| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-27页 |
| ·立题背景 | 第11-12页 |
| ·李斯特菌的简介 | 第12-13页 |
| ·单增李斯特菌的检测方法研究现状 | 第13-18页 |
| ·传统分离鉴定方法 | 第13-14页 |
| ·免疫学检测方法 | 第14页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第14-17页 |
| ·其他检测李斯特菌的方法 | 第17-18页 |
| ·等温环介导核酸扩增 | 第18-26页 |
| ·LAMP 反应原理 | 第19-22页 |
| ·LAMP 反应产物的检测 | 第22-23页 |
| ·环介导等温扩增研究进展 | 第23-25页 |
| ·病原菌 LAMP 检测试剂盒研究现状及展望 | 第25-26页 |
| ·本课题研究目的和意义 | 第26页 |
| ·课题来源 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-36页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·菌种 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27-28页 |
| ·仪器设备 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-36页 |
| ·新型指示剂罗丹明 B 衍生物 | 第29-30页 |
| ·实验菌株的培养 | 第30页 |
| ·LAMP 引物的选择及处理 | 第30-31页 |
| ·实验菌株 DNA 模板的提取 | 第31-32页 |
| ·PCR 检测 | 第32页 |
| ·LAMP 反应体系优化 | 第32-33页 |
| ·LAMP 特异性实验 | 第33页 |
| ·LAMP 和 PCR 检测人工污染乳中的单增李斯特菌灵敏度比较 | 第33页 |
| ·PCR 和 LAMP 反应产物的检测 | 第33页 |
| ·LAMP 反应体系稳定性实验 | 第33-34页 |
| ·室温下 LAMP 体系失活限制因素探究 | 第34页 |
| ·LAMP 反应体系颜色变化的量化实验 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-49页 |
| ·纳米材料接枝罗丹明 B 衍生物与镁离子作用的吸收光谱 | 第36页 |
| ·LAMP 扩增产物的可视化检测 | 第36-37页 |
| ·细菌基因组不同的提取方法之间检测结果比较 | 第37页 |
| ·实验用细菌基因组浓度确定 | 第37-38页 |
| ·LAMP 反应体系的优化 | 第38-41页 |
| ·指示剂添加量优化 | 第38页 |
| ·镁离子添加量优化 | 第38-39页 |
| ·dNTPs 优化 | 第39-40页 |
| ·甜菜碱优化 | 第40-41页 |
| ·LAMP 特异性实验 | 第41页 |
| ·PCR 特异性实验 | 第41-42页 |
| ·LAMP 和 PCR 检测人工污染乳中的单增李斯特菌灵敏度 | 第42-43页 |
| ·液态 LAMP 反应体系稳定性实验 | 第43-44页 |
| ·干粉 LAMP 反应体系稳定性实验 | 第44-45页 |
| ·室温下液态 LAMP 体系失活限制因素分析结果 | 第45页 |
| ·室温下干粉体系失活限制因素分析结果 | 第45-46页 |
| ·LAMP 反应体系颜色变化的量化实验 | 第46-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| ·目的基因的选择 | 第49页 |
| ·建立 LAMP 法检测牛奶中单增李斯特菌的重要性 | 第49-50页 |
| ·罗丹明 B 衍生物的开发 | 第50-51页 |
| ·细菌基因组提取方法的选择 | 第51页 |
| ·LAMP 反应条件的优化 | 第51页 |
| ·实验室污染的控制 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-66页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第66页 |
