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基于关键分子特性分析的海蜇和海参个体识别的研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 绪论第10-26页
    1.1 海蜇和海参简介第10-13页
        1.1.1 海蜇概述第10-12页
        1.1.2 海参概述第12-13页
    1.2 基于DNA指纹图谱溯源技术的研究进展第13-18页
        1.2.1 常规PCR技术第14页
        1.2.2 限制性片段长度多态性PCR第14页
        1.2.3 多重PCR第14页
        1.2.4 实时荧光定量PCR第14-18页
    1.3 基于蛋白质检测溯源技术的研究进展第18-21页
    1.4 近红外光谱溯源技术的研究进展第21-23页
    1.5 矿物质指纹图谱溯源技术的研究进展第23-25页
    1.6 本课题研究的内容及意义第25-26页
第二章 基于PCR-RFLP技术的海蜇个体识别的研究第26-43页
    2.1 实验材料第26-28页
        2.1.1 实验原料第26页
        2.1.2 主要实验设备第26-27页
        2.1.3 主要实验试剂第27-28页
    2.2 实验方法第28-31页
        2.2.1 主要试剂配制第28页
            2.2.1.1 50×平行电泳缓冲液的配制第28页
            2.2.1.2 琼脂糖凝胶的配制第28页
            2.2.1.3 染色液的配制第28页
        2.2.2 原料预处理第28页
        2.2.3 基因组DNA的提取第28页
        2.2.4 mt 16S rRNA和mt COI基因的PCR扩增第28-30页
        2.2.5 序列酶切位点的分析第30页
        2.2.6 PCR-RFLP第30页
        2.2.7 琼脂糖凝胶电泳第30-31页
    2.3 结果与讨论第31-43页
        2.3.1 新鲜海蜇基因组DNA提取方法的建立第31-32页
        2.3.2 新鲜绵蜇和沙蛰各部位基因组DNA的提取第32页
        2.3.3 新鲜绵蜇和沙蛰 16S r RNA和COI基因的扩增第32-33页
        2.3.4 腌渍绵蜇 16Sr RNA和COl基因的扩增第33-34页
        2.3.5 绵蛰和沙蛰 16Sr RNA基因序列测定结果第34-36页
        2.3.6 绵蛰和沙蛰 16Sr RNA基因序列酶切位点分析第36-37页
        2.3.7 绵蛰和沙蛰 16Sr RNA基因序列内切酶的选择第37-38页
        2.3.8 PCR-RFLP酶切结果第38-40页
        2.3.9 部分市售海蜇产品的鉴别第40-43页
第三章 基于胶原分子特性分析的海参个体识别的研究第43-61页
    3.1 实验材料第43-45页
        3.1.1 实验原料第43页
        3.1.2 主要实验设备第43-44页
        3.1.3 主要实验试剂第44-45页
    3.2 实验方法第45-49页
        3.2.1 主要试剂配制第45-46页
            3.2.1.1 SDS-PAGE电泳相关试剂的配制第45页
            3.2.1.2 分离胶和浓缩胶的配制第45-46页
            2.2.1.3 5×电泳上样缓冲液第46页
        3.2.2 原料预处理第46页
        3.2.3 海参体壁和鱼皮明胶的提取第46页
        3.2.4 海参体壁粗胶原纤维的提取第46-47页
        3.2.5 海参体壁酶促溶性胶原蛋白的提取第47页
        3.2.6 鱼皮酶促溶性胶原蛋白的提取第47页
        3.2.7 紫外光谱分析第47页
        3.2.8 红外光谱分析第47页
        3.2.9 氨基酸组成分析第47-48页
        3.2.10 SDS-PAGE电泳分析第48页
        3.2.11 肽质量指纹图谱分析第48-49页
        3.2.12 热变性温度的测定第49页
    3.3 结果与讨论第49-61页
        3.3.1 海参体壁和鱼皮明胶的特性对比研究第49-52页
            3.3.1.1 紫外光谱分析第49页
            3.3.1.2 红外光谱分析第49-50页
            3.3.1.3 氨基酸组成分析第50-51页
            3.3.1.4 电泳图谱分析第51-52页
        3.3.2 海参体壁和鱼皮酶促溶性胶原蛋白的特性对比研究第52-58页
            3.3.2.1 紫外光谱分析第52-53页
            3.3.2.2 红外光谱分析第53-54页
            3.3.2.3 氨基酸组成分析第54-55页
            3.3.2.4 电泳图谱分析第55页
            3.3.2.5 肽指纹图谱分析第55-58页
        3.3.2 南北海参体壁胶原蛋白的特性对比研究第58-60页
            3.3.2.1 V8酶指纹图谱分析第59页
            3.3.2.2 α -糜蛋白酶指纹图谱分析第59-60页
        3.3.3 南北海参体壁胶原蛋白热变性温度的测定第60-61页
第四章 结论第61-62页
参考文献第62-69页
致谢第69-71页
附录第71页

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