| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 1 引言 | 第12-36页 |
| ·益生菌概述 | 第12-17页 |
| ·益生菌的由来 | 第12页 |
| ·益生菌的特征 | 第12-13页 |
| ·益生菌的种类 | 第13-14页 |
| ·益生菌的功能 | 第14页 |
| ·益生菌的应用 | 第14-17页 |
| ·Lactobacillus casei Zhang 的研究基础 | 第17-20页 |
| ·L. casei Zhang 的来源及理化特性 | 第17-18页 |
| ·L. casei Zhang 的益生特性 | 第18-19页 |
| ·L. casei Zhang 的结构基因组学和功能基因组学的研究 | 第19-20页 |
| ·高密度培养概述 | 第20-27页 |
| ·高密度培养技术的定义和起源 | 第20-21页 |
| ·高密度培养的理论基础 | 第21-23页 |
| ·高密度培养技术研究现状 | 第23-27页 |
| ·乳酸菌高密度培养的特点及国内外研究现状 | 第27-31页 |
| ·乳酸菌高密度培养技术的特点 | 第27页 |
| ·乳酸菌高密度培养国内外研究现状 | 第27-31页 |
| ·实时定量PCR 技术及其在乳酸菌研究领域的应用 | 第31-35页 |
| ·实时定量PCR 技术原理 | 第32页 |
| ·实时定量PCR 定量mRNA 表达的方法 | 第32-34页 |
| ·实时定量PCR 技术在乳酸菌研究中的应用 | 第34-35页 |
| ·课题研究的目的意义和研究内容 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-47页 |
| ·菌株来源 | 第36页 |
| ·菌株的保存与活化 | 第36页 |
| ·增殖培养基的优化 | 第36-38页 |
| ·接种发酵工艺 | 第36-37页 |
| ·培养基碳源和氮源的筛选 | 第37页 |
| ·培养基碳氮量及碳氮比的优化 | 第37页 |
| ·培养基微量元素及增殖因子的优化 | 第37页 |
| ·培养基缓冲体系的优化 | 第37-38页 |
| ·培养基组分构成比例的优化 | 第38页 |
| ·试管培养条件的优化 | 第38页 |
| ·搅拌发酵罐高密度培养的研究 | 第38-39页 |
| ·搅拌发酵罐接种与发酵工艺 | 第38页 |
| ·分批培养条件的优化 | 第38-39页 |
| ·L.casei Zhang 发酵动力学分析 | 第39页 |
| ·低pH 和乳酸对菌体生长抑制的研究 | 第39页 |
| ·低pH 对菌体生长的影响 | 第39页 |
| ·乳酸浓度对菌体生长的影响 | 第39页 |
| ·补料分批培养模式的研究 | 第39-40页 |
| ·高密度培养扩大中试 | 第40页 |
| ·中试发酵设备 | 第40页 |
| ·中试发酵工艺条件 | 第40页 |
| ·发酵过程的各项监控指标及检测方法 | 第40-42页 |
| ·菌体生长情况监控 | 第40-41页 |
| ·菌体代谢监控 | 第41-42页 |
| ·菌体产酸活力 | 第42页 |
| ·水份含量的测定 | 第42页 |
| ·杂菌、致病菌、霉菌的检验 | 第42页 |
| ·高密度培养过程中关键酶基因的荧光定量PCR | 第42-47页 |
| ·发酵条件及样品的采集 | 第42-44页 |
| ·目的基因及管家基因 | 第44-45页 |
| ·引物设计及合成 | 第45页 |
| ·RNA 提取及cDNA 合成 | 第45-46页 |
| ·荧光 PCR | 第46-47页 |
| ·荧光定量PCR 数据处理分析 | 第47页 |
| ·实验数据统计软件及方法 | 第47页 |
| 3 结果与讨论 | 第47-101页 |
| ·增殖培养基优化 | 第47-56页 |
| ·培养基碳源、氮源的优化 | 第48-49页 |
| ·L.casei Zhang 培养基碳氮量及碳氮比的优化 | 第49-50页 |
| ·培养基微量元素的优化 | 第50-51页 |
| ·培养基增殖因子 | 第51页 |
| ·培养基缓冲盐的优化 | 第51-53页 |
| ·正交旋转回归设计对培养基各组份的优化及验证 | 第53-56页 |
| ·试管培养条件优化 | 第56-57页 |
| ·搅拌型发酵罐高密度分批培养 | 第57-63页 |
| ·中和剂的选择 | 第57-58页 |
| ·培养基缓冲盐含量优化 | 第58-59页 |
| ·不同pH 条件对菌体生长的影响 | 第59-60页 |
| ·恒pH 培养条件下培养基葡萄糖浓度的优化 | 第60-61页 |
| ·不同通气条件对菌体生长的影响 | 第61-62页 |
| ·接种量对菌体生长的影响 | 第62-63页 |
| ·L.casei Zhang 发酵动力学分析 | 第63-74页 |
| ·生长动力学模型 | 第64-67页 |
| ·底物消耗动力学 | 第67-70页 |
| ·产酸发酵动力学 | 第70-74页 |
| ·低pH 和乳酸浓度对菌体生长的抑制 | 第74-77页 |
| ·低pH 对菌体生长的影响 | 第74-75页 |
| ·乳酸浓度对菌体生长的影响 | 第75-77页 |
| ·补料分批培养模式的研究 | 第77-78页 |
| ·高密度培养中试工艺的研究 | 第78-82页 |
| ·中试高密度培养工艺条件的确定 | 第78-80页 |
| ·高密度培养终点的确定 | 第80-81页 |
| ·菌体收集和冷冻干燥对菌体得率及产酸活力的影响 | 第81-82页 |
| ·发酵过程中关键酶基因表达变化 | 第82-101页 |
| ·RNA 的数量和质量 | 第82-83页 |
| ·标准曲线和PCR 扩增效率分析 | 第83-84页 |
| ·表达稳定的管家基因的选择 | 第84-88页 |
| ·发酵过程中关键酶基因表达变化分析 | 第88-101页 |
| 4 结论 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-124页 |
| 附录 | 第124-134页 |
| 作者简介 | 第134页 |
