摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第1章 绪论 | 第18-37页 |
1.1 课题背景及研究目的和意义 | 第18-19页 |
1.2 致病菌引起腹泻的研究 | 第19-23页 |
1.2.1 腹泻概述 | 第19页 |
1.2.2 致病菌引起腹泻的过程 | 第19-22页 |
1.2.3 致病菌引起腹泻的信号传递及过程 | 第22-23页 |
1.3 益生菌在人体肠道的作用 | 第23-28页 |
1.3.1 益生菌的定义 | 第23-24页 |
1.3.2 益生菌维持肠道平衡的机理 | 第24-27页 |
1.3.3 益生菌抑制肠道致病菌的功能 | 第27-28页 |
1.4 益生菌抑制腹泻的研究进展 | 第28-34页 |
1.4.1 益生菌抑制腹泻发生的临床研究 | 第28-29页 |
1.4.2 益生菌抑制腹泻发生的机制 | 第29-34页 |
1.5 益生菌抑制腹泻研究存在的问题 | 第34-35页 |
1.6 课题研究目标和技术路线图 | 第35-37页 |
1.6.1 课题研究目标 | 第35页 |
1.6.2 课题技术路线图 | 第35-37页 |
第2章 实验材料与方法 | 第37-57页 |
2.1 实验材料 | 第37-42页 |
2.1.1 主要仪器与设备 | 第37-38页 |
2.1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
2.1.3 菌株和细胞 | 第39页 |
2.1.4 培养基 | 第39-41页 |
2.1.5 实验室所用引物 | 第41-42页 |
2.2 测定方法 | 第42-46页 |
2.2.1 乳杆菌耐酸和耐胆盐能力测定 | 第42页 |
2.2.2 S-层蛋白分子量的测定 | 第42-43页 |
2.2.3 S-层蛋白氨基酸组成的测定 | 第43页 |
2.2.4 细胞凋亡酶活性的测定 | 第43-44页 |
2.2.5 致病菌细胞内ATP酶含量的测定 | 第44-46页 |
2.2.6 膜片钳技术测定细胞膜电位 | 第46页 |
2.2.7 表皮生长因子含量的测定 | 第46页 |
2.3 实验方法 | 第46-56页 |
2.3.1 抑制引起腹泻的乳杆菌的筛选 | 第46-47页 |
2.3.2 利用16S rDNA序列分析鉴定微生物菌株 | 第47-48页 |
2.3.3 扫描电镜观察乳杆菌形态 | 第48-49页 |
2.3.4 乳杆菌抑制致病菌黏附实验 | 第49-50页 |
2.3.5 乳杆菌去除S-层蛋白后自身黏附以及抑制致病菌黏附的研究 | 第50页 |
2.3.6 乳杆菌S-层蛋白抑制致病菌黏附的研究 | 第50-51页 |
2.3.7 乳杆菌代谢产物抑制致病菌生长繁殖的研究 | 第51-52页 |
2.3.8 不同处理条件下乳杆菌代谢产物抑菌情况的研究 | 第52页 |
2.3.9 傅里叶变换红外广谱检测乳杆菌代谢产物对致病菌菌体细胞成分的影响 | 第52-53页 |
2.3.10 乳杆菌对鼠伤寒沙门氏菌引起细胞紧密连接蛋白破坏的影响 | 第53-54页 |
2.3.11 乳杆菌对鼠伤寒沙门氏菌引起上皮细胞肌动蛋白破坏的影响 | 第54页 |
2.3.12 乳杆菌通过表皮生长因子抑制鼠伤寒沙门氏菌对于上皮细胞的破坏的影响 | 第54-56页 |
2.4 数据处理与统计分析 | 第56-57页 |
第3章 抑制引起腹泻致病菌的乳酸菌及肠道生存能力 | 第57-78页 |
3.1 引言 | 第57-58页 |
3.2 乳杆菌菌株来源 | 第58-60页 |
3.3 抑制致病菌生长的乳杆菌的筛选 | 第60-67页 |
3.4 抑制致病菌黏附的乳杆菌的筛选 | 第67-69页 |
3.5 筛选对肠道环境具有耐受能力的乳杆菌 | 第69-71页 |
3.5.1 乳杆菌耐酸实验 | 第69-70页 |
3.5.2 乳杆菌耐胆盐实验 | 第70-71页 |
3.6 筛选黏附能力强的乳杆菌 | 第71-72页 |
3.7 16S rDNA鉴定乳杆菌菌株 | 第72页 |
3.8 BIOLOG进行生理生化鉴定 | 第72页 |
3.9 乳杆菌扫描电镜观察 | 第72-74页 |
3.10 筛选能够抑制引起腹泻致病菌乳杆菌的讨论 | 第74-76页 |
3.10.1 致病菌引起腹泻的过程 | 第74页 |
3.10.2 筛选指标的选定 | 第74-76页 |
3.10.3 筛选出的乳杆菌耐酸耐胆盐粘附性能评价 | 第76页 |
3.11 本章小结 | 第76-78页 |
第4章 乳杆菌抑制致病菌黏附的研究 | 第78-94页 |
4.1 引言 | 第78-79页 |
4.2 乳杆菌去除表面层蛋白后自身黏附能力的研究 | 第79-80页 |
4.3 乳杆菌抑制致病菌黏附的研究 | 第80-82页 |
4.4 去除表面层蛋白后乳杆菌抑制致病菌黏附的研究 | 第82-84页 |
4.5 乳杆菌S-层蛋白的提取及SDS-PAGE分析 | 第84-85页 |
4.6 乳杆菌S-层蛋白氨基酸组成的研究 | 第85-86页 |
4.7 S-层蛋白抑制致病菌黏附的研究 | 第86-87页 |
4.8 S-层蛋白抑制致病菌引起细胞死亡的研究 | 第87-88页 |
4.9 S-层蛋白对于细胞周期的影响 | 第88-89页 |
4.10 S-层蛋白对于细胞凋亡酶-3的活性的影响 | 第89-90页 |
4.11 乳杆菌抑制致病菌黏附的讨论 | 第90-92页 |
4.11.1 乳杆菌抑制致病菌粘附的研究进展 | 第90-91页 |
4.11.2 筛选出的乳杆菌S-层蛋白抑制致病菌黏附的研究 | 第91-92页 |
4.11.3 乳杆菌S-层蛋白抑制细胞凋亡酶活性的研究 | 第92页 |
4.12 本章小结 | 第92-94页 |
第5章 乳杆菌抑制致病菌生长的研究 | 第94-106页 |
5.1 引言 | 第94-95页 |
5.2 乳杆菌代谢产物抑制鼠伤寒沙门氏菌生长的研究 | 第95-96页 |
5.3 乳杆菌不同生长阶段的代谢产物对于抑菌的影响 | 第96页 |
5.4 乳杆菌的代谢产物在不同pH条件下对于抑菌的影响 | 第96-97页 |
5.5 乳杆菌代谢产物对鼠伤寒沙门氏菌存活率的影响 | 第97-98页 |
5.6 不同处理时间对乳杆菌代谢产物杀死致病菌的影响 | 第98-99页 |
5.7 傅里叶红外广谱检测经处理的鼠伤寒沙门氏菌菌体成分变化的研究 | 第99-101页 |
5.8 鼠伤寒沙门氏菌菌体峰型变化的研究 | 第101-102页 |
5.9 乳杆菌的代谢产物对于鼠伤寒沙门氏菌菌体内ATP酶含量的影响 | 第102-103页 |
5.10 乳杆菌抑制致病菌生长研究的讨论 | 第103-105页 |
5.10.1 乳杆菌代谢产物抑制致病菌生长的研究进展 | 第103-104页 |
5.10.2 筛选出的乳杆菌代谢产物抑菌能力的研究 | 第104页 |
5.10.3 乳杆菌代谢产物对致病菌菌体大分子的影响 | 第104-105页 |
5.11 本章小结 | 第105-106页 |
第6章 乳杆菌抑制致病菌侵入的研究 | 第106-120页 |
6.1 引言 | 第106-107页 |
6.2 乳杆菌对于鼠伤寒沙门氏菌引起上皮细胞膜电位变化的研究 | 第107-109页 |
6.3 乳杆菌对于鼠伤寒沙门氏菌引起上皮细胞紧密连接蛋白变化的影响 | 第109-110页 |
6.4 乳杆菌对于鼠伤寒沙门氏菌引起上皮细胞肌动蛋白变化的影响 | 第110-112页 |
6.5 乳杆菌对于鼠伤寒沙门氏菌引起表皮生长因子含量的影响 | 第112-114页 |
6.6 表皮生长因子对于紧密连接蛋白和肌动蛋白改变的影响 | 第114-115页 |
6.7 表皮生长因子对于上皮细胞紧密连接蛋白和肌动蛋白mRNA的影响 | 第115-116页 |
6.8 乳杆菌抑制鼠伤寒沙门氏菌侵入的讨论 | 第116-118页 |
6.8.1 致病菌侵入过程的研究进展 | 第116-117页 |
6.8.2 筛选出的乳杆菌对HT-29细胞的保护作用 | 第117-118页 |
6.8.3 表皮生长因子对致病菌侵入的影响 | 第118页 |
6.9 本章小结 | 第118-120页 |
结论 | 第120-121页 |
创新点 | 第121-122页 |
展望 | 第122-123页 |
参考文献 | 第123-142页 |
附录 | 第142-150页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第150-152页 |
致谢 | 第152-153页 |
个人简历 | 第153页 |