| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-29页 |
| 第一章 副溶血弧菌的研究概述 | 第11-21页 |
| 1 副溶血弧菌的生物学特性 | 第11-13页 |
| ·菌名与分类地位 | 第11页 |
| ·形态大小 | 第11-12页 |
| ·生长栖息环境和培养特性 | 第12-13页 |
| ·生化特性与鉴定方法 | 第13页 |
| 2 副溶血弧菌的致病性与主要毒力因子 | 第13-21页 |
| ·致病性 | 第13-14页 |
| ·副溶血弧菌的主要毒力因子 | 第14-21页 |
| 第二章 副溶血弧菌的检测与分型方法 | 第21-29页 |
| 1 副溶血弧菌的检测方法 | 第21-23页 |
| ·国家标准方法 | 第21-22页 |
| ·血清学检测 | 第22页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第22-23页 |
| ·核酸杂交法 | 第23页 |
| 2 副溶血弧菌分子分型技术的现状研究 | 第23-29页 |
| ·依赖PCR方法的分子分型技术 | 第24-27页 |
| ·随机扩增多态性DNA分型技术(RAPD) | 第24-25页 |
| ·检测基因序列DNA差别的分型技术 | 第25-26页 |
| ·限制性片段长度多态性分析(RFLP) | 第26页 |
| ·多基因位点序列分析技术(MLST) | 第26-27页 |
| ·不依赖PCR技术的分子分型技术 | 第27-28页 |
| ·核糖体分型技术(RT) | 第27页 |
| ·脉冲场凝胶电泳分析(PFGE) | 第27-28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 第二篇 试验研究 | 第29-69页 |
| 第三章 上海地区副溶血弧菌分离鉴定与毒力基因检测 | 第29-53页 |
| 摘要 | 第29-30页 |
| 1 材料与方法 | 第30-35页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·细菌的分离和培养 | 第31页 |
| ·细菌的鉴定与检测 | 第31-33页 |
| ·细菌gyrB看家基因测序 | 第33-34页 |
| ·毒力因子检测 | 第34-35页 |
| 2 结果 | 第35-43页 |
| ·细菌分离与鉴定 | 第35-36页 |
| ·副溶血弧菌特异性引物PCR鉴定 | 第36-39页 |
| ·gyrB基因测序 | 第39-40页 |
| ·gyrB氨基酸序列比对 | 第40页 |
| ·副溶血弧菌毒力基因的PCR检测 | 第40-43页 |
| ·神奈川溶血现象 | 第43页 |
| ·副溶血弧菌对小鼠半数致死量(LD_(50))的测定 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-53页 |
| 第四章 副溶血弧菌ERIC-PCR分子分型研究 | 第53-59页 |
| 摘要 | 第53页 |
| 1 材料与方法 | 第53-55页 |
| ·菌株 | 第53-54页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第54页 |
| ·DNA的提取 | 第54页 |
| ·ERIC-PCR | 第54-55页 |
| 2 结果 | 第55-58页 |
| ·ERIC-PCR产物电泳 | 第55页 |
| ·ERIC-PCR分型 | 第55-58页 |
| 3 讨论 | 第58-59页 |
| 第五章 副溶血弧菌耐热直接溶血素tdh基因克隆表达与抗原性分析 | 第59-69页 |
| 摘要 | 第59页 |
| 1 材料与方法 | 第59-61页 |
| ·菌株、质粒和感受态细胞 | 第59-60页 |
| ·实验动物 | 第60页 |
| ·试验试剂 | 第60页 |
| ·试验仪器及设备 | 第60页 |
| ·引物设计与合成 | 第60-61页 |
| 2 方法 | 第61-64页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第61页 |
| ·目的基因亚克隆 | 第61页 |
| ·表达质粒构建与鉴定 | 第61页 |
| ·表达载体诱导表达 | 第61-62页 |
| ·包涵体蛋白的复性 | 第62页 |
| ·重组蛋白TDH多克隆抗体的制备 | 第62-63页 |
| ·副溶血弧菌tdh基因表达产物ELISA测定效价 | 第63页 |
| ·Western Blotting分析融合蛋白的免疫反应性 | 第63-64页 |
| 3 结果 | 第64-67页 |
| ·tdh基因的PCR扩增与克隆 | 第64-65页 |
| ·测序结果及同源性分析 | 第65页 |
| ·目的基因在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定 | 第65-66页 |
| ·ELISA测定表达产物免疫效价 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-81页 |
| 全文总结 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
