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海参α-糖苷键水解酶与海参体壁自溶相关性研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
第一章 绪论第12-26页
   ·海参概况第12-13页
     ·海参的种类、分布第12页
     ·海参的生物学特性第12-13页
     ·海参的经济营养价值第13页
   ·水产动物自溶现象研究进展第13-18页
     ·鱼的自溶第13-16页
     ·虾的自溶第16-18页
   ·酶与海参自溶相关性研究进展第18-19页
     ·海参体壁蛋白酶第18-19页
     ·海参体壁多糖水解酶第19页
   ·多糖水解酶研究进展第19-23页
     ·淀粉酶第19-20页
     ·果胶酶第20-21页
     ·木聚糖酶第21-22页
     ·纤维素酶第22页
     ·葡聚糖酶第22页
     ·壳聚糖酶第22-23页
     ·甘露聚糖酶第23页
     ·琼脂糖酶第23页
   ·用于多糖水解酶活力测定的还原糖测定方法第23-25页
     ·DNS法第23页
     ·Somogyi-Nelson法第23-24页
     ·BCA法第24页
     ·铁氰化钾法第24页
     ·PAHBAH法第24页
     ·MBTH法第24-25页
   ·本课题的立题依据与研究意义第25-26页
第二章 还原糖测定方法的建立第26-32页
   ·材料与试剂第26-27页
     ·主要实验材料及试剂第26页
     ·仪器与设备第26-27页
   ·实验方法第27-28页
     ·溶液的配制第27页
     ·DNS法测半乳糖酵酸标准曲线第27页
     ·PAHBAH法测半乳糖磨酸标准曲线第27页
     ·MBTH法测半乳糖酵酸标准曲线第27-28页
     ·检测限与定量限的计算第28页
   ·结果与讨论第28-31页
     ·DNS法测半乳糖醛酸标准曲线第28-29页
     ·PAHBAH法和MBTH法测定还原糖标准曲线第29页
     ·PAHBAH方法的稳定性实验第29-31页
     ·DNS、PAHBAH、MBTH法测半乳糖醛酸的检测限和定量限第31页
   ·小结第31-32页
第三章 海参体壁果胶酶的初步分离纯化与酶学性质研究第32-39页
   ·材料与方法第32页
     ·主要实验材料与试剂第32页
     ·仪器与设备第32页
   ·实验方法第32-34页
     ·试剂配制第32页
     ·粗酶液的制备第32-33页
     ·缓冲液pH对海参体壁中果胶酶浸提的影响第33页
     ·粗酶液中α-糖苷键水解酶的活力比较第33页
     ·pH对海参体壁粗酶中果胶酶活力的影响第33页
     ·温度对酶活力的影响第33-34页
   ·结果与讨论第34-38页
     ·缓冲液pH对海参体壁中果胶酶浸提的影响第34页
     ·粗酶液中的α-糖苷键水解酶第34-35页
     ·pH对粗酶中果胶酶活力的影响第35-36页
     ·温度对粗酶中果胶酶活力的影响第36-38页
   ·小结第38-39页
第四章 海参体壁果胶酶的分离纯化方法优化第39-58页
   ·材料与试剂第39页
     ·主要实验材料与试剂第39页
     ·仪器与设备第39页
   ·实验方法第39-42页
     ·试剂配制第39-40页
     ·粗酶液的制备第40页
     ·粗酶液等电点测定第40页
     ·蛋白质含量测定第40-41页
     ·酶活力测定第41页
     ·离子交换层析第41页
     ·凝胶层析第41页
     ·电泳第41-42页
   ·结果与讨论第42-56页
     ·海参体壁粗酶液的等电点第42页
     ·海参体壁果胶酶离子交换层析(DEAE-52)第42-45页
     ·海参体壁果胶酶离子交换层析(Q-Fast Flow)第45-47页
     ·Q-Fast Flow与DEAE-52的比较第47页
     ·海参体壁果胶酶凝胶层析第47-54页
       ·待分离蛋白浓度对S-300凝胶层析出峰的影响第47-49页
       ·对0.3M NaCl离子交换洗脱蛋白峰凝胶层析(S-300)及其与S-200的比较第49-52页
       ·0.1M NaCl、0.2M NaCl分步洗脱组分与0.3M NaCl共洗脱组分之比较第52-54页
     ·离子交换层析流动相pH对洗脱组分酶组分的影响第54-56页
   ·小结第56-58页
第五章 海参体壁果胶酶离子峰组分的酶学性质研究第58-69页
   ·材料与试剂第58-59页
     ·实验材料与试剂第58页
     ·仪器与设备第58-59页
   ·实验方法第59-60页
     ·试剂配制第59页
     ·粗酶液的制备第59页
     ·蛋白质含量测定第59页
     ·酶活力测定第59页
     ·离子交换层析第59页
     ·pH对离子峰1和2组分中果胶酶活力的影响第59页
     ·温度对离子峰1和2组分中果胶酶活力的影响第59页
     ·组分离子峰1和2中的多糖水解酶活力第59-60页
     ·金属离子对离子峰1和2中组分中果胶酶活力的影响第60页
   ·结果与讨论第60-68页
     ·pH对离子峰1和离子峰2果胶酶活力的影响第60-62页
     ·温度对离子峰1和离子峰2果胶酶活力的影响第62-66页
     ·金属离子对组分离子峰1和离子峰2中果胶酶活力的影响第66-67页
     ·组分离子峰1和离子峰2中多糖水解酶的活力第67-68页
   ·小结第68-69页
第六章 海参体壁果胶酶与海参体壁自溶的关系第69-78页
   ·材料与试剂第69页
     ·实验材料与试剂第69页
     ·仪器与设备第69页
   ·实验方法第69-71页
     ·试剂配制第69-70页
     ·底物的制备第70页
     ·酪蛋白溶液的配制第70页
     ·蛋白酶活力测定第70页
     ·多糖水解酶活力测定第70-71页
     ·加热酶的离子交换层析第71页
   ·结果与讨论第71-77页
     ·用离子交换层析验证海参体壁粗酶的带电情况第71-72页
     ·以海参体壁组织为底物测多糖水解酶活力第72-73页
     ·验证加热前后果胶酶活力是否存在第73-74页
     ·验证蛋白酶活力是否存在第74-77页
   ·小结第77-78页
总结第78-79页
本文创新点第79-80页
参考文献第80-85页
致谢第85-86页
攻读学位期间发表的学术论文和申请专利第86-87页

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