| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| 1 几丁质、壳聚糖简介 | 第11-13页 |
| ·几丁质的结构及功能 | 第11-12页 |
| ·壳聚糖的结构及功能 | 第12-13页 |
| 2 几丁质脱乙酰酶的研究现状 | 第13-19页 |
| ·产几丁质脱乙酰酶的微生物 | 第13-14页 |
| ·几丁质脱乙酰酶的性质 | 第14-15页 |
| ·几丁质脱乙酰酶的分子生物学 | 第15-16页 |
| ·几丁质脱乙酰酶的酶促反应机理 | 第16-17页 |
| ·几丁质脱乙酰酶的酶活测定方法 | 第17-19页 |
| ·放射性测定法 | 第17页 |
| ·酶法测定CDA 酶活 | 第17-18页 |
| ·比色法测定CDA 的酶活 | 第18页 |
| ·简易稳定的CDA酶活测定方法 | 第18页 |
| ·其他测定方法 | 第18-19页 |
| ·几丁质脱乙酰酶的分离纯化现状 | 第19页 |
| 3 几丁质脱乙酰酶的应用前景 | 第19-20页 |
| ·替代强碱法生产壳聚糖 | 第19页 |
| ·生产特定乙酰化程度的壳聚糖 | 第19-20页 |
| ·生物法合成壳聚糖 | 第20页 |
| 4 本课题的立题背景及研究意义 | 第20页 |
| 5 主要研究内容及技术路线 | 第20-22页 |
| 第二章 几丁质脱乙酰酶产生菌高产突变株的选育 | 第22-40页 |
| 1 材料与仪器 | 第22-25页 |
| ·实验菌种 | 第22页 |
| ·试剂与仪器 | 第22-24页 |
| ·实验试剂 | 第22-23页 |
| ·实验仪器 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2 试验方法 | 第25-39页 |
| ·测定方法 | 第25-27页 |
| ·脱乙酰度测定方法 | 第25页 |
| ·几丁质脱乙酰基酶(CDA)酶活测定方法 | 第25-27页 |
| ·突变致死率的测定 | 第27页 |
| ·菌种活化 | 第27页 |
| ·菌种活化及复壮 | 第27页 |
| ·菌株对几丁质的脱乙酰基作用 | 第27页 |
| ·菌株诱变方法 | 第27-29页 |
| ·紫外诱变处理 | 第27-28页 |
| ·硫酸二乙酯(DES)诱变处理 | 第28页 |
| ·紫外线-氯化锂复合诱变处理 | 第28页 |
| ·初筛 | 第28页 |
| ·复筛 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-39页 |
| ·菌株Y-104 复壮结果 | 第29-31页 |
| ·紫外线(UV)诱变 | 第31-34页 |
| ·硫酸二乙酯(DES)诱变结果 | 第34-36页 |
| ·紫外线-氯化锂诱变结果 | 第36-38页 |
| ·菌株形态观察结果 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 第三章 突变株D9 产几丁质脱乙酰酶发酵条件的优化 | 第40-56页 |
| 1 材料与方法 | 第40-42页 |
| ·实验材料 | 第40-42页 |
| ·实验菌种 | 第40页 |
| ·仪器设备 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40-41页 |
| ·培养基 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42页 |
| ·斜面培养方法 | 第42页 |
| ·种子液培养方法 | 第42页 |
| ·产酶发酵液培养方法 | 第42页 |
| ·几丁质脱乙酰酶酶活测定方法 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-54页 |
| ·碳源对菌株D9 产酶的影响 | 第42-44页 |
| ·碳源种类对菌株 D9 产酶的影响 | 第42-43页 |
| ·碳源浓度对菌株 D9 产酶的影响 | 第43-44页 |
| ·氮源对菌株D9 产酶的影响 | 第44-47页 |
| ·氮源种类对菌株 D9 产酶的影响 | 第44-45页 |
| ·氮源浓度对菌株 D9 发酵产酶的影响 | 第45-47页 |
| ·无机盐对菌株D9 产酶的影响 | 第47-48页 |
| ·金属离子对菌株 D9 产酶的影响 | 第48页 |
| ·乙酸盐对菌株D9 产酶的影响 | 第48-49页 |
| ·响应面(Box-Behnken)实验确定最优发酵培养基 | 第49-54页 |
| ·Plackett-Burman 实验设计筛选重要因子 | 第49-51页 |
| ·最陡爬坡实验设计 | 第51页 |
| ·响应面实验设计及分析实验 | 第51-54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 几丁质脱乙酰酶粗酶性质的探究 | 第56-61页 |
| 1 材料与方法 | 第56-58页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·实验菌种 | 第56页 |
| ·实验试剂 | 第56页 |
| ·仪器与设备 | 第56页 |
| ·试剂配制 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-58页 |
| ·菌种培养方法 | 第56页 |
| ·几丁质脱乙酰酶的最适反应温度 | 第56-57页 |
| ·几丁质脱乙酰酶的温度稳定性 | 第57页 |
| ·几丁质脱乙酰酶的最适pH | 第57页 |
| ·金属离子对酶稳定性的影响 | 第57-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-60页 |
| ·几丁质脱乙酰酶的最适反应温度 | 第58页 |
| ·几丁质脱乙酰酶的温度稳定性 | 第58-59页 |
| ·酶促反应的最适pH 及其稳定性 | 第59页 |
| ·金属离子对几丁质脱乙酰酶酶活力的影响 | 第59-60页 |
| ·本章小结 | 第60页 |
| 3 讨论 | 第60-61页 |
| 第五章 结论及展望 | 第61-63页 |
| 1 结论 | 第61-62页 |
| ·菌株的纯化及产几丁质脱乙酰酶的检验 | 第61页 |
| ·菌株诱变 | 第61页 |
| ·突变株D9 产酶培养基的优化 | 第61页 |
| ·几丁质脱乙酰酶性质研究 | 第61-62页 |
| 2 展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读攻读硕士期间发表的论文 | 第70页 |