺和腐胺产生菌的鉴定 | 第39-43页 |
| 3.5 菌株酒精耐受结果 | 第43-44页 |
| 3.6 多重PCR方法的建立 | 第44-48页 |
| 3.6.1 单一PCR检测 | 第44页 |
| 3.6.2 多重PCR优化 | 第44-45页 |
| 3.6.3 多重PCR特异性检验 | 第45页 |
| 3.6.4 多重PCR灵敏度检验 | 第45-46页 |
| 3.6.5 多重PCR方法的检测应用 | 第46-48页 |
| 3.7 Real-Time PCR检测方法的建立 | 第48-59页 |
| 3.7.1 标准品的制备 | 第48-51页 |
| 3.7.2 方法特异性验证 | 第51-53页 |
| 3.7.3 灵敏度和线性范围 | 第53-56页 |
| 3.7.4 Real-Time PCR方法的应用 | 第56-59页 |
| 4 结论 | 第59-61页 |
| 4.1 全文总结 | 第59页 |
| 4.2 论文创新点 | 第59-60页 |
| 4.3 论文不足之处 | 第60-61页 |
| 5 展望 | 第61-62页 |
| 6 参考文献 | 第62-69页 |
| 7 硕士期间发表论文 | 第69-70页 |
| 8 致谢 | 第70页 |