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环境因子介导干腌火腿丝状真菌产赭曲霉毒素A的调控机制

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
名称缩写第14-16页
第1章 引言第16-35页
    1.1 赭曲霉毒素A的特性及食品中的限量标准第16-17页
    1.2 传统肉制品中赭曲霉毒素A的存在与分布第17-24页
        1.2.1 传统肉制品中赭曲霉毒素A的发现第17-22页
        1.2.2 传统肉制品中赭曲霉毒素A产生菌的种类第22-24页
    1.3 赭曲霉毒素A的假定生物合成途径及其类似物第24-28页
    1.4 赭曲霉毒素A生物合成相关基因簇第28-30页
        1.4.1 聚合酮酶和非核糖体多肽合成酶第28-29页
        1.4.2 氯代过氧化物酶和细胞色素P450氧化酶第29-30页
    1.5 环境信号对赭曲霉素A生物合成的调控机制第30-33页
    1.6 本课题的研究意义与主要内容第33-35页
        1.6.1 研究背景与意义第33页
        1.6.2 主要内容第33-34页
        1.6.3 技术路线第34-35页
第2章 干腌火腿成熟过程中真菌毒素的动态变化规律第35-52页
    2.1 前言第35-36页
    2.2 材料与设备第36页
        2.2.1 实验原材料第36页
        2.2.2 试剂与固相萃取柱第36页
        2.2.3 仪器与设备第36页
    2.3 实验方法第36-38页
        2.3.1 样品采集第36-37页
        2.3.2 理化指标检验第37页
        2.3.3 丝状真菌菌落数计数第37页
        2.3.4 真菌毒素检测第37-38页
    2.4 结果与分析第38-50页
        2.4.1 干腌火腿成熟过程中的理化性质及霉菌菌落总数第38-41页
        2.4.2 基于QuEChERS的LC-MS/MS方法学评价第41-46页
        2.4.3 基于LC-MS/MS分析干腌火腿的真菌毒素第46-47页
        2.4.4 干腌火腿理化性质与毒素的相关性分析第47-50页
    2.5 小结第50-52页
第3章 宏基因组学解析干腌火腿真菌群落演替规律及产毒基因功能第52-69页
    3.1 前言第52-53页
    3.2 材料与设备第53页
        3.2.1 实验材料第53页
        3.2.2 试剂盒第53页
        3.2.3 仪器与设备第53页
    3.3 实验方法第53-54页
        3.3.1 干腌火腿真菌基因组提取第53页
        3.3.2 PCR扩增及质量评价第53-54页
        3.3.3 ITS高通量测序第54页
        3.3.4 宏基因组测序第54页
    3.4 结果与分析第54-67页
        3.4.1 基于ITS和宏基因组测序的DNA扩增电泳图第54-56页
        3.4.2 基于时间尺度的真菌群落分布多样性解析第56-57页
        3.4.3 基于时间尺度的真菌群落分布差异性解析第57-58页
        3.4.4 基于时间尺度的优势物种注释第58-60页
        3.4.5 环境因子与真菌群落相关性分析第60-62页
        3.4.6 真菌次级代谢产物合成相关的通路与基因功能注释第62-67页
    3.5 小结第67-69页
第4章 环境因子对干腌火腿产毒真菌生理及代谢的影响第69-95页
    4.1 前言第69-70页
    4.2 材料与设备第70-71页
        4.2.1 实验材料第70页
        4.2.2 化学试剂与培养基第70页
        4.2.3 主要设备第70-71页
    4.3 实验方法第71-73页
        4.3.1 菌株分离与培养第71页
        4.3.2 ELISA产毒定性分析第71页
        4.3.3 HPLC-FLD产毒定量分析第71页
        4.3.4 形态学和分子生物学鉴定菌株第71-72页
        4.3.5 菌株产孢量测定第72页
        4.3.6 环境因子影响菌株产孢与产毒的实验设计第72-73页
    4.4 结果与分析第73-93页
        4.4.1 丝状真菌的分离与培养第73-74页
        4.4.2 产毒丝状真菌的筛选第74-79页
        4.4.3 目标菌株的菌落形态与显微特征第79页
        4.4.4 目标菌株的分子生物学鉴定第79-83页
        4.4.5 环境因子对目标菌株产孢量的影响第83-86页
        4.4.6 环境因子对目标菌株产OTA的影响第86-93页
    4.5 小结第93-95页
第5章 转录组学解析产毒菌株对NaCl胁迫应答的调控因子第95-107页
    5.1 前言第95-96页
    5.2 材料与设备第96页
        5.2.1 菌株第96页
        5.2.2 培养基与主要试剂第96页
        5.2.3 仪器与设备第96页
    5.3 实验方法第96-97页
        5.3.1 菌株培养第96-97页
        5.3.2 RNA-seq测序第97页
        5.3.3 转录表达水平统计及定量分析第97页
    5.4 结果与分析第97-106页
        5.4.1 RNA提取及质量检测第97-98页
        5.4.2 基因转录水平的总体变化第98-99页
        5.4.3 差异表达基因的GO富集分析第99-101页
        5.4.4 差异表达基因的代谢网络功能分析第101-102页
        5.4.5 参与OTA生物合成的差异表达基因第102-104页
        5.4.6 NaCl渗透胁迫下调控因子的转录水平变化第104-106页
    5.5 小结第106-107页
第6章 结论与展望第107-110页
    6.1 主要结论第107-108页
    6.2 主要创新点第108-109页
    6.3 研究展望第109-110页
参考文献第110-124页
博士期间发表的论文第124-125页
致谢第125-126页

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