| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 海参简介 | 第11页 |
| 1.2 海参自溶的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3 棘皮类生态免疫研究进展 | 第12-14页 |
| 1.3.1 生态免疫系统 | 第12-13页 |
| 1.3.2 海参的细胞免疫功能 | 第13页 |
| 1.3.3 体腔细胞的吞噬作用 | 第13-14页 |
| 1.4 内质网的应激反应 | 第14-16页 |
| 1.4.1 内质网结构 | 第14页 |
| 1.4.2 内质网的功能 | 第14-15页 |
| 1.4.3 内质网介导凋亡的相关蛋白 | 第15-16页 |
| 1.5 线粒体损伤 | 第16-18页 |
| 1.5.1 线粒体结构 | 第16页 |
| 1.5.2 线粒体功能 | 第16-17页 |
| 1.5.3 线粒体膜电位 | 第17-18页 |
| 1.5.4 线粒体复合体 | 第18页 |
| 1.6 内质网与线粒体内钙离子分布 | 第18-20页 |
| 1.7 流式细胞检测 | 第20页 |
| 1.8 激光共聚焦显微镜检测 | 第20-21页 |
| 1.9 本课题研究内容及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 原料 | 第22页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第22-24页 |
| 2.1.3 主要设备 | 第24-25页 |
| 2.2 相关试剂及配制方法 | 第25-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-37页 |
| 2.3.1 刺参体腔细胞的制备 | 第27-28页 |
| 2.3.2 刺参自溶过程中体腔细胞吞噬率的检测 | 第28-30页 |
| 2.3.2.1 荧光标记及体腔细胞状态的观察 | 第28页 |
| 2.3.2.2 荧光微球孵育比例对吞噬率的影响 | 第28页 |
| 2.3.2.3 体外吞噬率检测 | 第28-29页 |
| 2.3.2.4 死亡率检测 | 第29页 |
| 2.3.2.5 凋亡率检测 | 第29-30页 |
| 2.3.3 刺参自溶过程中体腔细胞内质网结构损伤检测 | 第30页 |
| 2.3.4 刺参自溶过程中体腔细胞线粒体结构损伤检测 | 第30-31页 |
| 2.3.5 Caspase-12蛋白含量与酶活力测定 | 第31-34页 |
| 2.3.5.1 体腔细胞中全蛋白的提取 | 第31页 |
| 2.3.5.2 考马斯亮蓝法测定体腔细胞中的蛋白含量 | 第31-32页 |
| 2.3.5.3 免疫印迹法测定Caspase-12蛋白含量 | 第32-33页 |
| 2.3.5.4 Caspase-12酶活力测定 | 第33-34页 |
| 2.3.6 GRP78蛋白的测定 | 第34页 |
| 2.3.7 线粒体膜电位的测定 | 第34-35页 |
| 2.3.8 线粒体复合体I活性检测 | 第35页 |
| 2.3.9 细胞内质网内钙离子浓度检测 | 第35-36页 |
| 2.3.10 细胞线粒体内钙离子浓度检测 | 第36-37页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第37-61页 |
| 3.1 刺参自溶过程中体腔细胞吞噬率检测 | 第37-45页 |
| 3.1.1 荧光标记及体腔细胞状态观察结果 | 第37-38页 |
| 3.1.2 荧光微球孵育比例对吞噬率的影响 | 第38-39页 |
| 3.1.3 体外吞噬率检测 | 第39-41页 |
| 3.1.4 体腔细胞死亡率检测 | 第41-43页 |
| 3.1.5 刺参自溶过程中体腔细胞的凋亡率检测 | 第43-45页 |
| 3.1.5.1 基于流式细胞仪技术进行检测 | 第43-44页 |
| 3.1.5.2 基于透射电镜进行检测 | 第44-45页 |
| 3.2 刺参自溶过程中体腔细胞内质网与线粒体结构损伤检测 | 第45-50页 |
| 3.2.1 内质网结构损伤检测 | 第45-48页 |
| 3.2.2 线粒体结构损伤检测 | 第48-50页 |
| 3.3 刺参自溶过程中体腔细胞内质网与线粒体功能损伤检测 | 第50-57页 |
| 3.3.1 内质网功能损伤检测 | 第50-54页 |
| 3.3.2 线粒体功能损伤检测 | 第54-57页 |
| 3.4 刺参自溶过程中体腔细胞内质网与线粒体内钙离子分布 | 第57-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 附录 | 第71页 |
