| 目录 | 第1-6页 |
| CONTENTS | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| ·LM 的生物学特性 | 第11页 |
| ·LM 的形态结构 | 第11页 |
| ·LM 的生化特征 | 第11页 |
| ·LM 的毒力因子 | 第11-14页 |
| ·LM 的致病机理 | 第11-12页 |
| ·LM 的毒力因子级 | 第12-13页 |
| ·LLO | 第13-14页 |
| ·LM 的检测方法 | 第14-17页 |
| ·传统的分离鉴定 | 第14页 |
| ·免疫学检测方法 | 第14-16页 |
| ·分子生物学检测 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-29页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·菌株与细胞 | 第18页 |
| ·载体与质粒 | 第18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·引物 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要溶液配制 | 第19页 |
| ·主要实验仪器与设备 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-29页 |
| ·单增李斯特菌 hly 分段基因扩增 | 第20-23页 |
| ·单增李斯特菌分段 hly 基因在重组大肠杆菌的构建 | 第23-24页 |
| ·分子伴侣辅助 hly 分段基因的表达 | 第24-25页 |
| ·重组 LLO 蛋白的生物活性鉴定 | 第25-26页 |
| ·抗 LLO 单克隆抗体的制备 | 第26-28页 |
| ·抗 LLO 单克隆抗体的鉴定 | 第28-29页 |
| 3 结果 | 第29-41页 |
| ·hly 分段基因的克隆结果 | 第29-31页 |
| ·hly 分段基因的扩增结果 | 第29页 |
| ·重组质粒的鉴定结果 | 第29-31页 |
| ·hly 分段基因基因重组大肠杆菌的构建 | 第31-33页 |
| ·hly 分段基因在大肠杆菌中的诱导表达结果 | 第33-35页 |
| ·分子伴侣辅助 hly 基因的表达 | 第35-37页 |
| ·分子伴侣辅助 hly 分段基因的表达结果 | 第35-36页 |
| ·pET30b-hly-1+ pG-KJE8 与 pET30b-hly-3+pG-KJE8 重组蛋白纯化 | 第36-37页 |
| ·LLO 生物活性鉴定 | 第37-39页 |
| ·天然 LLO 蛋白提取的 SDS-PAGE 结果 | 第37-38页 |
| ·重组蛋白溶血活性鉴定 | 第38页 |
| ·重组蛋白的 Western Blot 鉴定 | 第38-39页 |
| ·单克隆抗体制备 | 第39-41页 |
| ·间接 ELISA 确定抗原与血清最佳工作浓度结果 | 第39页 |
| ·杂交瘤细胞株建立和筛选结果 | 第39-40页 |
| ·单克隆抗体的的亚类鉴定结果 | 第40页 |
| ·单克隆抗体的 Western-blot 鉴定结果 | 第40页 |
| ·杂交瘤细胞稳定性鉴定结果 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| ·制备单抗的免疫原性分析 | 第41-42页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第42-43页 |
| ·动物免疫 | 第42页 |
| ·关于细胞融合 | 第42页 |
| ·关于杂交瘤细胞的克隆 | 第42-43页 |
| ·抗单增李斯特菌 LLO 单克隆抗体应用前景 | 第43-44页 |
| ·在食品病原微生物中的应用 | 第43页 |
| ·在临床上对于病原微生物诊断中的应用 | 第43-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录 | 第50-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第54页 |
