利用多重PCR和荧光定量PCR对羊肉进行定性定量鉴定方法的建立
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 引言 | 第8-17页 |
| 1.1 宏观形态学鉴定 | 第8页 |
| 1.2 利用蛋白质进行鉴别的方法 | 第8-10页 |
| 1.2.1 酶联免疫法 | 第8-9页 |
| 1.2.2 电泳法 | 第9-10页 |
| 1.2.3 色谱法 | 第10页 |
| 1.3 利用核酸进行鉴别的方法 | 第10-15页 |
| 1.3.1 DNA探针杂交 | 第10-11页 |
| 1.3.2 基于PCR技术的检测方法 | 第11-15页 |
| 1.4 本研究目的意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第17-18页 |
| 2.2.1 试验仪器 | 第17页 |
| 2.2.2 试验试剂及配制方法 | 第17-18页 |
| 2.3 试验方法 | 第18-25页 |
| 2.3.1 材料处理 | 第18-19页 |
| 2.3.2 引物设计合成 | 第19-20页 |
| 2.3.3 反应条件优化 | 第20-22页 |
| 2.3.4 引物特异性分析 | 第22页 |
| 2.3.5 多重PCR体系的建立 | 第22-23页 |
| 2.3.6 荧光定量 PCR 检测方法的建立 | 第23页 |
| 2.3.7 灵敏性检测 | 第23-24页 |
| 2.3.8 山羊、绵羊定性定量检测方法的验证 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-55页 |
| 3.1 基因组DNA的提取 | 第25页 |
| 3.2 引物序列特异性对比结果 | 第25-26页 |
| 3.3 反应条件优化结果 | 第26-33页 |
| 3.3.1 引物最佳浓度优化结果 | 第26-30页 |
| 3.3.2 引物最佳退火温度探索结果 | 第30-33页 |
| 3.4 引物特异性分析结果 | 第33-42页 |
| 3.4.1 引物的物种特异性试验结果 | 第33-36页 |
| 3.4.2 多重PCR引物间干扰分析试验结果 | 第36-41页 |
| 3.4.3 多重PCR模板间干扰分析结果 | 第41-42页 |
| 3.5 多重 PCR 方法的构建 | 第42页 |
| 3.6 荧光定量PCR方法的构建 | 第42-43页 |
| 3.7 灵敏性检测 | 第43-52页 |
| 3.7.1 模板浓度稀释检测 | 第43-47页 |
| 3.7.2 高温高压处理检测 | 第47-50页 |
| 3.7.3 多重PCR方法检测掺杂组织 | 第50-52页 |
| 3.8 山羊、绵羊定性定量检测方法的验证 | 第52-55页 |
| 3.8.1 多重PCR方法的验证 | 第52页 |
| 3.8.2 荧光定量PCR方法的验证 | 第52-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 4.1 关于多重PCR方法的讨论 | 第55-56页 |
| 4.2 关于荧光定量PCR方法的讨论 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
