B型肉毒毒素轻链蛋白的制备及从噬菌体抗体库中筛选特异抗体
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-18页 |
| ·肉毒梭菌 | 第9-10页 |
| ·肉毒毒素 | 第10-15页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第15页 |
| ·噬菌体展示系统 | 第15页 |
| ·噬菌体抗体库筛选 | 第15-16页 |
| ·人源化单克隆抗体库I+J | 第16-17页 |
| ·国内外现状及研究目的 | 第17页 |
| ·研究内容 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-30页 |
| ·材料 | 第18-20页 |
| ·方法 | 第20-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-35页 |
| ·PCR法鉴定重组表达质粒 | 第30页 |
| ·酶切法鉴定重组表达质粒 | 第30-31页 |
| ·测序鉴定重组质粒 | 第31页 |
| ·重组质粒在表达菌中的诱导表达 | 第31页 |
| ·重组蛋白在不同培养基中的诱导表达 | 第31-32页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第32页 |
| ·Western blot检测纯化后的重组蛋白 | 第32-33页 |
| ·BCA法测定蛋白浓度 | 第33页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-38页 |
| ·表达系统的确定 | 第35页 |
| ·酶切体系的确定 | 第35页 |
| ·表达载体的确定 | 第35页 |
| ·重组蛋白的表达形式 | 第35-36页 |
| ·目的蛋白表达条件培养基的优化 | 第36页 |
| ·目的蛋白纯化条件的确定 | 第36页 |
| ·噬菌斑的培养优化 | 第36-38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| ·构建重组质粒 | 第38页 |
| ·诱导条件的确定 | 第38页 |
| ·纯化重组蛋白 | 第38页 |
| ·单链抗体的获得 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 作者简介 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44页 |
