| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第11-24页 |
| 1.1 甜菊糖概述 | 第11页 |
| 1.2 甜菊糖成分及其甜味特征 | 第11-13页 |
| 1.3 甜菊糖的分离和纯化 | 第13-16页 |
| 1.3.1 甜菊糖的提取与纯化 | 第13-15页 |
| 1.3.2 甜菊糖成分的分离 | 第15-16页 |
| 1.4 甜菊糖的改性 | 第16-21页 |
| 1.4.1 化学改性 | 第16-18页 |
| 1.4.2 酶法改性 | 第18-20页 |
| 1.4.2.1 CGTase法 | 第18-19页 |
| 1.4.2.2 葡萄糖苷酶法 | 第19-20页 |
| 1.4.2.3 半乳糖苷酶法 | 第20页 |
| 1.4.2.4 呋喃果糖苷酶法 | 第20页 |
| 1.4.3 微生物转化法 | 第20-21页 |
| 1.5 甜茶苷的研究概况 | 第21-23页 |
| 1.5.1 研究概述 | 第21页 |
| 1.5.2 甜茶苷的功能 | 第21-22页 |
| 1.5.3 甜茶苷的制备 | 第22-23页 |
| 1.6 立题依据与研究内容 | 第23-24页 |
| 1.6.1 立题依据 | 第23页 |
| 1.6.2 主要研究内容 | 第23-24页 |
| 第二章 产CGTase菌株的筛选及对甜菊糖的改性 | 第24-33页 |
| 2.1 材料与设备 | 第24-25页 |
| 2.1.1 土壤采集 | 第24页 |
| 2.1.2 培养基 | 第24页 |
| 2.1.3 试剂与材料 | 第24-25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-27页 |
| 2.2.1 目的菌株的筛选 | 第25页 |
| 2.2.2 酶液的制备 | 第25页 |
| 2.2.3 酶液对甜菊糖和RA的改性 | 第25页 |
| 2.2.4 甜菊糖的检测 | 第25页 |
| 2.2.5 产物分析 | 第25页 |
| 2.2.6 产物定量分析 | 第25-26页 |
| 2.2.7 菌株形态观察与生理生化鉴定 | 第26页 |
| 2.2.8 16SrDNA序列鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-31页 |
| 2.3.1 产CGTase微生物的筛选 | 第27页 |
| 2.3.2 不同CGTase对甜菊糖的改性 | 第27-28页 |
| 2.3.3 CGTase对RA的转化 | 第28-29页 |
| 2.3.4 改性产物的液质联用分析 | 第29页 |
| 2.3.5 CGT7菌株的生理生化特性 | 第29-30页 |
| 2.3.5.1 CGT7菌的形态及生理特性鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.5.2 CGT7菌的pH适应性 | 第30页 |
| 2.3.6 CGT7菌的分子生物学鉴定 | 第30-31页 |
| 2.4 本章小结 | 第31-33页 |
| 第三章 CGT7菌产酶条件优化与对甜菊苷转化条件研究 | 第33-42页 |
| 3.1 材料与设备 | 第33页 |
| 3.1.1 菌种 | 第33页 |
| 3.1.2 培养基 | 第33页 |
| 3.1.3 试剂与材料 | 第33页 |
| 3.2 试验方法 | 第33-35页 |
| 3.2.1 CGT7菌的生长和产酶曲线 | 第33-34页 |
| 3.2.2 酶活力的测定 | 第34页 |
| 3.2.3 CGT7菌产酶条件研究 | 第34页 |
| 3.2.4 CGT7菌酶液对甜菊糖的改性 | 第34页 |
| 3.2.5 甜菊糖的分析 | 第34-35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35-41页 |
| 3.3.1 CGT7菌的生长和产酶曲线 | 第35页 |
| 3.3.2 培养基成分和发酵条件优化 | 第35-38页 |
| 3.3.2.1 碳源对产酶的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.2.2 氮源对产酶的影响 | 第36页 |
| 3.3.2.3 温度对产酶的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.2.4 初始pH对产酶的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.3 CGT7菌酶液转化甜菊苷随时间的变化 | 第38页 |
| 3.3.4 糖基供体对甜菊苷转化的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.5 温度对甜菊苷转化的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.6 pH对甜菊苷转化的影响 | 第40页 |
| 3.3.7 底物比对甜菊苷转化的影响 | 第40-41页 |
| 3.4 本章小结 | 第41-42页 |
| 第四章 CGT7菌对甜菊糖改性方法的研究 | 第42-52页 |
| 4.1 材料与设备 | 第42页 |
| 4.1.1 菌种 | 第42页 |
| 4.1.2 培养基 | 第42页 |
| 4.1.3 试剂与材料 | 第42页 |
| 4.2 试验方法 | 第42-43页 |
| 4.2.1 甜菊叶浸提液的制备 | 第42页 |
| 4.2.2 酶液的制备 | 第42-43页 |
| 4.2.3 酶液对甜菊叶浸提液的转化 | 第43页 |
| 4.2.4 CGT7菌直接发酵对甜菊糖的改性 | 第43页 |
| 4.2.5 甜菊糖的分析 | 第43页 |
| 4.3 结果与分析 | 第43-51页 |
| 4.3.1 酶液对甜叶菊浸提液的转化 | 第43-44页 |
| 4.3.2 酶液转化浸提液中Stv与产物的变化 | 第44页 |
| 4.3.3 温度对浸提液中Stv转化的影响 | 第44-45页 |
| 4.3.4 淀粉含量对浸提液中Stv转化的影响 | 第45-46页 |
| 4.3.5 pH对浸提液中Stv转化的影响 | 第46页 |
| 4.3.6 酶液与浸提液比对体液中Stv转化的影响 | 第46-47页 |
| 4.3.7 CGT7菌直接发酵对甜菊糖成分的转化 | 第47-48页 |
| 4.3.8 CGT7菌直接发酵对甜菊糖中Stv的转化 | 第48页 |
| 4.3.9 碳源对发酵液中Stv转化的影响 | 第48-50页 |
| 4.3.10 培养温度对发酵液中Stv转化的影响 | 第50-51页 |
| 4.4 本章小结 | 第51-52页 |
| 第五章 CGTase的分离纯化及酶学性质的研究 | 第52-60页 |
| 5.1 材料与设备 | 第52页 |
| 5.1.1 菌种 | 第52页 |
| 5.1.2 培养基 | 第52页 |
| 5.1.3 试剂与材料 | 第52页 |
| 5.2 试验方法 | 第52-55页 |
| 5.2.1 CGTase酶活力的测定 | 第52-53页 |
| 5.2.2 酶液的制备 | 第53页 |
| 5.2.3 硫酸铵分级沉淀 | 第53页 |
| 5.2.4 透析与浓缩 | 第53页 |
| 5.2.5 DEAE SepharoseTM离子交换层析 | 第53页 |
| 5.2.6 Sephadex G-75过滤层析 | 第53-54页 |
| 5.2.7 电泳 | 第54页 |
| 5.2.8 CGTase部分酶学性质 | 第54-55页 |
| 5.2.8.1 CGTase分子量的测定 | 第54页 |
| 5.2.8.2 CGTase最适作用pH | 第54页 |
| 5.2.8.3 CGTase pH值稳定性 | 第54页 |
| 5.2.8.4 CGTase最适作用温度 | 第54页 |
| 5.2.8.5 CGTase热稳定性 | 第54-55页 |
| 5.3 结果与分析 | 第55-59页 |
| 5.3.1 CGTase的分离纯化 | 第55-57页 |
| 5.3.1.1 (NH_4)_2SO_4盐析 | 第55页 |
| 5.3.1.2 DEAE SepharoseTM离子交换层析 | 第55-56页 |
| 5.3.1.3 Sephadex G-75凝胶过滤层析 | 第56页 |
| 5.3.1.4 CGTase分离纯度及分子量的电泳鉴定 | 第56-57页 |
| 5.3.2 CGTase部分酶学性质研究 | 第57-59页 |
| 5.3.2.1 分子量的测定 | 第57页 |
| 5.3.2.2 CGTase最适作用pH | 第57-58页 |
| 5.2.2.3 CGTase pH值稳定性 | 第58页 |
| 5.2.2.4 CGTase最适作用温度 | 第58-59页 |
| 5.2.2.5 CGTase热稳定性 | 第59页 |
| 5.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 第六章 镰孢霉(Fusarium sp.)对甜菊苷的转化 | 第60-76页 |
| 6.1 材料与设备 | 第60-61页 |
| 6.1.1 菌株 | 第60-61页 |
| 6.1.2 培养基 | 第61页 |
| 6.1.3 主要试剂与材料 | 第61页 |
| 6.2 试验方法 | 第61-63页 |
| 6.2.1 转化方法 | 第61页 |
| 6.2.2 甜菊糖的检测 | 第61页 |
| 6.2.3 菌体量的测定 | 第61页 |
| 6.2.4 转化产物的LC-MS分析 | 第61-62页 |
| 6.2.5 半乳糖苷酶酶活测定 | 第62页 |
| 6.2.6 大孔树脂与聚酰胺柱分离纯化RS | 第62-63页 |
| 6.2.7 计算方法 | 第63页 |
| 6.3 结果与分析 | 第63-75页 |
| 6.3.1 水解Stv菌株的筛选 | 第63-64页 |
| 6.3.2 镰孢霉对甜菊糖成分的转化 | 第64页 |
| 6.3.3 新产物的定性分析 | 第64-65页 |
| 6.3.4 镰孢霉对甜菊糖的转化特性 | 第65-66页 |
| 6.3.5 碳源对甜菊糖中甜菊苷转化的影响 | 第66-67页 |
| 6.3.6 低聚半乳糖浓度对甜菊苷转化的影响 | 第67-68页 |
| 6.3.7 低聚半乳糖促进Stv转化的机理 | 第68-72页 |
| 6.3.7.1 静息细胞、胞外液与胞内液对Stv的转化 | 第68-69页 |
| 6.3.7.2 二糖与低聚半乳糖对甜菊苷转化的影响 | 第69-70页 |
| 6.3.7.3 不同诱导物对Stv转化的影响 | 第70页 |
| 6.3.7.4 转化液中半乳糖苷酶酶活的测定 | 第70-71页 |
| 6.3.7.5 葡萄糖浓度对Stv转化的影响 | 第71-72页 |
| 6.3.8 甜菊糖浓度对Stv转化的影响 | 第72-73页 |
| 6.3.9 聚酰胺与大孔树脂对RS的静态吸附 | 第73页 |
| 6.3.10 大孔树脂D302分离发酵液中RS | 第73-74页 |
| 6.3.11 聚酰胺分离发酵液中RS | 第74-75页 |
| 6.4 本章小结 | 第75-76页 |
| 第七章 结论与展望 | 第76-77页 |
| 7.1 结论 | 第76页 |
| 7.2 展望 | 第76-77页 |
| 附录 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 论文及专利 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
