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拮抗腹泻致病菌乳酸菌的筛选及其作用机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
第1章 绪论第18-37页
    1.1 课题背景及研究目的和意义第18-19页
    1.2 致病菌引起腹泻的研究第19-23页
        1.2.1 腹泻概述第19页
        1.2.2 致病菌引起腹泻的过程第19-22页
        1.2.3 致病菌引起腹泻的信号传递及过程第22-23页
    1.3 益生菌在人体肠道的作用第23-28页
        1.3.1 益生菌的定义第23-24页
        1.3.2 益生菌维持肠道平衡的机理第24-27页
        1.3.3 益生菌抑制肠道致病菌的功能第27-28页
    1.4 益生菌抑制腹泻的研究进展第28-34页
        1.4.1 益生菌抑制腹泻发生的临床研究第28-29页
        1.4.2 益生菌抑制腹泻发生的机制第29-34页
    1.5 益生菌抑制腹泻研究存在的问题第34-35页
    1.6 课题研究目标和技术路线图第35-37页
        1.6.1 课题研究目标第35页
        1.6.2 课题技术路线图第35-37页
第2章 实验材料与方法第37-57页
    2.1 实验材料第37-42页
        2.1.1 主要仪器与设备第37-38页
        2.1.2 主要试剂第38-39页
        2.1.3 菌株和细胞第39页
        2.1.4 培养基第39-41页
        2.1.5 实验室所用引物第41-42页
    2.2 测定方法第42-46页
        2.2.1 乳杆菌耐酸和耐胆盐能力测定第42页
        2.2.2 S-层蛋白分子量的测定第42-43页
        2.2.3 S-层蛋白氨基酸组成的测定第43页
        2.2.4 细胞凋亡酶活性的测定第43-44页
        2.2.5 致病菌细胞内ATP酶含量的测定第44-46页
        2.2.6 膜片钳技术测定细胞膜电位第46页
        2.2.7 表皮生长因子含量的测定第46页
    2.3 实验方法第46-56页
        2.3.1 抑制引起腹泻的乳杆菌的筛选第46-47页
        2.3.2 利用16S rDNA序列分析鉴定微生物菌株第47-48页
        2.3.3 扫描电镜观察乳杆菌形态第48-49页
        2.3.4 乳杆菌抑制致病菌黏附实验第49-50页
        2.3.5 乳杆菌去除S-层蛋白后自身黏附以及抑制致病菌黏附的研究第50页
        2.3.6 乳杆菌S-层蛋白抑制致病菌黏附的研究第50-51页
        2.3.7 乳杆菌代谢产物抑制致病菌生长繁殖的研究第51-52页
        2.3.8 不同处理条件下乳杆菌代谢产物抑菌情况的研究第52页
        2.3.9 傅里叶变换红外广谱检测乳杆菌代谢产物对致病菌菌体细胞成分的影响第52-53页
        2.3.10 乳杆菌对鼠伤寒沙门氏菌引起细胞紧密连接蛋白破坏的影响第53-54页
        2.3.11 乳杆菌对鼠伤寒沙门氏菌引起上皮细胞肌动蛋白破坏的影响第54页
        2.3.12 乳杆菌通过表皮生长因子抑制鼠伤寒沙门氏菌对于上皮细胞的破坏的影响第54-56页
    2.4 数据处理与统计分析第56-57页
第3章 抑制引起腹泻致病菌的乳酸菌及肠道生存能力第57-78页
    3.1 引言第57-58页
    3.2 乳杆菌菌株来源第58-60页
    3.3 抑制致病菌生长的乳杆菌的筛选第60-67页
    3.4 抑制致病菌黏附的乳杆菌的筛选第67-69页
    3.5 筛选对肠道环境具有耐受能力的乳杆菌第69-71页
        3.5.1 乳杆菌耐酸实验第69-70页
        3.5.2 乳杆菌耐胆盐实验第70-71页
    3.6 筛选黏附能力强的乳杆菌第71-72页
    3.7 16S rDNA鉴定乳杆菌菌株第72页
    3.8 BIOLOG进行生理生化鉴定第72页
    3.9 乳杆菌扫描电镜观察第72-74页
    3.10 筛选能够抑制引起腹泻致病菌乳杆菌的讨论第74-76页
        3.10.1 致病菌引起腹泻的过程第74页
        3.10.2 筛选指标的选定第74-76页
        3.10.3 筛选出的乳杆菌耐酸耐胆盐粘附性能评价第76页
    3.11 本章小结第76-78页
第4章 乳杆菌抑制致病菌黏附的研究第78-94页
    4.1 引言第78-79页
    4.2 乳杆菌去除表面层蛋白后自身黏附能力的研究第79-80页
    4.3 乳杆菌抑制致病菌黏附的研究第80-82页
    4.4 去除表面层蛋白后乳杆菌抑制致病菌黏附的研究第82-84页
    4.5 乳杆菌S-层蛋白的提取及SDS-PAGE分析第84-85页
    4.6 乳杆菌S-层蛋白氨基酸组成的研究第85-86页
    4.7 S-层蛋白抑制致病菌黏附的研究第86-87页
    4.8 S-层蛋白抑制致病菌引起细胞死亡的研究第87-88页
    4.9 S-层蛋白对于细胞周期的影响第88-89页
    4.10 S-层蛋白对于细胞凋亡酶-3的活性的影响第89-90页
    4.11 乳杆菌抑制致病菌黏附的讨论第90-92页
        4.11.1 乳杆菌抑制致病菌粘附的研究进展第90-91页
        4.11.2 筛选出的乳杆菌S-层蛋白抑制致病菌黏附的研究第91-92页
        4.11.3 乳杆菌S-层蛋白抑制细胞凋亡酶活性的研究第92页
    4.12 本章小结第92-94页
第5章 乳杆菌抑制致病菌生长的研究第94-106页
    5.1 引言第94-95页
    5.2 乳杆菌代谢产物抑制鼠伤寒沙门氏菌生长的研究第95-96页
    5.3 乳杆菌不同生长阶段的代谢产物对于抑菌的影响第96页
    5.4 乳杆菌的代谢产物在不同pH条件下对于抑菌的影响第96-97页
    5.5 乳杆菌代谢产物对鼠伤寒沙门氏菌存活率的影响第97-98页
    5.6 不同处理时间对乳杆菌代谢产物杀死致病菌的影响第98-99页
    5.7 傅里叶红外广谱检测经处理的鼠伤寒沙门氏菌菌体成分变化的研究第99-101页
    5.8 鼠伤寒沙门氏菌菌体峰型变化的研究第101-102页
    5.9 乳杆菌的代谢产物对于鼠伤寒沙门氏菌菌体内ATP酶含量的影响第102-103页
    5.10 乳杆菌抑制致病菌生长研究的讨论第103-105页
        5.10.1 乳杆菌代谢产物抑制致病菌生长的研究进展第103-104页
        5.10.2 筛选出的乳杆菌代谢产物抑菌能力的研究第104页
        5.10.3 乳杆菌代谢产物对致病菌菌体大分子的影响第104-105页
    5.11 本章小结第105-106页
第6章 乳杆菌抑制致病菌侵入的研究第106-120页
    6.1 引言第106-107页
    6.2 乳杆菌对于鼠伤寒沙门氏菌引起上皮细胞膜电位变化的研究第107-109页
    6.3 乳杆菌对于鼠伤寒沙门氏菌引起上皮细胞紧密连接蛋白变化的影响第109-110页
    6.4 乳杆菌对于鼠伤寒沙门氏菌引起上皮细胞肌动蛋白变化的影响第110-112页
    6.5 乳杆菌对于鼠伤寒沙门氏菌引起表皮生长因子含量的影响第112-114页
    6.6 表皮生长因子对于紧密连接蛋白和肌动蛋白改变的影响第114-115页
    6.7 表皮生长因子对于上皮细胞紧密连接蛋白和肌动蛋白mRNA的影响第115-116页
    6.8 乳杆菌抑制鼠伤寒沙门氏菌侵入的讨论第116-118页
        6.8.1 致病菌侵入过程的研究进展第116-117页
        6.8.2 筛选出的乳杆菌对HT-29细胞的保护作用第117-118页
        6.8.3 表皮生长因子对致病菌侵入的影响第118页
    6.9 本章小结第118-120页
结论第120-121页
创新点第121-122页
展望第122-123页
参考文献第123-142页
附录第142-150页
攻读博士学位期间发表的论文第150-152页
致谢第152-153页
个人简历第153页

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