| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 概述 | 第9-11页 |
| 1.1.1 氨基葡萄糖 (GlcN) 和其衍生物N-乙酰氨基葡萄糖 (GlcNAc) 的应用 | 第9-10页 |
| 1.1.2 GlcNAc和GlcN的市场前景 | 第10页 |
| 1.1.3 GlcNAc和GlcN的生产方法 | 第10-11页 |
| 1.2 诱变育种技术水平的研究 | 第11-12页 |
| 1.2.1 诱变育种技术简介 | 第11页 |
| 1.2.2 诱变育种技术的应用 | 第11-12页 |
| 1.2.3 重组B. subtilis进行诱变的可行性 | 第12页 |
| 1.3 发酵法发酵生产GlcNAc和GlcN的国内外研究状况 | 第12-13页 |
| 1.3.1 采用真菌发酵生产GlcN | 第12页 |
| 1.3.2 大肠杆菌 (Escherichia.coli) 发酵生产GlcN及GlcNAc | 第12-13页 |
| 1.4 利用重组B. subtilis生产GlcNAc | 第13-15页 |
| 1.4.1 枯草芽孢杆产GlcN及GlcNAc代谢途径及生理特性 | 第13-15页 |
| 1.4.2 B. subtilis发酵生产GlcNAc代谢途径改造 | 第15页 |
| 1.4.3 B. subtilis氮源代谢中全局性调控因子 | 第15页 |
| 1.5 立题依据及意义 | 第15-16页 |
| 1.6 本论文研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-25页 |
| 2.1 材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 质粒与菌株 | 第17页 |
| 2.1.2 试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 仪器 | 第17-19页 |
| 2.1.4 培养基 | 第19页 |
| 2.2 操作方法 | 第19-23页 |
| 2.2.1 分子生物学操作方法 | 第19-21页 |
| 2.2.2 培养方法 | 第21页 |
| 2.2.3 诱变方法 | 第21-23页 |
| 2.3 分析方法 | 第23-25页 |
| 2.3.1 菌体浓度的测定 | 第23页 |
| 2.3.2 HPLC测定GlcNAc | 第23-24页 |
| 2.3.3 葡萄糖的检测方法 | 第24-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-39页 |
| 3.1 基于常压室温等离子体诱变技术的N-乙酰氨基葡萄糖菌种高通量筛选 | 第25-30页 |
| 3.1.1 高通量筛选方法的建立 | 第25页 |
| 3.1.2 四硼酸钾添加量的确定 | 第25页 |
| 3.1.3 对二甲氨基苯甲醛 (PDABA) 添加量的确定 | 第25-26页 |
| 3.1.4 反应时间的确定 | 第26页 |
| 3.1.5 反应温度的确定 | 第26-27页 |
| 3.1.6 正交试验设计 | 第27-28页 |
| 3.1.7 ARTP诱变致死率曲线 | 第28-29页 |
| 3.1.8 高氮源转化率突变株的筛选 | 第29页 |
| 3.1.9 高葡萄糖转化率突变株的筛选 | 第29-30页 |
| 3.1.10 突变菌在遗传稳定性方面的考察 | 第30页 |
| 3.2 培养基的优化 | 第30-33页 |
| 3.2.1 最优无机氮源的确定 | 第30-31页 |
| 3.2.2 氮源的初次优化 | 第31-32页 |
| 3.2.3 氮源的再次优化 | 第32页 |
| 3.2.4 (NH_4)_2SO_4不同浓度对GlcNAc发酵的影响 | 第32-33页 |
| 3.3 突变菌 (4A12) 在氮源代谢中全局性调控因子的研究 | 第33-39页 |
| 3.3.1 在初始发酵培养基中突变菌 (4A12) 发酵特性 | 第33-35页 |
| 3.3.2 在最优发酵培养基中突变菌 (4A12) 发酵特性 | 第35-36页 |
| 3.3.3 氮源代谢代谢调控中全局性调控转录因子敲除验证 | 第36-37页 |
| 3.3.4 氮源代谢调控中全局性调控转录因子敲除对细胞生长的影响 | 第37-39页 |
| 主要结论与展望 | 第39-41页 |
| 主要结论 | 第39-40页 |
| 展望 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第46页 |
