摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
第一章 绪论 | 第12-26页 |
·海参概况 | 第12-13页 |
·海参的种类、分布 | 第12页 |
·海参的生物学特性 | 第12-13页 |
·海参的经济营养价值 | 第13页 |
·水产动物自溶现象研究进展 | 第13-18页 |
·鱼的自溶 | 第13-16页 |
·虾的自溶 | 第16-18页 |
·酶与海参自溶相关性研究进展 | 第18-19页 |
·海参体壁蛋白酶 | 第18-19页 |
·海参体壁多糖水解酶 | 第19页 |
·多糖水解酶研究进展 | 第19-23页 |
·淀粉酶 | 第19-20页 |
·果胶酶 | 第20-21页 |
·木聚糖酶 | 第21-22页 |
·纤维素酶 | 第22页 |
·葡聚糖酶 | 第22页 |
·壳聚糖酶 | 第22-23页 |
·甘露聚糖酶 | 第23页 |
·琼脂糖酶 | 第23页 |
·用于多糖水解酶活力测定的还原糖测定方法 | 第23-25页 |
·DNS法 | 第23页 |
·Somogyi-Nelson法 | 第23-24页 |
·BCA法 | 第24页 |
·铁氰化钾法 | 第24页 |
·PAHBAH法 | 第24页 |
·MBTH法 | 第24-25页 |
·本课题的立题依据与研究意义 | 第25-26页 |
第二章 还原糖测定方法的建立 | 第26-32页 |
·材料与试剂 | 第26-27页 |
·主要实验材料及试剂 | 第26页 |
·仪器与设备 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-28页 |
·溶液的配制 | 第27页 |
·DNS法测半乳糖酵酸标准曲线 | 第27页 |
·PAHBAH法测半乳糖磨酸标准曲线 | 第27页 |
·MBTH法测半乳糖酵酸标准曲线 | 第27-28页 |
·检测限与定量限的计算 | 第28页 |
·结果与讨论 | 第28-31页 |
·DNS法测半乳糖醛酸标准曲线 | 第28-29页 |
·PAHBAH法和MBTH法测定还原糖标准曲线 | 第29页 |
·PAHBAH方法的稳定性实验 | 第29-31页 |
·DNS、PAHBAH、MBTH法测半乳糖醛酸的检测限和定量限 | 第31页 |
·小结 | 第31-32页 |
第三章 海参体壁果胶酶的初步分离纯化与酶学性质研究 | 第32-39页 |
·材料与方法 | 第32页 |
·主要实验材料与试剂 | 第32页 |
·仪器与设备 | 第32页 |
·实验方法 | 第32-34页 |
·试剂配制 | 第32页 |
·粗酶液的制备 | 第32-33页 |
·缓冲液pH对海参体壁中果胶酶浸提的影响 | 第33页 |
·粗酶液中α-糖苷键水解酶的活力比较 | 第33页 |
·pH对海参体壁粗酶中果胶酶活力的影响 | 第33页 |
·温度对酶活力的影响 | 第33-34页 |
·结果与讨论 | 第34-38页 |
·缓冲液pH对海参体壁中果胶酶浸提的影响 | 第34页 |
·粗酶液中的α-糖苷键水解酶 | 第34-35页 |
·pH对粗酶中果胶酶活力的影响 | 第35-36页 |
·温度对粗酶中果胶酶活力的影响 | 第36-38页 |
·小结 | 第38-39页 |
第四章 海参体壁果胶酶的分离纯化方法优化 | 第39-58页 |
·材料与试剂 | 第39页 |
·主要实验材料与试剂 | 第39页 |
·仪器与设备 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-42页 |
·试剂配制 | 第39-40页 |
·粗酶液的制备 | 第40页 |
·粗酶液等电点测定 | 第40页 |
·蛋白质含量测定 | 第40-41页 |
·酶活力测定 | 第41页 |
·离子交换层析 | 第41页 |
·凝胶层析 | 第41页 |
·电泳 | 第41-42页 |
·结果与讨论 | 第42-56页 |
·海参体壁粗酶液的等电点 | 第42页 |
·海参体壁果胶酶离子交换层析(DEAE-52) | 第42-45页 |
·海参体壁果胶酶离子交换层析(Q-Fast Flow) | 第45-47页 |
·Q-Fast Flow与DEAE-52的比较 | 第47页 |
·海参体壁果胶酶凝胶层析 | 第47-54页 |
·待分离蛋白浓度对S-300凝胶层析出峰的影响 | 第47-49页 |
·对0.3M NaCl离子交换洗脱蛋白峰凝胶层析(S-300)及其与S-200的比较 | 第49-52页 |
·0.1M NaCl、0.2M NaCl分步洗脱组分与0.3M NaCl共洗脱组分之比较 | 第52-54页 |
·离子交换层析流动相pH对洗脱组分酶组分的影响 | 第54-56页 |
·小结 | 第56-58页 |
第五章 海参体壁果胶酶离子峰组分的酶学性质研究 | 第58-69页 |
·材料与试剂 | 第58-59页 |
·实验材料与试剂 | 第58页 |
·仪器与设备 | 第58-59页 |
·实验方法 | 第59-60页 |
·试剂配制 | 第59页 |
·粗酶液的制备 | 第59页 |
·蛋白质含量测定 | 第59页 |
·酶活力测定 | 第59页 |
·离子交换层析 | 第59页 |
·pH对离子峰1和2组分中果胶酶活力的影响 | 第59页 |
·温度对离子峰1和2组分中果胶酶活力的影响 | 第59页 |
·组分离子峰1和2中的多糖水解酶活力 | 第59-60页 |
·金属离子对离子峰1和2中组分中果胶酶活力的影响 | 第60页 |
·结果与讨论 | 第60-68页 |
·pH对离子峰1和离子峰2果胶酶活力的影响 | 第60-62页 |
·温度对离子峰1和离子峰2果胶酶活力的影响 | 第62-66页 |
·金属离子对组分离子峰1和离子峰2中果胶酶活力的影响 | 第66-67页 |
·组分离子峰1和离子峰2中多糖水解酶的活力 | 第67-68页 |
·小结 | 第68-69页 |
第六章 海参体壁果胶酶与海参体壁自溶的关系 | 第69-78页 |
·材料与试剂 | 第69页 |
·实验材料与试剂 | 第69页 |
·仪器与设备 | 第69页 |
·实验方法 | 第69-71页 |
·试剂配制 | 第69-70页 |
·底物的制备 | 第70页 |
·酪蛋白溶液的配制 | 第70页 |
·蛋白酶活力测定 | 第70页 |
·多糖水解酶活力测定 | 第70-71页 |
·加热酶的离子交换层析 | 第71页 |
·结果与讨论 | 第71-77页 |
·用离子交换层析验证海参体壁粗酶的带电情况 | 第71-72页 |
·以海参体壁组织为底物测多糖水解酶活力 | 第72-73页 |
·验证加热前后果胶酶活力是否存在 | 第73-74页 |
·验证蛋白酶活力是否存在 | 第74-77页 |
·小结 | 第77-78页 |
总结 | 第78-79页 |
本文创新点 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
攻读学位期间发表的学术论文和申请专利 | 第86-87页 |