| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第17-38页 |
| 1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 1.2 凝集素学的研究进展 | 第19-28页 |
| 1.2.1 凝集素的定义和分类 | 第19-20页 |
| 1.2.2 凝集素的分布 | 第20-21页 |
| 1.2.3 凝集素的结构及理化性质 | 第21-23页 |
| 1.2.4 凝集素的生物功能特性 | 第23-25页 |
| 1.2.5 凝集素的应用 | 第25-28页 |
| 1.3 芸豆凝集素的研究进展 | 第28-36页 |
| 1.3.1 芸豆凝集素的分离纯化 | 第28-31页 |
| 1.3.2 芸豆凝集素的蛋白结构研究 | 第31-33页 |
| 1.3.3 芸豆凝集素的理化性质研究 | 第33-34页 |
| 1.3.4 芸豆凝集素的生物安全性和活性研究 | 第34-36页 |
| 1.4 本论文的主要研究内容 | 第36-38页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第38-59页 |
| 2.1 实验材料和设备 | 第38-40页 |
| 2.1.1 主要原料 | 第38页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第39-40页 |
| 2.2 测定方法 | 第40-48页 |
| 2.2.1 蛋白质浓度测定 | 第40页 |
| 2.2.2 凝血活性测定 | 第40-42页 |
| 2.2.3 反胶束水分含量的测定 | 第42页 |
| 2.2.4 凝胶电泳分析 | 第42页 |
| 2.2.5 反向高效液相色谱分析 | 第42-43页 |
| 2.2.6 傅立叶变换红外光谱分析 | 第43页 |
| 2.2.7 圆二色光谱分析 | 第43页 |
| 2.2.8 串联质谱分析 | 第43-44页 |
| 2.2.9 高效凝胶排阻色谱分析 | 第44页 |
| 2.2.10 全柱成像等电聚焦毛细管电泳仪分析 | 第44页 |
| 2.2.11 荧光光谱分析 | 第44页 |
| 2.2.12 紫外光谱分析 | 第44页 |
| 2.2.13 差示扫描量热分析 | 第44-45页 |
| 2.2.14 主动全身过敏实验 | 第45页 |
| 2.2.15 被动皮肤过敏实验 | 第45页 |
| 2.2.16 大鼠免疫血清中Ig E抗体的测定 | 第45-46页 |
| 2.2.17 大鼠免疫血浆中组胺的测定 | 第46页 |
| 2.2.18 大鼠免疫血清中细胞因子的测定 | 第46-47页 |
| 2.2.19 MTT细胞增殖及细胞毒性测定 | 第47页 |
| 2.2.20 细胞形态学观察 | 第47页 |
| 2.2.21 细胞的凋亡与坏死测定 | 第47-48页 |
| 2.2.22 细胞周期的测定 | 第48页 |
| 2.3 论文前期研究进展及研究对象选择 | 第48-49页 |
| 2.4 反胶束分离纯化黑芸豆凝集素的实验 | 第49-52页 |
| 2.4.1 芸豆水溶性蛋白的提取工艺实验 | 第49页 |
| 2.4.2 黑芸豆凝集素的反胶束萃取实验 | 第49-51页 |
| 2.4.3 反胶束萃取对黑芸豆凝集素蛋白结构影响的实验 | 第51-52页 |
| 2.5 黑芸豆凝集素的蛋白鉴定及生物信息学分析实验 | 第52-54页 |
| 2.5.1 黑芸豆凝集素蛋白的鉴定及基因克隆 | 第52-53页 |
| 2.5.2 黑芸豆凝集素的蛋白序列分析 | 第53页 |
| 2.5.3 黑芸豆凝集素蛋白的生物信息学分析 | 第53-54页 |
| 2.6 黑芸豆凝集素的性质与结构关系研究实验 | 第54-56页 |
| 2.6.1 黑芸豆凝集素的基本物理特性 | 第54页 |
| 2.6.2 黑芸豆凝集素的亲和特性研究实验 | 第54-55页 |
| 2.6.3 黑芸豆凝集素的热失活与蛋白构象之间的关系实验 | 第55页 |
| 2.6.4 黑芸豆凝集素酸碱稳定性与蛋白构象之间的关系实验 | 第55-56页 |
| 2.7 黑芸豆凝集素的生物安全性和抑制Hela细胞增殖作用实验 | 第56-58页 |
| 2.7.1 黑芸豆凝集素的体外消化实验 | 第56页 |
| 2.7.2 黑芸豆凝集素的免疫致敏性研究实验 | 第56-57页 |
| 2.7.3 黑芸豆凝集素抗人宫颈癌细胞活性的初步研究实验 | 第57-58页 |
| 2.8 数据处理 | 第58-59页 |
| 第3章 反胶束分离纯化黑芸豆凝集素的研究 | 第59-94页 |
| 3.1 引言 | 第59-60页 |
| 3.2 芸豆水溶性蛋白的提取工艺研究 | 第60-65页 |
| 3.2.1 芸豆粉碎方式的确定 | 第60-62页 |
| 3.2.2 浸提溶剂的选择 | 第62-63页 |
| 3.2.3 料液比的确定 | 第63-64页 |
| 3.2.4 浸提时间的确定 | 第64-65页 |
| 3.3 黑芸豆凝集素的前萃取工艺参数研究 | 第65-73页 |
| 3.3.1 前萃取水分含量的确定 | 第66-68页 |
| 3.3.2 前萃取离子强度的确定 | 第68-69页 |
| 3.3.3 前萃取p H值的确定 | 第69-71页 |
| 3.3.4 前萃取表面活性剂浓度的确定 | 第71-72页 |
| 3.3.5 前萃取时间的确定 | 第72-73页 |
| 3.4 黑芸豆凝集素的后萃取工艺参数研究 | 第73-78页 |
| 3.4.1 后萃取p H值的确定 | 第73-74页 |
| 3.4.2 后萃取离子强度的确定 | 第74-76页 |
| 3.4.3 反胶束萃取黑芸豆凝集素的得率和纯度 | 第76-78页 |
| 3.5 反胶束萃取黑芸豆凝集素的优化设计 | 第78-86页 |
| 3.5.1 反胶束萃取的响应面实验设计及模型拟合 | 第78-81页 |
| 3.5.2 反胶束萃取各因素的交互作用影响 | 第81-84页 |
| 3.5.3 反胶束萃取的最佳参数及验证 | 第84-86页 |
| 3.6 反胶束萃取对黑芸豆凝集素蛋白结构的影响 | 第86-92页 |
| 3.6.1 黑芸豆凝集素蛋白的进一步纯化 | 第86-89页 |
| 3.6.2 黑芸豆凝集素蛋白的二级结构分析 | 第89-92页 |
| 3.7 本章小结 | 第92-94页 |
| 第4章 黑芸豆凝集素的蛋白鉴定及生物信息学分析 | 第94-123页 |
| 4.1 引言 | 第94-95页 |
| 4.2 黑芸豆凝集素蛋白的鉴定及基因克隆 | 第95-100页 |
| 4.2.1 电喷雾四极杆飞行时间串联质谱法鉴定凝集素蛋白 | 第95-98页 |
| 4.2.2 黑芸豆凝集素的基因克隆 | 第98-100页 |
| 4.3 黑芸豆凝集素的蛋白序列分析 | 第100-103页 |
| 4.3.1 黑芸豆凝集素蛋白序列的同源性分析 | 第100-102页 |
| 4.3.2 黑芸豆凝集素蛋白序列的进化分析 | 第102-103页 |
| 4.4 黑芸豆凝集素蛋白的生物信息学分析 | 第103-122页 |
| 4.4.1 黑芸豆凝集素蛋白的基本性质分析 | 第103-110页 |
| 4.4.2 黑芸豆凝集素蛋白的结构域分析 | 第110-112页 |
| 4.4.3 黑芸豆凝集素蛋白的空间结构预测 | 第112-119页 |
| 4.4.4 黑芸豆凝集素蛋白的抗原表位预测 | 第119-122页 |
| 4.5 本章小结 | 第122-123页 |
| 第5章 黑芸豆凝集素蛋白的构效关系研究 | 第123-152页 |
| 5.1 引言 | 第123-124页 |
| 5.2 黑芸豆凝集素的基本物理特性 | 第124-129页 |
| 5.2.1 黑芸豆凝集素的蛋白分子量 | 第124-127页 |
| 5.2.2 黑芸豆凝集素的蛋白等电点 | 第127-129页 |
| 5.3 黑芸豆凝集素的亲和特性研究 | 第129-135页 |
| 5.3.1 黑芸豆凝集素的糖专一性及糖蛋白功能性分析 | 第129-134页 |
| 5.3.2 黑芸豆凝集素的金属离子依赖性及蛋白构象分析 | 第134-135页 |
| 5.4 黑芸豆凝集素的热失活与蛋白构象之间的关系 | 第135-142页 |
| 5.4.1 热处理对黑芸豆凝集素活性及结构的影响 | 第136-139页 |
| 5.4.2 黑芸豆凝集素热失活动力学分析 | 第139-142页 |
| 5.5 黑芸豆凝集素酸碱稳定性与蛋白构象之间的关系 | 第142-150页 |
| 5.5.1 紫外光谱分析 | 第142-144页 |
| 5.5.2 荧光光谱分析 | 第144-148页 |
| 5.5.3 DSC分析 | 第148-150页 |
| 5.6 本章小结 | 第150-152页 |
| 第6章 黑芸豆凝集素的生物安全性和抑制Hela细胞增殖作用 | 第152-178页 |
| 6.1 引言 | 第152-153页 |
| 6.2 黑芸豆凝集素的体外消化性 | 第153-161页 |
| 6.2.1 黑芸豆凝集素的体外消化稳定性 | 第154-156页 |
| 6.2.2 热处理黑芸豆凝集素的体外消化稳定性 | 第156-158页 |
| 6.2.3 去离子化黑芸豆凝集素的体外消化稳定性 | 第158-161页 |
| 6.3 黑芸豆凝集素的致敏性 | 第161-169页 |
| 6.3.1 黑芸豆凝集素对模拟肠道上皮细胞的毒性 | 第161-163页 |
| 6.3.2 过敏模型建立及主动全身过敏症状 | 第163-164页 |
| 6.3.3 被动皮肤过敏实验 | 第164-166页 |
| 6.3.4 大鼠血清中的Ig E抗体水平 | 第166-167页 |
| 6.3.5 大鼠血浆中的组胺水平 | 第167-168页 |
| 6.3.6 黑芸豆凝集素对细胞因子水平的影响 | 第168-169页 |
| 6.4 黑芸豆凝集素抗人宫颈癌细胞活性的初步研究 | 第169-176页 |
| 6.4.1 黑芸豆凝集素对Hela细胞的体外增殖抑制作用 | 第169-171页 |
| 6.4.2 黑芸豆凝集素对Hela细胞形态学的影响 | 第171-172页 |
| 6.4.3 黑芸豆凝集素诱导Hela细胞的凋亡/坏死作用 | 第172-174页 |
| 6.4.4 黑芸豆凝集素对Hela细胞周期的影响 | 第174-176页 |
| 6.5 本章小结 | 第176-178页 |
| 结论 | 第178-180页 |
| 创新点 | 第180页 |
| 展望 | 第180-181页 |
| 参考文献 | 第181-200页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文及其它成果 | 第200-203页 |
| 致谢 | 第203-204页 |
| 个人简历 | 第204页 |
