| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-29页 |
| ·水牛乳的研究进展 | 第13-16页 |
| ·水牛乳的特点及优势 | 第13-14页 |
| ·水牛乳业发展概况 | 第14-15页 |
| ·水牛乳的过敏问题 | 第15-16页 |
| ·牛乳中的主要过敏原表位的研究进展 | 第16-27页 |
| ·表位的免疫学意义 | 第16页 |
| ·牛乳过敏原表位研究概况 | 第16-24页 |
| ·牛乳过敏原线性表位序列位置的特异性以及构象型表位对比 | 第24-26页 |
| ·牛乳过敏原表位定位及应用 | 第26-27页 |
| ·研究内容和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 水牛乳β-乳球蛋白的分离纯化 | 第29-43页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·材料与设备 | 第29-32页 |
| ·试剂与材料 | 第29-30页 |
| ·仪器 | 第30页 |
| ·溶液的配制 | 第30-32页 |
| ·实验方法 | 第32-35页 |
| ·水牛乳的预处理 | 第32页 |
| ·除酪蛋白 | 第32页 |
| ·超滤 | 第32页 |
| ·水牛乳β-乳球蛋白的分离 | 第32-33页 |
| ·分离蛋白的纯度检测 | 第33-34页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第34-35页 |
| ·质谱鉴定 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-40页 |
| ·离子交换层析分离水牛乳β-乳球蛋白 | 第35-37页 |
| ·凝胶层析分离水牛乳β-乳球蛋白的结果 | 第37-38页 |
| ·蛋白分离过程中样品蛋白含量的变化 | 第38-39页 |
| ·离子交换层析及凝胶层析分离水牛乳β-乳球蛋白的得率 | 第39-40页 |
| ·水牛乳β-乳球蛋白的鉴定结果 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| ·层析纯化分离目的蛋白 | 第40-41页 |
| ·关于SDS-PAGE、IEF-PAGE检测蛋白的纯度 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第三章 水牛乳β-乳球蛋白的抗原性评估和特异性抗体的纯化 | 第43-59页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·材料与设备 | 第43-45页 |
| ·试剂 | 第43-44页 |
| ·实验动物 | 第44页 |
| ·仪器与耗材 | 第44页 |
| ·溶液配制 | 第44-45页 |
| ·方法 | 第45-48页 |
| ·多抗的制备 | 第45-46页 |
| ·抗原性评价 | 第46-47页 |
| ·亲和层析纯化特异性IgG | 第47-48页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测纯度 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-55页 |
| ·实验动物免疫应答的变化 | 第48-49页 |
| ·免疫交叉反应的测定结果 | 第49-51页 |
| ·亲和层析洗脱过程中蛋白含量变化 | 第51-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| ·多抗的制备 | 第55-56页 |
| ·抗原性评估 | 第56-57页 |
| ·亲和层析纯化抗体 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第四章 水牛乳β-乳球蛋白的IgG结合的线性表位定位 | 第59-88页 |
| ·前言 | 第59页 |
| ·材料 | 第59-61页 |
| ·试剂 | 第59-60页 |
| ·仪器 | 第60页 |
| ·试剂配方 | 第60-61页 |
| ·方法 | 第61-66页 |
| ·水牛乳β-乳球蛋白线性表位的预测 | 第61页 |
| ·噬菌体随机肽库定位线性模拟表位 | 第61-63页 |
| ·肽扫描表位定位操作程序 | 第63-66页 |
| ·结果与分析 | 第66-82页 |
| ·水牛乳β-乳球蛋白抗原表位的预测结果 | 第66-69页 |
| ·肽库淘选模拟线性表位结果 | 第69-73页 |
| ·肽扫描表位定位分析结果 | 第73-82页 |
| ·讨论 | 第82-86页 |
| ·关于表位预测 | 第82-84页 |
| ·噬菌体展示技术在表位筛选中的应用 | 第84页 |
| ·关于肽扫描表位定位 | 第84-85页 |
| ·随机肽库和肽扫描相结合的表位定位分析 | 第85-86页 |
| ·水牛乳β-乳球蛋白和牛乳β-乳球蛋白线性表位的比较 | 第86页 |
| ·小结 | 第86-88页 |
| 第五章 水牛乳β-乳球蛋白的IgG结合的构象型表位定位 | 第88-112页 |
| ·前言 | 第88页 |
| ·材料 | 第88-89页 |
| ·材料 | 第88页 |
| ·仪器 | 第88-89页 |
| ·试剂配方 | 第89页 |
| ·方法 | 第89-94页 |
| ·噬菌体滴度的测定 | 第89-90页 |
| ·环七肽库淘选程序 | 第90-91页 |
| ·测序模板的快速纯化 | 第91-92页 |
| ·ELISA筛选阳性克隆 | 第92-93页 |
| ·MIMOX模拟构象型表位 | 第93-94页 |
| ·结果 | 第94-109页 |
| ·肽库筛选结果 | 第94页 |
| ·DNA电泳图 | 第94-95页 |
| ·测序结果 | 第95页 |
| ·网络工具MIMOX对模拟肽共有序列的分析 | 第95-96页 |
| ·水牛乳β-乳球蛋白构象型表位 | 第96-100页 |
| ·水牛乳β-乳球蛋白构象型表位定位结果 | 第100-109页 |
| ·水牛乳β-乳球蛋白构象型表位定位 | 第109页 |
| ·讨论 | 第109-111页 |
| ·随机环七肽库筛选构象型模拟表位 | 第109页 |
| ·构象型表位定位方法 | 第109-111页 |
| ·小结 | 第111-112页 |
| 第六章 结论与展望 | 第112-114页 |
| ·结论 | 第112页 |
| ·本研究的创新点 | 第112-113页 |
| ·展望与建议 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-129页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第129页 |
